温伟红
- 作品数：102 被引量：303H指数：8
- 供职机构：佛山市中医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 抗鳗弧菌独特型单克隆抗体重链可变区基因的克隆及序列测定被引量：2
- 2003年
- 夏永娟黄宝成温伟红黄威权杨安钢
- 关键词：单克隆抗体重链可变区
- 电转化条件对大肠杆菌XL1-Blue菌株转化效率的影响被引量：22
- 2003年
- 探讨XL1-Blue菌株电转化的最优条件。通过改变电压、质粒DNA浓度、细菌生长周期等影响电转化的重要条件,做出转化率的变化曲线,从中探索电转化的最优条件。实验结果得出在电容25μF、电阻200 Ω、电压2.5 kV、D600nm为0.3～0.4、0.2 cm电转化杯、DNA终浓度0.1μg/ml、感受态细胞终浓度2.5×1012、氨苄青霉素浓度50μg/ml的条件下,电转化效率最高,可达到7.64×108。电转化实验转化效率高,重复性好,为成功的建立抗体库提供了保证。
- 韦晓明苏明权杨安钢赵晶温伟红郝晓柯
- 关键词：电穿孔电转化大肠杆菌
- 转录因子SOX9基因对脑胶质瘤干细胞干性维持的相关性研究被引量：2
- 2015年
- 目的:应用慢病毒干扰SOX9的表达,观察其对脑胶质瘤干细胞干性维持的影响。方法:设计2条针对SOX9转录短发夹RNA(sh RNA)的DNA序列,构建慢病毒并感染胶质瘤细胞系U87、U251细胞,利用嘌呤霉素筛选稳转细胞。在转录水平及蛋白水平检测SOX9的沉默效果,利用荧光实时定量PCR(q RT-PCR)及免疫荧光染色检测相应干细胞相关标志分子SOX2、Nestin的表达差异。比较诱导形成的胶质瘤干细胞成球能力(肿瘤干细胞成球的直径),同时利用荧光实时定量PCR(q RT-PCR)及免疫荧光染色对干细胞相关标志物SOX2、Nestin的表达水平进行比较。结果:SOX9成功包装慢病毒并有效感染U87、U251细胞,实时荧光定量PCR检测其抑制率分别可降低83.74%和80.12%。并且在稳转细胞系水平相关干细胞标志分子表达含量有明显下降。在干细胞层面沉默SOX9可以明显抑制胶质瘤细胞诱导成球的直径(P<0.01),同时免疫荧光显示肿瘤干细胞相关干性分子SOX2、Nestin的表达水平较对照组明显降低。结论:慢病毒感染沉默SOX9基因可以抑制胶质瘤干细胞干性的维持,为胶质瘤的生物治疗提供了重要的靶点。
- 张磊涂艳阳张鹏幸杨安钢吴介恒缪吉玉温伟红张永生
- 关键词：SOX9慢病毒胶质瘤干细胞
- EZH2在前列腺癌中的表达及临床意义被引量：5
- 2014年
- 目的:研究EZH2在前列腺癌中的表达及临床意义。方法:利用免疫组化的方法研究EZH2在前列腺良性增生性病变组织与前列腺癌组织中的表达,分析EZH2的表达与肿瘤Gleason评分之间的关系。结果:EZH2在前列腺癌细胞中高表达,其高表达趋势与前列腺癌的Gleason评分水平成正相关。结论:EZH2蛋白的异常表达可能在前列腺癌的生长、浸润和转移过程中起促进作用,可能成为一种反映前列腺癌生物侵袭性的标志物。
- 苏燕胜李富军高云贾红兵王倩云秦卫军温伟红王禾
- 关键词：前列腺癌免疫组织化学法EZH2
- 前列腺癌体内实验模型的研究进展
- 2015年
- 前列腺癌是男性最为常见的恶性肿瘤之一。近年来有关前列腺癌的相关研究取得了较大突破,但由于缺少有效的体内实验模型,导致研究成果向临床应用的转化受到严重阻碍。人源性前列腺癌移植(patient derived prostate tumor xenograft,PDPTX)模型是将患者新鲜的肿瘤组织移植于免疫缺陷小鼠而建立的体内模型,该模型能较好地复制原发肿瘤的异质性,保持肿瘤在分子学、基因学和病理学的复杂性。特别是采用肾包膜移植建立PDPTX模型的方法较好地解决了传统皮下移植建模成功率低、低级别肿瘤成瘤难、无法实现移植瘤转移等缺点,为前列腺癌研究提供了更为理想的体内模型。尤其是在靶向治疗、新型药物筛选、个体化治疗等方面具有不可取代的优势。
- 聂迪森秦卫军温伟红赵宁宁师长宏
- 关键词：前列腺癌移植瘤模型靶向治疗个体化治疗
- 人源性抗前列腺特异性膜抗原单链抗体的表达及活性鉴定
- 2016年
- 目的构建人源性抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)单链抗体(sc Fv)的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化后,对其生物学活性进行鉴定。方法将人源性抗PSMA sc Fv的基因克隆入原核表达载体p ET302,将其转化入大肠杆菌BL21后用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,摸索不同诱导条件使sc Fv呈可溶性表达,经SDS-PAGE和Western blot法确认表达后,利用Ni2+-NTA亲和层析柱纯化目的蛋白。利用流式细胞术检测sc Fv与PSMA阳性和阴性细胞的结合情况。结果成功构建人源性抗PSMA sc Fv的原核表达载体;在30℃、IPTG终浓度为0.05 mmol/L时,可实现目的蛋白的可溶性表达;经Ni2+-NTA亲和层析柱纯化后获得纯度较高的抗PSMA sc Fv蛋白;流式细胞术结果显示该sc Fv可与PSMA阳性的LNCa P前列腺癌细胞特异性结合,而不与PSMA阴性的PC-3细胞结合。结论在大肠杆菌成功表达了可溶性人源性抗PSMA sc Fv,获得的抗PSMA sc Fv能够特异性地与PSMA阳性前列腺癌细胞结合。
- 韩东晖吴介恒欧阳清魏铭席文锦杨安钢温伟红秦卫军
- 关键词：单链抗体原核表达
- 采用互动式教学进行《医学免疫学》课堂授课的体会被引量：13
- 2016年
- 医学免疫学是基础医学的重要组成部分,是我国高等医学院校的专业必修课。作为生命科学的前沿学科,医学免疫学的理论和技术发展日新月异,并不断向临床医学和预防医学等多学科渗透,已逐步成为沟通基础医学和临床医学的重要桥梁学科。尽管具有重要的学科地位,但医学免疫学具有理论性强,内容抽象、枯燥等特点,大部分学生认为它是一门让人头疼的学科,大量的免疫学概念,免疫分子、免疫细胞之间的相互作用,以及它们与临床疾病之间的关系，使学生们感到非常难以理解和记忆。
- 温伟红王涛庄然宋朝君马樱金伯泉杨琨杨安钢
- 关键词：医学免疫学互动式教学课堂授课学科地位免疫分子
- 靶向X区的siRNA抑制乙型肝炎病毒基因的表达和复制被引量：4
- 2006年
- 目的构建针对乙型肝炎病毒(HBV)X基因的siRNA表达载体,观察其对HBV基因表达和复制的影响。方法设计并合成针对HBVX区基因的siRNA寡核苷酸,经退火形成双链后克隆入pSUPER载体,构建成功的siRNA表达载体与pTK-Hyg质粒共转染稳定表达HBV的HepG22·2·15细胞,潮霉素抗性筛选获得稳定细胞克隆,对所得细胞培养上清液中的HBsAg和HBeAg进行定量检测,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测靶基因mRNA的抑制效果,荧光定量PCR检测HBVDNA。结果成功构建了针对HBVX基因的siRNA表达载体pSUPER-X1和pSUPER-X2,两种siRNA均能明显抑制HepG22·2·15细胞的HBsAg和HBeAg分泌,抑制率分别为97%和88%,RT-PCR结果显示HBV的mRNA表达降低,荧光定量PCR结果证实siRNA能降低HBVDNA拷贝数2个数量级。结论载体产生的针对HBVX基因的siRNA能高效、特异地抑制HBV基因的表达和复制。
- 刘家云郝晓柯李庆霞黄红艳马龙洋温伟红贾林涛杨安钢
- 关键词：肝炎病毒乙型小分子干扰转染聚合酶链反应
- MicroRNA-101通过靶向SOX9抑制人胶质母细胞瘤的增殖、迁移和侵袭被引量：12
- 2017年
- 多形性胶质母细胞瘤(GBM)起源于大脑皮质,是最常见的原发性恶性肿瘤.尽管当今的治疗手段不断进步,包括手术、放疗、化疗和光动力治疗等,然而GBM患者的预后情况仍然较差.最近的研究表明,microRNA-101(miR-101)在人肿瘤中显著下调,并与肿瘤细胞的增殖和肿瘤干细胞的自我更新有关.另外,miR-101在神经胶质瘤标本和细胞系中显著下调,但胶质瘤中miR-101的这种下调现象的分子机制尚不明确.本研究发现miR-101可以通过靶向SOX9在体内和体外抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭.沉默SOX9对胶质瘤细胞的增殖和侵袭影响与miR-101类似.qRT-PCR和Western blot检测发现在人神经胶质瘤细胞系U251MG和U87MG中miR-101与SOX9呈负相关,荧光素酶报告分析发现miR-101可以通过靶向SOX9的3’UTR区抑制SOX9的表达.研究结果表明miR-101通过靶向抑制SOX9的表达在体内和体外调节人神经胶质瘤的增殖、迁移和侵袭,说明miR-101是未来神经胶质瘤治疗的潜在靶标.
- 刘楠张磊王震王震成迎端张鹏幸王欣温伟红杨宏伟刘辉金卫林张永生
- 关键词：SOX9迁移增殖
- HLA-G调控自然杀伤细胞免疫功能的研究进展被引量：8
- 2015年
- 人白细胞抗原G(HLA-G)属于非经典的HLAⅠ类分子,正常情况下主要表达于母胎界面绒毛外滋养层细胞。一些肿瘤细胞系、肿瘤组织、感染的组织细胞及正常组织细胞也可检测到HLA-G的表达。自然杀伤(NK)细胞是重要的固有免疫细胞,在免疫应答与免疫调节过程中发挥重要作用。HLA-G参与免疫调控引发了越来越多的关注,其功能由最初的"母胎耐受"逐渐扩展到肿瘤免疫逃逸、器官移植耐受等多个方面,本文重点回顾了HLA-G参与调控NK细胞免疫功能的各种机制:通过与受体相互作用抑制NK细胞的杀伤作用、调节NK细胞表面受体及细胞因子的表达、通过胞啃作用(trogocytosis)广泛引发免疫抑制、引发NK细胞凋亡。
- 郭张燕郑国旭温伟红杨安钢
- 关键词：HLA-GNK细胞肿瘤逃逸
