王璟
- 作品数：4 被引量：9H指数：1
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 供体来源ImDex联合抗原特异性Treg保护大鼠肝脏移植物的研究
- 2015年
- 目的:探讨供体来源低剂量未成熟树突状细胞外来体(immature dendritic cells exosome,im Dex)联合供体抗原特异型调节性T细胞(regulatory t cells,Tregs)对于肝脏移植物的保护作用。方法:以BN->Lewis大鼠为供受体,建立大鼠原位肝移植模型。利用超高速梯度离心法获得im Dex,采用流式细胞术鉴定该im Dex的表型。不同剂量im Dex用于本移植模型,生存分析探究其对肝脏移植物的保护作用及该作用与剂量的相关关系。利用磁珠分选技术获得Treg,混合淋巴细胞培养获得供体抗原特异性Treg,将不同性质的Treg用于移植受体,验证抗原特异性Treg保护肝脏移植物。进一步探究两者联合使用的效果,应用免疫荧光、流式细胞术研究Treg在移植受体中的分布。结果:超高速梯度离心法分选出的im Dex具有im DC表型,其保护肝脏移植物的最佳作用剂量为20μg,Treg发挥保护移植物作用具有抗原特异性。两者联合应用组生存时间长于对照组(P<0.05)。病理显示,输注的Treg分布于受体移植物。结论:Im Dex联合抗原特异性Treg可以有效保护大鼠肝脏移植物。
- 马奔李霄张卓超纪洪辰王璟汪建林杨西胜王德盛陶开山窦科峰
- 关键词：外来体肝脏移植
- MicroRNA-200a在肝癌组织中的表达及临床意义被引量：8
- 2014年
- 目的探讨microRNA-200a（miR-200a）在肝癌组织中的表达，分析其与临床病理参数及肝癌预后的关系。方法采用实时PCR检测肝癌细胞系和58例肝癌标本及其癌旁组织中miR-200a的表达水平，分析miR-200a表达与临床病理和肝癌患者预后的关系。结果miR-200a在四种肝癌细胞系中表达均低于正常肝脏细胞系，在肝癌组织中表达水平（0．593±0．107）比癌旁组织（1．652±0．135）显著降低（P〈0．05）；miR-200a的表达与肝癌的侵袭转移有关。有肝癌侵袭转移患者组明显低于无侵袭转移组（P=0．026）。而miR-200a的表达与性别、年龄、肝炎病史、肿瘤大小、TNM分期及AFP值无关（均P〉0．05）。低表达miR-200a的肝癌患者预后较差。结论miR-200a在肝癌组织中呈低表达，并与肝癌的侵袭转移和不良预后有关。
- 杨西胜汪建林李小磊阮柏马奔高远郭欣王璟段涛李海民
- 关键词：肝癌组织
- 转人AT-Ⅲ猪骨髓间充质干细胞抑制异种移植凝血紊乱的体外研究
- 2015年
- 目的观察转染人抗凝血酶-3（hAT-Ⅲ）的猪骨髓间充质干细胞（MSC）在体外异种移植凝血模型中的抗凝血作用。方法提取a-1，3-半乳糖转移酶基因敲除小型猪的MSC，利用流式细胞术鉴定其表型。构建含hAT-Ⅲ的慢病毒载体，转染MSC，使其表达hAT-Ⅲ，分别应用逆转录聚合酶链反应、蛋白质印迹法和免疫荧光技术检测hAT_Ⅲ的表达情况。在体外人血浆和猪内皮细胞共培养体系中，分别加入转染空质粒MSC（空转染组）、转染hAT-ⅢMSC（转染组）、重组hAT-ⅢMSC（重组hAT-Ⅲ组）和经鼠抗hAT_Ⅲ阻断性抗体处理的转染hAT-Ⅲ MSC（抗hAT-Ⅲ组），并提取上清液检测凝血酶一抗凝血酶复合物（TAT）的含量，并进行复钙实验，检测凝集时间。结果提取的细胞具有MSC表型，转染后成功表达hAT-Ⅲ基因，实验组相对表达量为2．80±0．51。空转染组、转染组、重组hAT-Ⅲ组和抗hAT-Ⅲ组TAT含量为（4．33±1．20）ng／ml、（15．00±2．89）ng／ml、（22．67±1．45）ng／ml、（3．02±1．16）ng／ml；在凝血模型中转染组TAT含量高于空转染组和抗hAT-Ⅲ组（P〈0．05）。空转染组、转染组、重组hAT-Ⅲ组和抗hAT-Ⅲ组的凝集时间为（150．0±4．58）S、（172．0±5．51）s、（181．3±4．06）s和（132．7±6．12）S；转染组凝集时间少于空转染组和抗hAT-Ⅲ组（P〈0．05）。结论基因修饰的MSC能够表达hAT-Ⅲ，并可以有效抑制体外异种移植凝血模型中人血浆中的凝血酶。
- 王璟李霄张卓超马奔纪洪辰王德盛汪建林陶开山窦科峰
- 关键词：间充质干细胞基因修饰凝血酶
- 低剂量LPS预处理的间充质干细胞对胰岛保护作用的研究被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨低剂量脂多糖(LPS)预处理的间充质干细胞(MSCs)对于胰岛移植物的保护作用及其机制。方法:给予MSCs不同浓度的LPS预处理,利用流式细胞仪检测不同处理组的间充质干细胞在低氧条件下的凋亡情况,筛选出最佳刺激浓度。通过ELISA检测低氧条件下LPS预处理组与未处理组的MSCs促生长因子的分泌情况。利用Western blot的方法检测不同处理组的MSCs在低氧条件下bax,bcl-2的表达。体外低氧条件下共培养不同处理的MSCs和胰岛细胞,检测胰岛细胞内部CD31阳性细胞的表达。以F344大鼠为供者,以Balb/c裸鼠为受者,制作胰岛联合MSCs移植模型,连续观察21天检测胰岛功能的恢复情况。结果:当以500ng/mL的LPS刺激MSCs能够减少MSCs在低氧条件下的凋亡水平(P<0.05),此时为最适浓度。LPS预处理的MSCs相较于未处理组能够在低氧条件下分泌更多的HGF,IGF-1,VEGF。LPS预处理的MSCs能够上调bcl-2下调bax的表达(P<0.05)。LPS预处理的MSCs能够明显保护低氧条件下胰岛细胞内部的CD31阳性的内皮细胞的数量。胰岛细胞联合LPS预处理的MSCs能够明显提高胰岛功能的改善。结论:胰岛细胞联合LPS预处理的MSCs能够明显提高移植效率。
- 张卓超李霄马奔纪洪辰王璟阮柏于泳王德盛陶开山窦科峰
- 关键词：脂多糖间充质干细胞预处理胰岛移植
