梁小娟
- 作品数：15 被引量：21H指数：2
- 供职机构：信阳师范学院生命科学学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪hnRNPK基因启动子的克隆及序列分析
- 2014年
- 首次克隆了猪hnRNPK基因启动子序列,并进一步对该序列进行了分析.结果显示:该基因启动子约1 kb,与已报道的人的相应序列相似度为78.9%,具有相同的"TCTCGCGAGA"核心启动子序列和转录起始位点.利用在线软件分析发现,猪hnRNPK基因启动子不含TATA盒,而含有CAAT盒的GC富集区,存在两处CpG岛,具有SP1、UCE.2、GCF、EARLY-SEQ1、TTR_inverted_repeat、NGFI-C、EARLY-SEQ1等多种转录因子潜在结合位点,并且具有8种基序结构.
- 马超锋梁小娟王明玉徐永杰
- 关键词：启动子转录因子
- 细胞膜渗透性实验的改进及鸡血液DNA的提取被引量：5
- 2010年
- 以成年鸡血为材料,分析了不同浓度NaCl、NH4Ac、乙醇、葡萄糖条件下鸡红细胞的渗透性;采用盐析法和碘化钾(KI)法提取鸡血细胞DNA,用二苯胺法和紫外分光法鉴定DNA提取效果。结果表明,在低渗、等渗、高渗溶质中,乙醇渗入细胞的速度都是最快的;用二苯胺法检测从鸡血液中提取的DNA,发现盐析法提取的DNA颜色反应较碘化钾法深;盐析法和碘化钾法提取DNA的光吸收值比率分别为1.6～2.0和1.8～2.0,产量分别为0.7×10-6～0.9×10-6 g/L和0.4×10-6～0.6×10-6 g/L。
- 马云梁小娟刘英程珍珍豆佳丽陈志娥
- 关键词：细胞膜渗透性DNA提取盐析法
- 信阳水牛PRL基因单核苷酸多态性与生长性状的相关性研究
- 本研究采用PCR-SSCP及DNA测序技术,以50头信阳水牛为材料,采集血样,提取基因组DNA,以GenBank公布的牛PRL基因(NC 007324)序列作为参照序列,设计PCR引物,对PRL,基因的第2、4、5外显子...
- 马云王伍梁小娟王璐李芬徐源姚瑾
- 关键词：信阳水牛催乳素基因PCR-SSCPSNPS生长性状
- 文献传递
- 牛肉质性状功能基因组学研究进展
- 2010年
- 功能基因组学的研究使人们能够从分子水平上对牛肉品质进行改良,从而得到优质高档的牛肉.牛的肉质性状与牛肉的经济价值紧密相关,其主要包括嫩度、大理石花纹、多汁性等.鉴于近年来牛肉质性状相关领域的研究比较活跃,利用68篇文献对牛的主要肉质性状的QTL、SNP遗传标记、cDNA文库以及与牛肉质性状相关的基因的研究现状和进展进行了综述.
- 马云郑倩梁小娟徐源姚瑾李芬
- 关键词：基因组学基因
- 信阳水牛GHRH基因第二外显子的SNPs检测被引量：2
- 2012年
- [目的]检测信阳水牛群体GHRH基因的SNP多态性。[方法]以56头信阳水牛为材料,采集血样,提取基因组DNA,以GenBank公布的牛GHRH基因(gi:194719389)序列作为参照序列,设计PCR引物,采用PCR-SSCP和DNA测序方法对该基因第二外显子的进行突变检测。[结果]经SSCP分析发现,这些个体总共出现六种不同的带型。测序结果表明:位于GHRH基因的4 461bp、4 529bp、4 845bp、5 053bp和5 058bp处分别存在C→T、T→G、G→A、G→A和G→T五个单核苷酸突变。[结论]表明该基因在信阳水牛群体中单核苷酸多态较为丰富。
- 徐永杰吴海港姚瑾刘英梁小娟马云
- 关键词：信阳水牛SNPSPCR-SSCP
- 信阳水牛GH基因多态性与部分生长性状的相关性被引量：1
- 2012年
- 采用PCR-SSCP及DNA测序技术,以106头信阳水牛为材料,采集血样,提取基因组DNA,以GenBank公布的牛GH基因序列(NC_007317)为参照序列,设计PCR引物,对GH基因的第2、3外显子及部分内含子进行了遗传变异检测,并将其多态性与部分生长性状进行了相关分析。结果表明:每个位点的PCR产物经SSCP分析均出现不同的带型,第2外显子存在1处SNP(G413A),第2内含子存在4处SNPs(G495C,A523C,A541G,G699A),信阳水牛GH基因的GH-P3位点的多态性与部分生长性状没有显著相关性。
- 王利明梁小娟石亚飞高乔志张巧玉吴海港马云
- 关键词：信阳水牛GH基因生长性状
- 中国部分地方牛种mtDNA D-loop区全序列的遗传多样性与系统进化分析被引量：7
- 2012年
- 利用PCR测序及生物信息学分析技术,对我国5个地方黄牛品种、5个地方水牛品种及2个地方牦牛品种的mtDNA D-loop区全序列进行PCR扩增以及核苷酸多样度、单倍型多样度分析,发现中国地方黄牛、水牛与牦牛具有丰富的遗传多样性.对试验牛mtDNA D-loop区全序列与牛亚科代表性物种黄牛、水牛、家牦牛、野牦牛、欧洲普通牛、印度瘤牛以及摩拉水牛相应序列进行系统发育分析.结果显示:黄牛与牦牛的亲缘关系较近,它们与水牛的亲缘关系较远;中国水牛属于沼泽型水牛,也有少量江河型水牛渐渗入中国水牛群体;中国黄牛为普通牛和瘤牛的混合母系起源;进化树显示高原牦牛与野牦牛的亲缘关系较近,环湖牦牛与家牦牛的亲缘关系较近.
- 马云于波徐永杰吴海港梁小娟付蕾李芬
- 关键词：D-LOOP系统进化
- 猪hnRNPK蛋白与酪氨酸蛋白激酶c-Src的互作分析
- 2018年
- 旨在探讨猪不均一核糖核蛋白K(hnRNPK)与含SH3结构域的非受体型酪氨酸激酶(c-Src)之间的互作关系。采用PCR和酶切连接的方法,构建pGBKT7-hnRNPK、pGADT7-c-Src、pGADT7-ΔSH3、pGADT7-ΔSH2、pGADT7-ΔPTKc和pGADT7-SH3酵母双杂交载体,用PEG-LiAc法转化到酵母菌株AH109中,鉴定其自激活活性,并通过酵母双杂交方法从体内验证猪hnRNPK蛋白与c-Src不同缺失体之间的相互作用;采用DNA重组技术构建pET28a-hnRNPK与pGEX-6p1-c-Src、pGEX-6p1-ΔSH3、pGEX-6p1-ΔSH2、pGEX-6p1-ΔPTKc和pGEX-6p1-SH3蛋白表达载体,转化E.coli BL21经IPTG诱导表达目的蛋白,利用亲和层析纯化法纯化融合蛋白,通过GST pull-down试验从体外验证猪hnRNPK蛋白与c-Src不同缺失体之间的相互作用。结果表明,成功构建了猪hnRNPK与c-Src不同缺失体的酵母双杂交重组质粒,转化酵母细胞发现各质粒均无自激活活性;在酵母中,与阴性对照相比,共转化pGBKT7-hnRNPK与pGADT7-c-Src或pGADT7-ΔPTKc或pGADT7-SH3的酵母菌落在SDTrp-Leu-His-Ade四缺培养基上生长良好,表明在酵母中hnRNPK与c-Src激酶N端的SH3结构域之间存在直接的相互作用;成功构建了猪hnRNPK与c-Src不同缺失体的融合表达质粒,经IPTG诱导表达及纯化获得了可溶性His-hnRNPK、GST-c-Src、GST-ΔSH3、GST-ΔSH2、GST-ΔPTKc和GST-SH3融合蛋白,GST pull-down试验表明,hnRNPK与c-Src N端存在较强的相互作用,与SH2和PTKc结构域相互作用则较弱。本研究揭示了猪hnRNPK蛋白可与c-Src蛋白的N-端的SH3结构域互作,有助于进一步研究它们的调节位点,为深入探讨hnRNPK与c-Src相互调控关系,进而阐明其生物学功能奠定了基础。
- 梁小娟徐海霞徐海霞张朋朋李瑞
- 关键词：C-SRC酵母双杂交DOWN
- 信阳水牛GH基因多态性与部分生长性状的相关性
- 2012年
- 本研究采用PCR-SSCP及DNA测序技术,以106头信阳水牛为材料,采集血样,提取基因组DNA,以GenBank公布的牛GH基因序列(NC_007317)为参照序列,设计PCR引物,对GH基因的第2、3外显子及部分内含子进行了遗传变异检测,并将其多态性与部分生长性状进行了相关分析。结果表明:每个位点的PCR产物经SSCP分析均出现不同的带型,第2外显子存在1处SNP(G413A),第2内含子存在4处SNPs(G495C,A523C,A541G,G699A),信阳水牛GH基因的GH-P3位点的多态性与部分生长性状没有显著相关性。
- 吴海港梁小娟石亚飞高乔志张巧玉马云
- 关键词：信阳水牛GH基因生长性状
- 猪CCT5基因的cDNA克隆、序列分析及时空表达被引量：2
- 2013年
- 基于2-DE和MS的蛋白质组学方法分析梅山猪骨骼肌发育过程中蛋白质动态表达变化,发现CCT5差异表达。为进一步获得猪CCT5基因的序列特征、时空表达及生物学功能等相关信息,克隆猪CCT5基因,分析不同物种序列进化关系,检测CCT5在猪不同组织和骨骼肌不同发育阶段中的表达。序列分析结果表明:在获得的2 286 bp猪CCT5 cDNA序列中包括1 626 bp的完整开放阅读框(ORF),编码541个氨基酸,其氨基酸序列与人的相似性为97%,表明该蛋白在不同物种间高度保守。荧光定量PCR结果显示,CCT5基因在猪肌肉和脂肪中表达量最高,心、肝等组织中表达量很低,没有肌纤维特异性;不同发育阶段骨骼肌中,该基因在出生后3 d的表达量最高,胚胎期表达量最低;在不同品种间,胚胎期及出生后3、30和180 d的表达量大白猪显著高于梅山猪(P<0.05),而60 d却显著低于梅山猪(P<0.05)。结果提示:CCT5基因在猪骨骼肌发育过程中起着重要作用。
- 徐永杰郭英王延博金芳芳刘邓英梁小娟宋新强陈世锋熊远著马云
- 关键词：骨骼肌克隆
