李智方
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 供职机构：广西大学更多>>
- 发文基金：南宁市科学研究与技术开发计划项目国家现代农业产业技术体系建设项目转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 蔗糖和海藻糖对水牛卵母细胞玻璃化冷冻保护效果的比较被引量：4
- 2015年
- 本实验比较蔗糖或海藻糖作为非渗透性保护剂对水牛成熟卵母细胞冷冻效果的影响。将体外成熟的水牛卵母细胞随机分成对照组、蔗糖组、海藻糖组,研究玻璃化冷冻后的存活率、细胞骨架和孤雌激活后发育潜能的变化。结果表明:玻璃化冷冻中蔗糖组(89.68%)与海藻糖组(91.81%)的存活率差异不显著;冻融后的卵母细胞在细胞骨架方面的表现为:蔗糖组和海藻糖组的纺锤体结构、染色体形态与微丝分布正常率分别为34.69%、42.83%、39.13%和39.51%、49.43%、42.61%,两组间差异不显著(p>0.05),但均明显低于对照组(66.40%,71.82%,76.18%,p<0.01);在进一步研究发育潜能中发现,冻融后卵母细胞的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数在实验组中均无显著性差异(p>0.05),但两组的卵裂率、囊胚率均显著低于对照组(p<0.01)。综上所述,玻璃化冷冻时添加蔗糖或海藻糖作为非渗透性保护剂对水牛成熟卵母细胞的保护作用差异不明显,表明两者均可在冷冻时添加使用。
- 王彩玲张华智李智方许惠艳杨小淦陆阳清卢晟盛卢克焕
- 关键词：水牛玻璃化冷冻蔗糖海藻糖
- 利用体细胞核移植及嵌合体技术制备荧光蛋白转基因猪的研究
- 猪在体型大小、消化代谢和基因组等方面都与人的极为相似,是人类疾病模型和异种器官移植研究的理想动物,转荧光蛋白报告基因的工具猪在异种移植、嵌合体和医学领域具有重要的应用价值。本研究利用转基因技术、体细胞核移植技术和嵌合体技...
- 李智方
- 关键词：体细胞核移植EGFP嵌合体
- 小型猪克隆胚胎体外培养阶段的优化被引量：2
- 2014年
- 本试验从卵母细胞卵丘多少和初次卵裂时间早晚2个方面进行研究，旨在改善小型猪克隆方案的体外培养环节，提高克隆效率。将卵母细胞按卵丘多少分成3组，比较卵母细胞的成熟效果，取成熟效果好的卵母细胞进行后续试验；PA和SCNT试验均按初次卵裂时间早晚分成3组，在体外培养条件下，比较胚胎的卵裂率和囊胚率。结果表明，卵丘多的卯母细胞体外成熟39～40 h和卵丘少的卵母细胞体外成熟41～42 h，比不区分卵丘多少的卵母细胞体外成熟39～42 h的成熟效果要好；初次卵裂时间发生在26 h以前的胚胎比26 h之后的胚胎在数量和质量上都明显优越，前者胚胎的卯裂率和囊胚率显著高于后者，此结果在孤雌激活（parthenogenetic，PA）胚胎和体细胞核移植（somatic cell nucleartransfer，SCNT）胚胎的体外试验中均得到验证。本研究完善了小型猪克隆方案的体外培养环节，为器官异种移植提供相关技术参考。
- 杨希祥李智方龙川冯冲储明星潘登科李娟
- 关键词：小型猪异种移植体细胞核移植
- 绿色荧光蛋白在α-1,3半乳糖基转移酶敲除猪组织器官的表达分析被引量：1
- 2015年
- 猪是人类异种器官移植的理想供体,然而猪-人的异种器官移植会产生剧烈的排斥反应。虽然已制备的α-1,3半乳糖基转移酶基因敲除(Galactosyltransferase gene knockout,GTKO)猪可有效缓解猪-人异种器官移植引起的超急性免疫排斥,但缺少报告基因直观示踪移植后的细胞迁移及器官排斥状态。本文将CAG启动子驱动增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的表达载体导入GTKO猪耳成纤维细胞,通过体细胞核移植技术制备了EGFP猪。利用双荧光蛋白观测镜、荧光显微镜及定量PCR扩增观察、检测和分析克隆猪各组织器官中EGFP蛋白和转录本的表达状况。结果显示,EGFP蛋白及转录本在克隆猪各组织器官中均有表达,但在肝脏和中枢神经系统中表达较弱。本文成功获得了各组织器官表达EGFP的GTKO猪,为EGFP示踪异种细胞组织移植奠定了基础。
- 李智方冯冲纪慧丽石宁宁宋小凤赵勤丽龙川潘登科杨小淦
- 关键词：增强型绿色荧光蛋白异种移植
