满永
- 作品数：80 被引量：333H指数：8
- 供职机构：北京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 细胞外囊泡在非酒精脂肪肝发病机制及诊断治疗中的作用被引量：4
- 2018年
- 非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)是21世纪全球最重要的公共健康问题之一,也是我国愈来愈重要的慢性肝病问题。细胞间通讯在NAFLD病理进程中发挥重要作用。细胞外囊泡(extracellular vesicles, EVs)是近年来备受关注的细胞间通讯方式。EVs携带脂质、蛋白质、DNA、mRNA以及非编码RNA等作为信号分子在细胞间的物质和信息交流中起重要作用,参与了多个生理病理过程。目前细胞外囊泡在非酒精脂肪肝发病机制及诊断治疗中的作用方面的研究非常有限,但初步研究显示, EVs在NAFLD病程发展中发挥重要作用。因此,该文重点关注EVs参与NAFLD病程机制研究,并对其在NAFLD防治中的潜在诊疗价值作简要综述。
- 杨光窦琳沈涛唐蔚青满永黎健黄秀清
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病细胞间通讯
- NADPH氧化酶3在胰岛素抵抗中的作用机制
- 2009年
- 李兰芳黄秀清原慧萍满永王抒黎健
- 关键词：胰岛素抵抗活性氧
- 甘油标准物质的研制被引量：2
- 2007年
- 目的研制浓度适宜、便于保存和使用的甘油水溶液标准物质。方法参照一级标准物质技术规范(JJG 1006-1994)及有关技术文件,制备适当浓度的甘油水溶液,HPLC 法进行均匀性和稳定性检验,滴定法测定该溶液的甘油含量。结果 (1)甘油溶液均匀性检验:3次测量结果的±s分别为1.297 5±0.014 3、1.302 0±0.008 9、1.313 7±0.007 8,经方差分析,差异无统计学意义(F=1.462,P=0.166),说明甘油溶液分装均匀。(2)4℃保存至少稳定4年,定值为0.103 6g/g,不确定度为0.000 4 g/g。结论研制的甘油标准物质符合国家一级标准技术要求。已于2006年5月被国家质量监督检验检疫总局批准为国家一级标准物质(GBW 09149)。
- 国汉邦李红霞满永董军王抒陈文祥
- 关键词：甘油标准物质
- 一种高密度脂蛋白胆固醇分数酯化速率的测定方法
- 本发明公开了一种高密度脂蛋白胆固醇分数酯化速率的测定方法，包括a)在新鲜全血样本中加入卵磷脂胆固醇酰基转移酶活性抑制剂；b)加入沉淀剂得到只含有高密度脂蛋白的样品；c)将样品分成两份，一份加入卵磷脂胆固醇酰基转移酶活性恢...
- 陈文祥董军彭涛王抒国汉邦李红霞满永
- 文献传递
- G蛋白偶联受体120激动剂促进巨噬细胞胆固醇流出的研究
- 2019年
- 目的:探讨G蛋白偶联受体120(GPR120)在巨噬细胞胆固醇流出中的作用及机制。方法:培养Raw264.7巨噬细胞,以50-200μmol/L的GPR120激动剂GW9508处理Raw264.7细胞18h。NBD-胆固醇负载法检测细胞胆固醇的流出率;MTS方法检测细胞的存活率;定量PCR和Western blot方法检测胆固醇流出相关转运体ABCA1、ABCG1和SR-B1的mRNA及蛋白表达水平;定量PCR检测核受体LXRα、LXRβ和PPARα、PPARγ的mRNA水平。结果:与对照组相比,100、150和200μmol/L的GW9508均提高Raw264.7细胞NBD-胆固醇流出率,分别提高了8%、10%和18%;ABCA1的蛋白水平分别上调了1.4倍、1.8倍和4.8倍, ABCG1的蛋白水平分别上调了1.3倍、3.2倍和5.1倍,但是不影响SR-B1的蛋白水平;而且,100和200μmol/L的GW9508分别上调ABCA1的mRNA水平3.6倍和6.8倍,上调ABCG1的mRNA水平1.6倍和3.3倍;同时,LXRα的mRNA水平也分别上调了0.6倍和1.25倍,且差异有统计学意义;但是不影响SR-B1及LXRβ、PPARα和PPARγ的mRNA水平。另外,50-200μmol/L的GW9508均不影响Raw264.7细胞的存活率。结论:GPR120通过LXRα上调ABCA1和ABCG1的表达而促进Raw264.7巨噬细胞的胆固醇流出。
- 安童张小奕李红霞满永满永黄秀清窦琳
- 关键词：巨噬细胞胆固醇流出肝X受体Α
- 组蛋白去乙酰化酶Sirtl能够缓解阿霉素所致的心脏毒性作用
- 2013年
- 目的本研究观察Sirtl对阿霉素所致心肌损伤的影响及其作用的分子机制，从而为阿霉素心肌损伤的治疗寻找新的防治靶点。方法本研究利用大鼠心肌细胞系H9C2以及大鼠原代心肌细胞和阿霉素作用慢性心力衰竭小鼠模型，以腺病毒基因过表达、RNA干扰、免疫组织化学染色、Westernblot及Real-timePCR等方法，研究Sirtl在阿霉素导致的心脏毒性中所起到的作用，探讨其作用机制。结果（1）阿霉素腹腔注射建立C56BL／6小鼠慢性心力衰竭模型，心脏超声显示，
- 曹原沈涛王抒满永黎健
- 关键词：阿霉素心脏毒性
- 单纯性肥胖青少年血清脂蛋白亚组分胆固醇含量分析
- 肥胖已成为影响城市学生的健康的重要问题。肥胖与动脉粥样硬化(As)性疾病在发病机制上关系密切,其中血脂代谢异常在肥胖相关疾病的发生过程中起重要作用。本研究旨在通过对单纯性肥胖青少年的血脂、脂蛋白及其亚组分分布特点进行分析...
- 国汉邦黄秀清董军李红霞满永王抒黎健
- 文献传递
- HDL抑制人脐静脉内皮细胞NADPH氧化酶4表达和活性氧生成被引量：1
- 2008年
- 目的分析HDL对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)内NAD-PH氧化酶4(NADPH oxidase4,NOX4)及其亚组分p22phox、p67phox、Rac1与活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成的影响,研究HDL对LDL的拮抗作用。方法用Ⅱ型胶原酶消化法分离培养HUVEC;用RT-PCR、Western印迹观察NOX4、p22phox、p67phox、Rac1表达的变化;用流式细胞仪检测细胞内ROS的变化。结果HDL处理HUVEC能下调NOX4和p67phox mRNA和蛋白水平,但不影响p22phox和Rac1的表达。高浓度LDL刺激HUVEC时,NOX4表达上调,细胞内ROS生成增加,但p22phox、p67phox和Rac1的表达没有明显变化。用HDL预处理再加高浓度LDL刺激时,NOX4表达下调,ROS生成量减少;结论HDL可通过下调HUVEC NOX4表达降低ROS水平。
- 王蕾国汉邦张小勇屈顺林丁莉满永王抒黎健
- 关键词：活性氧人脐静脉内皮细胞高密度脂蛋白
- 糖尿病患者同型半胱氨酸及其代谢相关酶基因多态性与颈动脉内膜—中膜厚度的关系被引量：13
- 2005年
- 目的 探讨2型糖尿病患者同型半胱氨酸水平及其代谢过程的相关酶甲基四氢叶酸还原酶基因C6 77T和胱硫醚缩合酶基因T833C位碱基突变与颈动脉内膜—中膜厚度的关系。方法 用酶联免疫吸附法测定同型半胱氨酸水平,采用聚合酶链反应—限制片长多态性方法检测甲基四氢叶酸还原酶基因C6 77T基因型多态性,用扩增阻滞突变体系法检测胱硫醚缩合酶基因T833C多态性,用彩色多普勒检查颈动脉内膜—中膜厚度。结果 糖尿病颈动脉内膜—中膜厚度增厚组甲基四氢叶酸还原酶基因和胱硫醚缩合酶基因构成与糖尿病颈动脉内膜—中膜厚度正常组及对照组存在统计学差异(P <0 .0 5 )。三组甲基四氢叶酸还原酶基因和胱硫醚缩合酶基因突变者血浆同型半胱氨酸均高于无基因突变者。糖尿病组甲基四氢叶酸还原酶基因和胱硫醚缩合酶基因突变者颈动脉内膜—中膜厚度明显高于无基因突变者。结论 同型半胱氨酸代谢过程中关键酶基因变异可造成相关酶活性改变,进而出现高同型半胱氨酸血症促进糖尿病动脉粥样硬化的形成。甲基四氢叶酸还原酶基因C6 77T点突变和胱硫醚缩合酶基因T833C点突变可能是糖尿病合并血管病变发病的重要遗传因素。
- 潘琦郭立新初明峰满永孙明晓李铭刘小萍
- 关键词：内科学同型半胱氨酸基因突变内膜-中膜厚度
- 人11β-羟基类固醇脱氢酶基因克隆与表达的实验研究被引量：1
- 2018年
- 目的:构建人Ⅰ型11β羟基类固醇脘氢酶(11β-HSD1)原核表达载体并表达目的蛋白,为代谢综合征的研究奠定基础。方法:从Hep G2细胞系中提取细胞总RNA,经反转录合成c DNA第一链后再以其为模版,扩增11β-HSD1基因。p ET32a原核表达载体和PCR扩增出的产物经过Bam HI和Xho I双酶切后,在16℃过夜的条件下用T4 DNA连接酶连接上述酶切产物,然后用该产物转化Top10大肠杆菌感受态细胞,挑克隆后进行测序。将克隆成功的11β-HSD1重组质粒转化大肠杆菌菌株BL21(DE3),分别用不同浓度、不同时间的IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖)诱导其表达,并优化诱导条件。表达的蛋白采用聚丙烯酰胺凝胶电泳结合考马斯亮蓝染色的方法观察目的基因的表达情况。结果:挑选的克隆经测序证实p ET32a-11β-HSD1重组质粒构建成功,11β-HSD1基因与携带有6×His-tag标签和肠激酶识别位点的硫氧还蛋白trx A基因融合,在IPTG浓度为10μM,诱导时间为5小时时,上清中有明显的分子量约为52 k Da的重组蛋白产生,且目的蛋白分子量的大小与预期一致。结论:本实验成功构建了人p ET32a-11β-HSD1蛋白原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)后成功诱导了其融合表达。目的蛋白主要以可溶性蛋白的形式存在于上清中,为进一步研究其结构、功能、制备抗体等奠定了基础。
- 胡蒙亮徐杰任航江韩亭亭满永唐蔚青黎健李国平
- 关键词：原核表达硫氧还蛋白
