目的探究人表皮生长因子样结构域蛋白7(epidermal growth factor-like domain protein 7,EGFL7)基因在人宫颈癌细胞Hela中低表达对其迁移与侵袭能力的影响。方法将人宫颈癌细胞Hela分为实验组(Hela细胞转染EGFL7-siRNA)和对照组(Hela细胞转染Mock-siRNA),采用实时定量PCR法检测两组细胞中EGFL7 mRNA的含量;蛋白免疫印迹实验检测两组细胞EGFL7蛋白的表达量;利用细胞划痕愈合实验和transwell实验检测两组Hela细胞的迁移与侵袭能力。结果siRNA降低了人宫颈癌细胞Hela中EGFL7的蛋白表达;对照组Hela细胞划痕愈百分率为74.1%±6.8%,EGFL7表达降低后宫颈癌细胞划痕愈合百分率为42.0%±4.9%,划痕愈合能力明显下降(P<0.05);Transwell细胞转移结果显示,对照组Hela细胞成功转移的细胞数量为179.24±20.01,而低表达EGFL7的Hela细胞成功转移的细胞数量为79.22±13.16,转染EGFL7-siRNA的细胞转移能力显著下降(P<0.05);侵袭实验结果表明,对照组成功转移的细胞数量为79.35±8.04,EGFL7-siRNA组成功转移的细胞数量为26.98±6.24,低表达EGFL7的Hela细胞侵袭能力明显下降(P<0.05);低表达EGFL7的Hela细胞E-cad表达上调,MMP2/9蛋白的表达下调(均P<0.05)。结论EGFL7低表达会通过上皮间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)EMT降低人宫颈癌细胞Hela的迁移与侵袭能力。
目的探讨阿片类生长因子受体假基因1(OGFRP1)对卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法选取120例卵巢癌患者癌组织及正常卵巢组织,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测OGFRP1和miR-665表达水平;将A2780细胞分为空白(PBS)组、si-NC组、si-OGFRP1组、miR-NC组、miR-665组、si-OGFRP1+anti-miR-NC组、si-OGFRP1+anti-miR-665组。四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞存活率;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告实验检测OGFRP1和miR-665的靶向关系。结果与正常卵巢组织相比,卵巢癌组织中OGFRP1表达水平升高(2.75±0.27 vs 1.00±0.09),miR-665表达水平降低(0.51±0.05 vs 1.00±0.08)(均P<0.05)。抑制OGFRP1表达或过表达miR-665后,卵巢癌A2780细胞的活性、细胞迁移与侵袭数均降低(均P<0.05)。双荧光素酶报告实验结果显示,OGFRP1靶向调控miR-665;抑制miR-665和OGFRP1表达后,卵巢癌A2780细胞活性升高,迁移、侵袭细胞数增加(P<0.05)。结论抑制OGFRP1表达可抑制卵巢癌A2780细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与上调miR-665有关。
