李道坤
- 作品数：13 被引量：26H指数：3
- 供职机构：湖北文理学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- PEITC对人鼻咽癌CNE-1/CNE-2细胞凋亡作用及机制研究被引量：1
- 2016年
- 目的:观察PEITC(异硫氰酸苯乙酯)对人鼻咽癌CNE-1/2细胞生长的影响以及对正常鼻咽部上皮细胞的毒性作用,探讨其抗肿瘤作用机制.方法:MTT法测定PEITC对CNE-1/2细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测PEITC对CNE-1/2细胞凋亡和氧化还原水平的影响;NAC阻断后其氧化还原水平的变化.结果:PEITC能抑制CNE-1/2细胞生长,随时间延长和剂量增加肿瘤细胞数明显减少,CNE-2凋亡作用更加明显,而对NP-69细胞组细胞毒性较低.当10.0 mg·ml^(-1) PEITC在96 h时间点,NP-69细胞组IC50(12.62±0.52)与CNE-1组(3.57±0.34)、CNE-2细胞组IC_(50)(2.64±0.20)差异具有统计学意义(P<0.01);用Annexin V/PI染色流式细胞检测各组细胞经PEITC处理24 h后细胞发生凋亡,随着PEITC浓度(0、5.0、10.0 mg·ml^(-1))的增加,细胞凋亡率增加;当PEITC10.0 mg·ml^(-1)浓度时,CNE-1/CNE-2凋亡率与对照组差异具有统计学意义(P<0.01);DCFH-DA探针标记后流式检测活性氧水平结果显示:CNE-1/CNE-2活性氧水平分别在6、12h时间点与对照组差异具有统计学意义(P<0.01);Rhodamine-123试剂盒测定线粒体膜电位显示:10.0 mg·ml^(-1)浓度PEITC时CNE-1/CNE-2线粒体膜电位在24 h时间点与对照组差异具有统计学意义(P<0.01);用NAC预处理各组细胞后检测细胞活性氧及线粒体膜电位均出现反向作用.结论:PEITC能抑制人鼻咽癌CNE-1/2细胞的生长,同时对NP-69细胞具有低毒性,其抗肿瘤作用可能与其干扰细胞内的氧化还原反应,诱导细胞凋亡有关.
- 张功学王明华李道坤
- 关键词：鼻咽癌细胞凋亡
- 膀胱低频电刺激与传统疗法治疗初产后尿潴留的疗效对比研究
- 2022年
- 目的:探讨低频脉冲电刺激对于盆底康复盆底功能治疗产后尿潴留的效果。方法:选取2021年6月~2022年4月我院收治的初产分娩后尿潴留产妇101例,根据其治疗方案不同分为三组,治疗组A (n = 32)、治疗组B和治疗组C,分别采用传统治疗、低频脉冲电刺激联合治疗和综合两种方案治疗,对各组产后尿潴留初产妇治疗后24小时出血量、膀胱残余尿量、住院时间及治疗效果等指标进行对比分析。结果:治疗组B和治疗组C效果好于治疗组A (P < 0.05)。结论:对初产分娩后尿潴留产妇实施低频脉冲电刺激对盆底功能进行治疗,有利于治疗患者尿潴留及产后出血等症状,效果明显值得推广应用。
- 张帆李道坤
- 关键词：低频脉冲电刺激临床疗效
- 赖型钩端螺旋体外膜蛋白Loa22诱导细胞凋亡Ca^(2+)信号通路机制
- 2010年
- 吴秉婷孙湛李道坤鲍朗
- 关键词：赖型钩端螺旋体细胞凋亡细胞内游离钙成熟肽流式细胞仪检测钙调素
- 重组CEA和IL-2抗肿瘤基因疫苗的构建及其抗肿瘤作用研究被引量：1
- 2013年
- 目的成功构建重组CEA、CEA/IL-2抗肿瘤基因疫苗,并检测其激活的淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。方法将CEA、CEA/IL-2基因导入真核表达质粒pcDNA3.1,并转染入DC细胞,通过转染DC细胞活化淋巴细胞,将活化的淋巴细胞与人CEA+肝癌细胞共培养,检测其对肿瘤细胞的杀伤作用。结果重组CEA、CEA/IL-2组均检测出较强的抗肿瘤效应,且重组CEA/IL-2组与重组CEA组差异具有统计学意义(P<0.05)。结论联合CEA/IL-2基因疫苗具有抗肿瘤作用,且其抗肿瘤作用明显优于单基因CEA基因疫苗,证实了重组肿瘤基因疫苗对肿瘤细胞的杀伤作用。
- 李道坤张帆孙维权张勤龚文容
- 关键词：基因疫苗抗肿瘤
- TBL教学法与传统教学法在地方高校病理实验教学中的应用比较被引量：10
- 2013年
- 目的探讨教学改革中TBL教学法在地方高校病理学实验教学中的应用可行性。方法将2010级临床专业两个班随机分为实验组和对照组,对照班采用传统讲授法教学,实验班用TBL教学模式教学。课程结束后对两个班实验报告进行评分以及理论考试成绩进行比较。结果两个班实验报告进行评分以及理论考试成绩差异均具有统计学意义。结论在地区高校病理学实验教学病例讨论中引入TBL教学法具有可行性,TBL教学在病例讨论中能够调动学生学习的积极性,培养学生的自学能力,教学效果优于传统教学法。
- 李道坤张帆山超包真孙维权
- 关键词：病理学实验教学
- 基层医院护理人员教育情况及工作现状的调查分析被引量：6
- 2015年
- 目的：深入了解基层医院护理人员教育及工作情况，为我国基层医疗护理人才培养、医疗改革提供参考。方法采用随机抽样调查选取5所二级甲等及以下基层医院护理人员520人，对其职称、教育情况、待遇、工作满意度、编制等方面进行问卷调查。结果基层医院护理人员起始学历：起始学历本科初级职称占（36.23±9.42）%，而中、高级职称护理人员起始学历为本科分别占（12.43±2.68）%、（3.57±2.38）%，组间比较差异有统计学意义，P＜0.05；通过再教育后获得初级职称护理人员本科及以上学历占（84.78±34.13）%，中级职称为（60.73±17.94）%，高级职称达到100.00%，组间比较差异有统计学意义，P＜0.05；其中（63.77±19.20）%的初级职称护理人员通过继续教育提高学历，中级职称占（72.32±20.62）%，而高级职称占（96.43±37.50）%；护理人员月工资收入初级为（1082±258）元，中级（1633±426）元，高级（2864±587）元，组间比较差异有统计学意义，P＜0.05；编制初级职称为（18.84±3.27）%，中级（56.50±6.58）%，高级（85.71±17.63）%，组间比较差异有统计学意义，P＜0.05；人员流动率初级职称护理人员为（25.36±7.54）%，中级职称为（-6.50±2.14）%，高级职称为（-3.57±1.53）%，组间比较差异有统计学意义，P＜0.05；工作满意度调查显示，初级职称为（26.09±6.32）%，中级（37.85±5.16）%，高级（57.14±8.49）%，组间比较差异有统计学意义，P＜0.05。结论基层医院护理人员起始学历层次普遍不高，经再教育后达到较高学历；工作满意度不高，初级职称人员编制较少，流失严重。在医改形势下，护理人员教育水平、护理质量普遍提高的同时，提高护理人员的待遇，对于我国基层护理事业的发展不容忽视。
- 王明华李道坤肖娟
- 关键词：护理教育
- 赖型钩端螺旋体溶血素HlyX对血管内皮细胞通透性的影响
- 2011年
- 目的:克隆表达赖型钩端螺旋体溶血素基因hlyX,观察其表达产物对人脐静脉内皮细胞(HU-VECs)通透性的影响,并初步探讨其机制。方法:将hlyX基因插入原核表达载体pET32a(+),构建重组质粒pET-hlyX,转化大肠杆菌BL21(DH3)以高效表达携带组氨酸标签的Trx-HlyX融合蛋白,并作亲和层析纯化。采用生物素标记白蛋白的酶联免疫吸附法测定目的蛋白对HUVECs单细胞层通透性的影响,并以流式细胞术及Ho-echst 33258荧光染色方法检测其作用于HUVECs后的细胞凋亡率。结果:成功构建了重组质粒pET-hlyX并高效表达出Trx-HlyX融合蛋白;与对照组相比较,蛋白Trx-HlyX作用于HUVECs后,明显增加其通透性(P<0.05),细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。结论:重组质粒pET-hlyX高效表达出Trx-HlyX融合蛋白,纯化后的融合蛋白对HUVECs通透性有影响,且对HUVECs具有细胞毒性作用。
- 孙湛吴秉婷李道坤鲍朗
- 关键词：钩端螺旋体通透性人脐静脉内皮细胞
- 赖型钩端螺旋体外膜蛋白Loa22诱导细胞凋亡Ca2+信号通路机制
- 目的:探讨赖型钩端螺旋体外膜蛋白Loa22对人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549)[Ca]影响造成的细胞凋亡,初步揭示该蛋白作用细胞可能的信号机制。方法:采用特异阻断剂U73122预处理A549,阻断PLC-γ1激活细胞内Ca释...
- 吴秉婷孙湛李道坤鲍朗
- 文献传递
- 赖型钩端螺旋体OmpA外膜基因Loa22重组卡介苗的构建及其免疫蛋白表达被引量：1
- 2010年
- 目的以赖型钩端螺旋体外膜蛋白A(OmpA)膜蛋白基因Loa22去信号肽基因片段构建重组卡介苗并对其免疫蛋白进行表达分析。方法以赖型钩端螺旋体56601株全基因组DNA为模板,PCR扩增出Loa22成熟肽基因片段,与大肠杆菌-结核分枝杆菌穿梭整合质粒pMV361一起分别经过双酶切,连接,转化。筛选鉴定出阳性重组质粒rpMV361-loa22,电转化入BCG,经筛选鉴定后,热诱导表达,通过SDS-PAGE及Western Blotting鉴定其表达产物。分别用BCG、rBCG-pMV361、rBCG-loa22、Loa22蛋白、灭活全钩体免疫小鼠两次后,脱臼处死小鼠分离脾淋巴细胞,XTT比色法检测体外脾淋巴细胞增殖活性。结果PCR扩增获得516 bp的片段,成功构建重组穿梭质粒rpMV361-loa22,经电转化构建重组卡介苗成功,热诱导表达出相对分子质量约19×103特异条带。体外脾淋巴细胞增殖实验证实rBCG-loa22可引起细胞反应,其增殖活性与BCG组和rBCG-pMV361组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了赖型钩端螺旋体重组卡介苗rBCG-loa22并高效表达具有免疫学活性的外膜蛋白Loa22,为新一代钩端螺旋体疫苗研究打下了基础。
- 李道坤鲍朗张英孙湛
- 关键词：赖型钩端螺旋体外膜蛋白A重组卡介苗免疫保护
- 赖型钩端螺旋体OmpA外膜蛋白Loa22通过Ca^(2+)信号通路介导A549细胞凋亡被引量：1
- 2011年
- 目的研究赖型钩端螺旋体(简称钩体)外膜蛋白Loa22通过Ca2+信号通路对细胞凋亡的影响,探讨该基因在钩体黏附侵袭细胞并诱导其凋亡过程中可能的信号传导机制。方法以人肺腺上皮细胞(A549)为模型,用100μg/mL纯化Loa22成熟肽作用于细胞24 h,检测细胞凋亡及细胞内游离钙浓度([Ca2+]i),观察F-actin细胞骨架变化,检测钙调素(CaM)mRNA表达水平。同时设磷脂酶C(PLC)特异阻断剂U73122预处理+Loa22成熟肽组,观察上述指标变化。结果 Loa22成熟肽作用A549后,细胞凋亡率升高,并诱导[Ca2+]i增加,CaMmRNA表达水平及乳酸脱氢酶(LDH)活性上升,F-actin细胞骨架重排。而预先用U73122预处理后,细胞凋亡率、[Ca2+]i、CaMmRNA和LDH活性均降低(P<0.01),F-actin细胞骨架重排程度减轻。结论 Loa22成熟肽通过PLC信号通路触发细胞[Ca2+]i升高,导致F-actin细胞骨架重排,从而引发细胞凋亡,提示该基因参与钩体侵袭细胞引发细胞凋亡病理过程,可能是致病性钩体的一个重要毒力相关基因。
- 吴秉婷鲍朗孙湛李道坤张英
- 关键词：赖型钩端螺旋体细胞凋亡钙调素
