王文洲
- 作品数：13 被引量：13H指数：2
- 供职机构：扬州大学动物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目江苏高校优势学科建设工程资助项目江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 兔IL-10基因的克隆及生物信息学分析被引量：2
- 2013年
- 本研究对兔IL-10基因序列进行克隆并进行生物信息学分析,旨在为该基因的深入研究提供依据。结果表明,兔与其他哺乳动物的IL-10基因在CDS和氨基酸序列上相似性都较高;与鸡和斑马鱼的CDS序列没有同源性,且氨基酸序列同源性很低。对兔IL-10蛋白的软件预测分析表明,该蛋白是一种不稳定的疏水性分泌蛋白,富含磷酸化位点,有8个优势B细胞抗原表位。本研究为该基因的深入研究以及探明IL-10的合成分泌机制和网络调控机理提供了理论依据。
- 万小颖沈杰施丽娟王文洲秦立志吴信生
- 关键词：IL-10基因
- 兔IL-10基因外显子4突变对蛋白结构和功能的影响被引量：1
- 2014年
- 本研究针对兔IL-10基因外显子4中的碱基突变,运用生物信息学比较分析野生型和突变型蛋白的理化性质和结构。结果表明,外显子4中碱基T的插入并未改变IL-10蛋白的理化性质、二硫键、跨膜结构、信号肽、糖基化位点以及二级结构,但是导致磷酸化位点减少、三级结构改变,从而影响IL-10蛋白的功能并可能对机体疾病的抗病性产生影响。
- 万小颖冒留留沈杰秦立志施丽娟王文洲潘雨来吴信生
- 关键词：IL-10基因碱基突变
- 新西兰白兔中Myh6基因的表达及与肌纤维性状的相关性被引量：3
- 2017年
- 【目的】分析Myh6基因在新西兰白兔Oryctolagus cuniculus肌肉中的表达规律及与肌纤维特性的相关性,探究Myh6基因在肌纤维发育过程中的作用。【方法】利用冰冻切片技术测量了2、4、6、8、10、12周龄新西兰白兔背腿肌中不同类型肌纤维的密度、面积、长径和短径等性状,采用qRT-PCR测量了Myh6基因在不同周龄新西兰白兔背腿肌中的表达量,分析了上述性状与Myh6基因表达的相关性。【结果】2~8周龄新西兰白兔各类型肌纤维的密度逐渐变小,面积、长径和短径则逐渐变大(白肌纤维短径除外,仅在2~6周龄有变大趋势)。Myh6基因在4周龄表达量最高。Myh6基因表达量与公兔背部红肌纤维的面积呈极显著负相关(P<0.01),与公兔腿部红肌纤维的密度呈极显著正相关(P<0.01)。【结论】Myh6基因表达与肌纤维类型和肌纤维的生长发育密切相关。
- 胡帅帅王文洲闫晓荣赵博昊朱杰郝晔陈阳吴信生
- 关键词：肌纤维冰冻切片
- Tpm3基因在新西兰白兔中的时空表达规律研究
- 施丽娟王文洲秦立志万小颖李挺吴信生
- 家兔IL-10基因启动子多态性与免疫指标相关性探讨
- 2014年
- 利用PCR-SSCP技术对4个家兔群体IL-10基因启动子序列进行遗传多样性研究,并探讨其与部分血清免疫指标的相关性。根据克隆的IL-10基因启动子序列设计2对特异性引物,采用PCR-SSCP技术对新西兰白兔(NZW)、福建黄兔(F-Y)、新西兰白兔(♂)×福建黄兔(♀)(简称新黄兔,N-F)、福建黄兔(♂)×新西兰白兔(♀)(简称黄新兔,F-N)这4个家兔群体IL-10基因的启动子序列进行多态性检测。结果表明:在IL-10基因启动子序列上检测到3对等位基因,5种基因型,存在3个SNP位点;4个家兔群体在IL-10基因启动子序列内存在遗传多样性,不同家兔群体在遗传基础上存在一定差异。4个家兔群体除了福建黄兔外,其他均处于哈代温伯平衡。经研究发现,福建黄兔作为父本的杂交后代更能够遗传优势性状。
- 秦立志万小颖施丽娟王文洲朱慈根潘雨来吴信生
- 关键词：IL-10基因启动子多态性家兔
- 兔IL-10基因在DF-1细胞中的瞬时表达
- 万小颖王文洲施丽娟秦立志吴信生
- 关键词：实时荧光定量PCRELISAWESTERNBLOT
- 表达谱芯片筛选獭兔毛色相关候选差异表达基因被引量：2
- 2015年
- 本研究旨在了解青紫蓝色獭兔和白色獭兔毛色形成的分子遗传学机理。试验分为3组,每组包含全同胞青紫蓝獭兔和白色獭兔各1只。利用安捷伦基因芯片技术分析不同分组之间差异基因表达情况,并通过实时荧光定量PCR方法对部分差异显著基因进行验证。差异表达分析结果显示,3组青紫蓝色獭兔对白色獭兔分别筛选出545、1 680和2 092个差异表达基因(Differentially expressed genes,DEGs),共有172个共同基因;GO(Gene Ontology)分类结果显示,这些基因主要参与细胞分化、增殖、凋亡、发育、离子转运、免疫应答等生物学过程。通过实时荧光定量PCR技术对Creb1、Wnt2、Gnaq和Gna14基因在组织样中的表达量进行检测,结果与表达谱芯片一致。通过表达谱芯片结果结合生物信息学分析和文献报道,筛选出了Creb1、TH、Wnt2、Gnaq、Dvl1、Mapk12等对毛色形成可能具有重要影响的候选基因。
- 施丽娟秦立志王文洲闫晓荣翁巧琴吴信生
- 关键词：獭兔毛色差异表达基因基因芯片
- 福建黄兔肌纤维性状及Myh6基因表达水平分析被引量：2
- 2017年
- 选取我国地方品种福建黄兔为研究对象,利用冰冻切片技术对不同发育阶段福建黄兔背肌和腿肌的肌纤维性状进行研究,通过荧光定量聚合酶链式反应技术分析在肌肉发育过程中起重要作用的Myh6基因在福建黄兔不同发育阶段表达水平的差异,并与肌纤维性状进行相关性分析。结果显示:2、4、6、8、10和12周龄福建黄兔的白肌纤维密度均显著大于红肌纤维和中间型肌纤维,白肌纤维的面积显著高于红肌纤维,长径和短径的大小排列为白肌纤维>中间型肌纤维>红肌纤维,但差异无统计学意义;在6周龄前,背肌和腿肌中各类肌纤维长径、短径和面积呈显著增大的趋势,而6周龄后增大趋势逐渐变缓;Myh6基因在公母兔背部和腿部的表达均呈先上升后下降的趋势,其中母兔在4周龄表达量最高,公兔在6周龄表达量最高;Myh6基因的表达量与肌纤维面积、长径和短径的变化一致。表明Myh6基因与肌纤维类型和肌纤维的生长发育密切相关。
- 穆琳王文洲赵博昊胡帅帅赵斌陈阳吴信生
- 关键词：福建黄兔肌纤维
- 利用solexa转录组测序技术筛选控制家兔毛色形成的基因
- 秦立志万小颖施丽娟王文洲
- 兔白细胞介素-10基因的克隆、原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：5
- 2013年
- 白细胞介素-10(IL-10)是一种多功能的细胞因子,参与免疫调节和抗炎反应。本研究旨在克隆并表达IL-10基因,以制备兔IL-10多克隆抗体。运用RT-PCR技术从新西兰白兔脾脏总RNA中扩增IL-10基因,将该基因亚克隆入原核表达载体pET-32a并转入大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达获得融合蛋白,融合蛋白经纯化后免疫豚鼠制备多克隆抗体,最后分别用间接ELISA和Western blot检测抗体的效价和特异性。结果表明:克隆得到了兔IL-10基因,大小为537bp,经核苷酸测序与GenBank已登录的基因序列(NM_001082045)相似性为99%;重组载体pET-IL-10构建成功;SDS-PAGE电泳结果显示融合蛋白成功表达;制备的多克隆抗体效价高达1∶56 000,且具有很高的特异性。成功实现了兔IL-10基因的原核表达,并制备了豚鼠抗兔IL-10多克隆抗体,为深入研究兔IL-10基因的功能奠定了基础。
- 万小颖秦立志施丽娟王文洲李挺李碧春吴信生
- 关键词：克隆抗体制备
