李建霞
- 作品数:8 被引量:22H指数:4
- 供职机构:莱阳农学院更多>>
- 发文基金:科研院所社会公益研究专项国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 转基因豆粕中内源基因和外源基因检测方法的建立被引量:1
- 2008年
- 于忠娜苗向阳单虎李建霞丁兆忠
- 关键词:基因检测豆粕转基因大豆加工
- 抗口蹄疫病毒相关基因的筛选及分析
- 2008年
- 口蹄疫是一种烈性传染病,其广泛流行给社会造成了巨大经济损失。为了研究口蹄疫灭活疫苗免疫的分子机制,同时也为抗口蹄疫病毒药物的研制奠定基础,应用mRNA差异显示技术,以PK-15细胞为材料,系统比较了口蹄疫疫苗刺激组(A组)和正常的PK-15细胞(B组)的基因表达情况,回收差异片段,经二次扩增并纯化后,得到30条ESTs。将30条ESTs采用以地高辛标记的反向Northern点杂交鉴定,将阳性条带克隆测序,筛选出8条ESTs,编号E1~E8,应用BLASTn工具将8条ESTs对核酸数据库nr和dbEST中所有序列进行了同源性分析,其中E1,E2分别与猪的热休克蛋白基因、猪的MHCⅠ类基因同源,序列相似性都达到100%。E3,E4,E5,E7分别与已有核酸数据库中的基因克隆或EST具有较高同源性,为已知的EST,但功能未知;E6,E8在数据库中没有发现与其相似性较高的序列,为新的EST。应用数据库资源将E5,E7进行电子延伸后,将延伸序列进行开放阅读框分析,又经TBLASTx分析发现E7蛋白质序列与猪的精氨酸酶Ⅰ类蛋白序列有很高同源性。将E1,E2,E4,E5序列进行了基因表达谱分析,对E6,E8用BLASTx工具对非冗余蛋白质数据库nr进行了相似性搜索,在其他物种中找到了相似的基因序列。本研究筛选出的热休克蛋白基因、MHCⅠ类基因、精氨酸酶Ⅰ类基因和其他未知功能基因可以作为抗口蹄疫病毒研究中的侯选基因,其具体的功能有待今后进一步研究。
- 李建霞苗向阳任慧英于忠娜
- 关键词:口蹄疫MRNA差异显示技术表达序列标签生物信息学分析
- 应用PCR-ELISA技术检测转基因豆粕
- 2007年
- 以共价交联在PCR管壁上的寡核苷酸作为固相引物进行PCR扩增,液相产物进行电泳检测,固相产物杂交后通过ELISA检测。利用该方法可以检测到1%的转基因产品,并且具有高效性和高特异性,可以进行半定量检测。
- 于忠娜苗向阳单虎李建霞
- 关键词:杂交
- 抗口蹄疫病毒相关基因的筛选及分析
- 口蹄疫是一种烈性传染病,其广泛流行给社会造成了巨大经济损失。为了研究口蹄疫灭活疫苗免疫的分子机制,同时也为抗口蹄疫病毒药物的研制奠定基础,本研究应用mRNA差异显示技术,以PK-15细胞为材料,A组用口蹄疫疫苗刺激,B组...
- 李建霞
- 关键词:口蹄疫基因筛选灭活疫苗基因表达谱
- 文献传递
- 抗菌肽Cecropin P1基因真核表达载体的构建被引量:4
- 2007年
- 选择大肠杆菌偏爱密码子,人工设计合成3条抗菌肽Cecropin P1基因寡核苷酸片段,通过PCR扩增得到抗菌肽Cecropin P1基因的全序列,并将其克隆到T-easy载体上,经双酶切重组于真核表达质粒pcDNA3.1(+)上,经酶切鉴定和序列分析,抗菌肽Cecropin P1基因表达载体构建成功。抗菌肽Cecropin P1基因表达载体的成功构建,为进一步研究其抗菌活性、抗菌机理及应用等打下基础。
- 李建霞苗向阳丁兆忠任慧英于忠娜
- 关键词:CECROPINP1表达载体构建抗菌肽
- 豆粕饲料中转基因成分的多重PCR快速检测被引量:6
- 2007年
- 以大豆内源基因、35S启动子基因、NOS终止子和35S-CTP4为检测对象,研究了对内源基因与外源基因的引物终浓度配比及退火温度对转基因豆粕多重PCR检测的影响。结果表明,建立的多重PCR方法能够准确的同时检测出豆粕中的内源基因和转基因成分。
- 于忠娜苗向阳单虎李建霞
- 关键词:豆粕饲料转基因成分多重PCR
- 转基因产品检测技术及其差异比较被引量:6
- 2007年
- 本文介绍了常用的转基因产品检测方法,包括针对核酸的聚合酶链式反应(PCR)和针对蛋白质的酶联免疫吸附法(ELISA),并对几种检测方法的优缺点进行比较。
- 于忠娜苗向阳李建霞单虎韩荣伟
- 关键词:转基因产品生物安全基因芯片
- RNA干扰技术及其应用被引量:5
- 2006年
- RNA干扰(RNAinterference,RNAi)即通过双链RNA的介导特异性降解相应序列的mRNA,从而导致转录后水平的基因沉默的现象。作为一种简单有效的影响基因表达的工具,RNA干扰已经被广泛应用于许多领域,同时也为基因功能的研究开辟了一条新途径。文章综述了RNA干扰的机制及其应用方面的最新进展。
- 李建霞苗向阳任惠英丁兆忠于忠娜
- 关键词:RNA干扰双链RNA基因功能