王春丽
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 供职机构：广州市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RYBP基因稳定沉默的HL-60细胞系的构建被引量：2
- 2012年
- 目的利用慢病毒介导的RNA干扰（RNAi）技术，建立RYBP基因稳定沉默的HL．60细胞系。方法设计针对RYBP基因的5条短发夹状RNA（shRNA）序列，构建RYBPshRNA慢病毒重组载体，分别包装成慢病毒颗粒，直接感染HL-60细胞，同时设空载体和阴性对照shRNA慢病毒对照组。通过观察绿色荧光蛋白表达以监测感染效率，经嘌呤霉素（终质量浓度8μg／ml）筛选出稳定感染细胞。Westernblot实验初步鉴定出蛋白水平最低的RYBPshRNA组，用实时定量聚合酶链反应（PCR）进一步检测该组细胞mRNA表达水平。结果慢病毒感染的HL-60细胞经嘌呤霉素筛选成功，与对照组比较，5条RYBPshRNA组细胞RYBP表达均有不同程度减低（P〈0．01），其中以shRNA2沉默效果最佳，且shRNA2组的RYBP基因mRNA水平降低了95％以上（P〈0．05）。结论慢病毒介导的shRNA2能高效、稳定地沉默RYBP基因的表达，成功构建了RYBP基因稳定沉默的HL-60细胞系。
- 周家砚邓晖王春丽张玉平应逸许艳丽王顺清
- 关键词：短发夹状RNAHL-60细胞慢病毒属RNA干扰
- shRNA沉默RYBP基因对HL-60细胞增殖和凋亡的影响
- 目的：观察慢病毒载体介导短发夹状RNA(shRNA)靶向沉默RYBP基因对白血病细胞系HL-60细胞增殖与凋亡的影响，初步探讨RYBP基因在白血病发生中的作用。方法：RYBP基因特异性shRNA慢病毒载体包装成慢病毒感染...
- 王顺清王春丽
- 关键词：慢病毒载体白血病细胞增殖
- 文献传递
- shRNA沉默RYBP基因表达对HL-60细胞增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2012年
- Ring和YY1结合蛋白（RYBP）是生物进化过程中高度保守的转录抑制因子，目前认为是多梳（Polycombgroup，PcG）蛋白家族成员，与白血病、淋巴瘤、宫颈癌等肿瘤的发生、发展和预后密切相关。我们在前期实验中发现白血病患者骨髓单个核细胞（MNC）和白血病细胞系HL-60、SHI．1和K562细胞明显地高表达RYBP，且慢性髓性白血病（CML）患者治疗达到完全缓解时骨髓MNCRYBP表达量明显下降，复发时再升高。说明RYBP基因的表达异常与白血病的发生、预后等有关。我们试图通过慢病毒介导的RNA干扰技术沉默HL-60细胞RYBP表达，观察HL-60细胞增殖与凋亡，进一步探讨RYBP在白血病发生发展中的作用。
- 王春丽邓晖张玉平应逸许艳丽王顺清
- 关键词：HL-60细胞增殖RNA沉默基因表达细胞系HL-60慢性髓性白血病
- 组蛋白去甲基化酶赖氨酸特异性去甲基化酶1在急性白血病的表达及其临床意义被引量：3
- 2011年
- 本研究探讨组蛋白去甲基化酶赖氨酸特异性去甲基化酶1(lysine specific demethylase 1,LSD1)在急性白血病的表达及其临床意义。采用Western blot方法半定量检测LSD1在HL-60和SHI-1白血病细胞株、不同病情(初诊、完全缓解、复发)急性白血病(acute leukemia,AL)患者及非恶性血液病对照者骨髓单个核细胞的表达水平。随访收集AL患者的临床资料,分析LSD1表达与临床预后的关系。结果表明,HL-60细胞和SHI-1细胞LSD1均呈阳性高表达,LSD1相对含量(LSD1/β-actin灰度比)分别为4.647±3.840和1.628±0.185(n=4);72例AL患者LSD1表达程度差异较大,阳性率为56.9%(41/72),LSD1相对含量平均为1.053±1.976;17例非恶性血液病对照组LSD1阳性率为0%,LSD1相对含量为0.004±0.012。LSD1阳性率在急性髓系白血病(AML)或急性淋巴细胞白血病(ALL)患者初诊组(90.4%,77.8%)与难治/复发组(100%,100%)均高于完全缓解(CR)组(4.7%,0%)(p=0.000);LSD1相对含量在AML与ALL患者初诊组之间(1.177±1.646,1.275±1.845)、难治/复发组之间(2.050±2.470,4.107±3.676)或CR组之间(0.029±0.033,0.019±0.024)差异无统计学意义(p>0.05);AL患者LSD1阳性率在初诊组(84.6%)与难治/复发组(100%)均高于CR组(3.8%),LSD1相对含量在初诊组(1.274±1.760)、难治/复发组(3.359±3.319)及CR组(0.027±0.031)均高于对照组(p<0.01),其中难治/复发组高于初诊组与CR组(p<0.01),初诊组高于CR组(p<0.01)。结论:LSD1过高表达与AL难治/复发有关,其表达水平能反映AL患者的病情,可成为对AL预后有提示作用的生物学标志。
- 林秀梅钟雯婷王春丽王顺清
- 关键词：急性白血病组蛋白去甲基化酶
