王桂香
- 作品数：18 被引量：51H指数：5
- 供职机构：北京市农林科学院蔬菜研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市农林科学院科技创新能力建设专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 真空渗入转化法及脱落酸对西瓜遗传转化的影响
- 从国内外已有的报道来看,农杆菌介导法转化技术在西瓜上的规模化应用还具有较大的困难,普遍存在转化效率低、重复性差,转化体系尚待优化等问题.本文在芽分化培养基中添加低浓度的脱落酸,结果显示外植体伤口周围会形成更多的白色松散愈...
- 宗梅郭宁王桂香韩硕刘凡
- 关键词：西瓜
- 花椰菜--黑芥渐渗系和异附加系的获得与分析被引量：4
- 2014年
- 以花椰菜—黑芥体细胞杂种自交及回交后代为材料,结合形态学特征,分子标记和荧光原位杂交(FISH)等群体分析技术,在16份高代回交及自交材料中筛选获得了花椰菜类型渐渗系材料12份,偏花椰菜类型异附加系材料4份。形态学调查及FISH分析表明:12份渐渗系材料除茎、叶等营养器官特征与花椰菜近似外,已具有较正常的花球形成,染色体数为18条,均来源于花椰菜;植株花粉母细胞减数分裂行为基本正常。SSR和AFLP分子标记检测表明,渐渗系材料除扩增到数量不等的黑芥多态性位点外,还扩增到埃塞俄比亚芥特异的多态性位点和少量新位点,另外发现渐渗系材料有丢失亲本花椰菜多态性位点的现象。FISH分析4份异附加系材料的染色体组成,结果显示:PFCN29BC2S1-4为9条花椰菜染色体附加8条黑芥染色体;PFCN15-2S1BC5-6-2和PFCN29BC4-37-7为16条花椰菜染色体分别附加7条和14条黑芥染色体;PFCN29BC4-38-5为花椰菜染色体附加了5～7条黑芥染色体。
- 吕晶刘凡宗梅韩硕王幼平王桂香
- 关键词：花椰菜黑芥渐渗系AFLPFISH
- 花椰菜-黑芥体细胞杂种后代的筛选和鉴定
- 体细胞杂交技术可以有效地跨越种间有性杂交的不亲和性，引入异缘优异基因资源，丰富栽培种的遗传基础，特别是抗病基因的多态性。本研究建立了结合抗病性人工接种鉴定、流式细胞仪DNA含量分析、染色体原位杂交及分子标记技术进行大规模...
- 王桂香严红曾兴莹唐宇陆坤刘凡
- 关键词：种间杂交花椰菜黑芥
- 西瓜离体转基因技术的建立及优化
- 目前西瓜全基因组测序及骨干育种材料的重测序工作已经完成,大量功能基因有待验证,在此基础上,将全面带动西瓜分子育种工作的快速发展.这个形势下,对建立一个高效的西瓜转基因技术体系提出了迫切需求.
- 宗梅王桂香刘凡
- 花椰菜—黑芥体细胞杂交获得抗黑腐病异附加系新材料被引量：12
- 2011年
- 以花椰菜—黑芥体细胞杂种的自交及回交后代为材料,建立了结合抗病性人工接种鉴定,流式细胞仪DNA含量分析,B基因组特异分子标记和染色体原位杂交的大规模群体分析技术,在50份高代自交及回交材料中筛选获得了20份形态学特征偏向花椰菜,30份呈花椰菜—黑芥中间类型的材料。细胞DNA含量检测(FLC)及染色体计数结果表明,偏花椰菜的类型,DNA含量基本在2.24pg·cell-1以下,染色体数在28条以下。经连续3年黑腐病病菌人工接种鉴定,获得高抗株系12个,抗性株系17个,占全部受试材料的14%。对其中3个(PFCN29BC3-3-5、PFCN16-1S2BC3-107和PFCN14-1S1BC4-123)形态偏花椰菜且高抗黑腐病的植株进行基因组原位杂交,结果显示其分别为花椰菜染色体组附加了2、7和8条黑芥染色体的异附加系材料。这些植株可以用于后续的研究和作为育种桥梁材料,进一步获得黑腐病抗性的单体附加系或渐渗系。本研究表明通过体细胞杂交转育野生优异抗性资源,创新甘蓝类蔬菜育种种质的可行性。
- 王桂香严红曾兴莹盛小光唐宇韩硕宗梅陆坤刘凡
- 关键词：花椰菜黑芥体细胞杂交黑腐病异附加系
- pinⅡ基因在转基因大白菜DH纯系和试配F_1代的遗传及表达被引量：1
- 2011年
- 马铃薯蛋白酶抑制剂基因-Ⅱ(pinⅡ)是一类控制丝氨酸蛋白酶抑制剂PI-Ⅱ合成的抗虫基因。为了比较pinⅡ基因在转基因大白菜纯系和杂种中的表达特性,为抗虫新品种选育提供理论指导,本实验以转基因大白菜双单倍体纯系(DH系)的5个自交系和与常规育种亲本材料试配的3个F1杂交组合为试材,利用标记性状(除草剂抗性)对试材进行转基因验证,通过小菜蛾饲喂实验对纯系及F1代的离体叶片进行小菜蛾抗性鉴定,同时利用RTq-PCR及蛋白酶抑制活性测定对抗虫性良好的纯系及F1杂种的目的mRNA转录量及目的蛋白合成量进行了测定。结果显示,F1杂种09-2-464对小菜蛾的抑虫效果比纯系T280-2-6强;F1杂种09-2-467对小菜蛾的抑虫效果比纯系T280-3-6强。T180-3-6的自交T2代与杂交F1代对小菜蛾的抑虫作用表现在不同的虫体发育阶段:T280-3-6②主要表现在高致死率和低化蛹率,T280-3-6④和杂种F1代主要表现在降低小菜蛾羽化率上,呈现出抗虫能力上的杂种优势。莲座期T280-3-6②pinⅡmRNA转录量和PI-Ⅱ蛋白表达量分别是F1代09-2-467的5倍和4倍。在植物的不同生长阶段纯系PI-Ⅱ蛋白量均高于F1代。T280-3-6②和F1代09-2-467、09-2-464有希望用于抗虫大白菜育种。
- 殷跃陆坤王桂香刘凡
- 关键词：转基因白菜杂种一代
- 一种新的大分子纳米载体—细胞穿透肽的研究和应用进展被引量：1
- 2014年
- 自从20年余前第一次发现细胞穿透肽(cell-penetrating peptides,CPPs)以来,细胞穿透肽新家族成员的发掘和应用研究发展迅速。这些短肽可以通过共价或非共价连接形式穿过细胞膜,并且可以携带多种没有能力克服细胞膜通透性障碍的分子进入细胞。作为纳米级转运载体,大多数CPPs是无毒的,并已成为药物治疗、诊断以及蛋白质、核酸功能等方面研究的新型潜在工具。该文重点从CPPs的分类、结构与功能关系、跨膜机制、细胞器定位、细胞毒性、与外源物质连接方式以及应用等方面介绍了国际上有关CPPs的研究进展及其存在的挑战和未来前景。
- 秦莹王桂香刘凡
- 关键词：细胞穿透肽内化细胞毒性转基因药物治疗
- 羽衣甘蓝抗寒生理特性研究被引量：10
- 2016年
- 观赏羽衣甘蓝作为秋冬季节重要的园林绿化植物,抗寒性直接影响其推广和应用。为了阐明羽衣甘蓝响应低温的生理特性,揭示抗寒机理,以北京市农林科学院蔬菜研究中心生物技术课题组选配的优良F1杂种作为研究试材,分析不同低温处理下叶片电导率变化和半致死温度,以及渗透调节物质含量和抗氧化酶活性的变化。结果显示,羽衣甘蓝叶片电导率在-5℃以下迅速升高,-10℃左右达到最大值;半致死温度为-10.3^-13.7℃,红色类型低于白色类型,羽叶和圆叶低于皱叶类型。上述研究结果与观赏羽衣甘蓝田间抗寒表现一致。低温处理下渗透调节物质含量和抗氧化酶活性响应特性表明,不同指标呈现不同的变化趋势,除了可溶性糖在-10℃含量最高外,可溶性蛋白和游离脯氨酸含量,以及超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性均在-5℃或-8℃达到最大值,并随温度进一步降低而下降。主成分分析结果表明半致死温度、可溶性糖和游离脯氨酸含量是导致羽衣甘蓝抗寒性差异的主要因素。研究结果为建立羽衣甘蓝抗寒性评价体系,进一步解析抗冻机理,培育抗寒新品种奠定理论基础。
- 张亚玲幸宏伟郭宁韩硕宗梅刘凡王桂香
- 关键词：羽衣甘蓝抗寒性半致死温度渗透调节物质抗氧化酶
- 大白菜耐旱相关基因BpNFYA5的克隆及功能初步分析被引量：5
- 2012年
- 以拟南芥(Arabidopsis thaliana)NFYA5基因(GenBank登录号:At1g54160)的序列为基准,通过比对获得芸薹属大白菜[Brassi cacampestrisL.ssp.pekinensis(Lour.)Makino]同源EST序列;采用电子克隆的方法从大白菜中克隆到相关基因全长序列,命名为BpNFYA5。该基因包含3个内含子,其推导蛋白与拟南芥NFYA5CCAAT-box结合域相似性达92.6%。对大白菜进行干旱胁迫,发现BpNFYA5显著上调表达。构建了植物过表达载体pBIn-NFYA5和RNA干扰载体pFGC-NFYA5,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导浸花法转化拟南芥。经除草剂、潮霉素筛选及PCR鉴定获得转基因植株。采用干旱和10%PEG6000模拟亏水胁迫,对转基因材料的T2代进行了耐旱性鉴定。结果显示:过表达植株(OL)较野生型植株(WT)和干扰表达植株(Ri)叶绿素含量高;渗透胁迫下OL植株脯氨酸含量迅速积累,积累量显著高于WT和Ri植株;控水干旱2周OL株系较WT及Ri材料具有更好的干旱耐受性;OL株系离体叶片的失水速率较小,叶片有效水分利用率较WT和Ri高。结果表明所克隆的基因BpNFYA5在亏水胁迫调控中具有抗旱作用。
- 黄人卉王桂香刘凡
- 关键词：大白菜拟南芥基因抗旱性
- 芥菜Fosmid文库构建及B基因组细胞学标记的筛选利用被引量：1
- 2012年
- 构建了由60000个克隆组成的芥菜无偏倚Fosmid文库,该文库外源片段插入率为100%,外源DNA平均插入长度为32kb,文库覆盖率约为芥菜基因组的1.8倍。利用不同来源的分子标记筛选文库,得到的阳性单克隆经荧光原位杂交(FISH)鉴定后,获得两类B基因组细胞学标记,一类在所有染色体上都有信号,另一类仅在一对染色体上有信号。
- 彭元凤孟德璇黄玉碧王桂香刘凡
- 关键词：芥菜FOSMID文库分子标记FISH
