王婷
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：青岛大学医学院附属医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 茄病镰刀菌ALP小干扰RNA载体的构建与表达
- 2013年
- [目的]进一步研究碱性丝氨酸蛋白酶(ALP)在真菌性角膜炎发病机制中的作用,寻找有效的治疗措施。[方法]根据载体质粒pBC-hygro要求设计两对小干扰RNA,退火后连接于载体相应位点,经双酶切及测序鉴定后,分别转染标准茄病镰刀菌株,得到菌株ΔALP1和ΔALP2。采用蛋白琼脂廓清特殊培养基检测酶活性变化,Western-blot检测ALP的表达,并与标准茄病镰孢菌比较。[结果]检测ΔALP1菌株、ΔALP2菌株和对照菌株各6份,其CH值标准株为0.80±0.01,ΔALP1为0.80±0.03,ΔALP2为0.86±0.03,ΔALP1与标准株的差异无统计学意义(P>0.05),ΔALP2大于标准菌和ΔALP1株(P<0.01)。ALP蛋白条带的积分值(INT×mm2),标准株为1 240.29±289.77,ΔALP1为603.58±120.55,ΔALP2为401.84±117.94,ΔALP1与ΔALP2均低于标准株(P<0.01),ΔALP1高于ΔALP2(P<0.05)。[结论]成功地构建了ALP小干扰RNA载体及稳定转染菌株。
- 刘珂凤梁涛赵桂秋王婷喻文倩何宏
- 关键词：茄病镰刀菌真菌性角膜炎丝氨酸蛋白酶RNA干扰
- 泪液中（1，3）-β-D-葡聚糖水平检测对真菌性角膜炎的诊断和监测价值被引量：4
- 2013年
- 背景真菌性角膜炎的早期诊断对有效治疗极为重要，但目前尚缺乏能够准确、定量诊断和判断疗效的客观指标。研究证实血浆中（1，3）一6一D一葡聚糖对全身真菌感染性疾病诊断有较高的敏感性和特异性，但泪液中（1，3）-β-D一葡聚糖含量的检测能否用于角膜真菌感染患者的早期诊断和病情监测尚不清楚。目的观察真菌性角膜炎患者接受抗真菌药物治疗过程中泪液中（1，3）-β—D一葡聚糖质量浓度的变化，客观评价其在真菌性角膜炎诊断和病情监测中的临床价值。方法选取2010年7月至2012年5月在青岛大学医学院附属医院眼科诊治的角膜溃疡直径≤5mm的真菌性角膜炎患者60例60眼为患病组，同期健康无眼疾的成年志愿者30人30眼为正常对照组。患病组接受抗真菌药物治疗，平均治疗时间为29d。分别在治疗前及治疗后7、14、28d和停药后7d、14d收集患眼泪液50斗l，进行（1，3）一p—D一葡聚糖质量浓度检测，同时结合激光扫描共焦显微镜检查及患者临床表现，对（1，3）一p—D一葡聚糖的诊断价值进行评估。对泪液中（1，3）一p．D一葡聚糖质量浓度低于20ng／L、激光扫描共焦显微镜检查未发现菌丝的患者，巩固治疗1周后停药，随访2个月。结果治疗前，患病组患者泪液中（1，3）-β—D-葡聚糖质量浓度为（Log）（6．37-＋0．48）ng／L，明显高于正常对照组（Log）的（2．00~0．31）ng／L，差异有统计学意义（t=2．89，P〈0．01）。真菌性角膜炎患者病情在治疗7d后开始好转，表现为溃疡边界逐渐清晰，病灶面积缩小，激光扫描共焦显微镜下显示菌丝密度比治疗前降低等。患病组患者泪液中（1，3）-β-D-葡聚糖质量浓度随着治疗时间的延长逐渐下降，其变化呈时间依赖性。治疗后7、14、28d患者泪液中（1，3）-β-D-葡聚糖质量浓度（Log）分别为（5．19±0
- 刘珂凤梁涛何宏王婷喻文倩王沛涛李强
- 关键词：葡聚糖显微镜检查眼感染真菌性角膜炎
- 拉坦噻吗滴眼液对玻璃体切割术后难治性青光眼的短期疗效被引量：2
- 2013年
- 目的:评价拉坦噻吗滴眼液对玻璃体切割术后难治性青光眼短期治疗的有效性和安全性。方法:选取38例42眼玻璃体切割术后的难治性青光眼患者,在2wk药物洗脱期后,随机分为两组,第一组给予6wk固定联合制剂,第二组给予6wk非固定联合制剂。测量洗脱期后(基线)及用药后6wk眼压、视野、平均视神经纤维层厚度,观察眼部症状及不良反应。结果:两组患者的基线眼压均值为37.90±3.74,37.57±3.23mmHg,治疗后6wk的眼压均值分别为30.10±4.90,30.62±4.62mmHg,两组较基线眼压均有明显降低(t=12.16,t=13.78,P<0.01),但两组患者眼压下降的差异无统计学意义(20.54%±7.88%,18.23%±7.03%,t=0.75,P>0.05)。随访观察中,房角开放者(20眼)的平均降压幅度为24.87%,房角部分开放者(15眼)为17.46%,房角关闭者(7眼)为9.65%。对视野及平均视神经纤维层厚度均无改善(P>0.05)。主要不良反应为眼部刺激及轻度充血。结论:拉坦前列腺素/噻吗洛尔的固定联合制剂能有效降低玻璃体切割术后难治性青光眼患者的眼压,对开角型、房角部分开放型的患者降眼压效果尤为明显。拉坦噻吗滴眼液用药安全,依从性好。
- 王婷梁涛喻文倩刘珂凤
- 关键词：玻璃体切割术难治性青光眼
- RNA干扰茄病镰刀菌ALP基因及其基因沉默菌株的制备
- 2013年
- 目的构建RNA干扰质粒载体抑制茄病镰刀菌碱性丝氨酸蛋白酶(ALP)基因,通过检测ALP的表达及酶活性变化筛选出基因沉默菌株。方法构建2个ALP的干扰载体,转化茄病镰刀菌孢子,获得ALP基因沉默菌株△ALP1、△ALP2,通过RT-PCR检测△ALP1、△ALP2的ALP基因mRNA变化,并通过蛋白琼脂廓清率培养基检测ALP酶活性变化,对所得菌株的毒力进行判断。结果 RNA干扰后所获基因沉默菌株中,ALP的mRNA表达量显著低于标准茄病镰刀菌株(F=184.67,P<0.01),其中ΔALP2抑制效果较好、酶活性显著低于标准菌株及△ALP1(q=5.276、5.463,P<0.01)。结论通过LiAc转化法对茄病镰刀菌ALP进行RNA干扰,可有效抑制茄病镰刀菌ALP的表达;ALP基因沉默茄病镰刀菌株的获取,为进行动物体内实验、深入研究ALP在茄病镰刀菌性角膜炎发病机制中的作用、探索新型治疗方法提供思路。
- 梁涛刘珂凤何宏赵桂秋王婷喻文倩
- 关键词：茄病镰刀菌真菌性角膜炎丝氨酸蛋白酶RNA干扰
- 真菌性角膜溃疡患者穿透角膜移植术前后泪液（1,3）-β-D-葡聚糖的变化被引量：3
- 2014年
- 背景 穿透角膜移植术（PKP）近年来已成为治疗真菌性角膜溃疡的有效方法,但是术后糖皮质激素的使用时机目前暂无定论.研究发现真菌性角膜溃疡患者泪液中（1,3）-β-D-葡聚糖的质量浓度明显高于正常. 目的 检测真菌性角膜溃疡患者行PKP术前及术后泪液中（1,3）-β-D-葡聚糖的质量浓度变化,探讨其对术后应用抗真菌药物的持续时间和糖皮质激素类药物应用的时机. 方法 采用病例观察研究设计,收集2011年8月至2012年12月在青岛大学附属医院就诊的真菌性角膜溃疡行PKP的患者20例20眼,以患者的自身对侧眼作为对照组,分别于术前ld及术后1、7、14、21、28 d收集患者泪液各50μl,用G实验法检测泪液中（1,3）-β-D-葡聚糖质量浓度. 结果 对照组,实验组术前ld,术后1、7、14、21和28 d泪液中（1,3）-β-D-葡聚糖的质量浓度分别为（14.67±3.84）、（1 861.66±196.17）、（927.71±155.82）、（392.30±71.22）、（179.60±40.47）、（40.20±12.46）、（15.12± 1.80） mg/L,组间总体比较差异有统计学意义（F=883.45,P=0.00）.随着术后时间的延长,术眼泪液中（1,3）-β-D-葡聚糖质量浓度逐渐下降,各时间点与前一时间点间比较差异均有统计学意义（t＇=13.84、t=16.67、t＇=11.02、t＇=13.97、t＇=-8.45,均P=0.00）,术后28 d泪液中（1,3）-β-D-葡聚糖质量浓度接近对照组,差异无统计学意义（P=0.64）.术后28 d内18例患眼感染无复发,2例患眼分别于术后第5天和第6天感染复发,泪液中（1,3）-β-D-葡聚糖质量浓度分别为2 350.24 mg/L和1 992.82 mg/L.结论 真菌性角膜溃疡患者PKP术后泪液中（1,3）-β-D-葡聚糖的质量浓度于术后28 d降至正常范围,提示真菌性角膜溃疡患者PKP术后抗真菌治疗至少需维持28 d,此时局部使用糖皮质激素抗排斥反应较为安全.
- 喻文倩梁涛刘珂凤王婷
- 关键词：角膜溃疡穿透角膜移植术
