王盼盼
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：湖南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- CFL相互作用蛋白的鉴定及其在斑马鱼心脏发育中的初步功能研究
- 心脏是人体的重要器官，心脏发育相关基因正常发挥其功能是心脏发育的关键。探究心脏发育相关基因的功能，能够为了解先天性心脏病的发病机制和干预性治疗提供基础。 斑马鱼CFL基因是从斑马鱼胚胎的cDNA文库中克隆出来的一个心脏...
- 王盼盼
- 关键词：心脏发育多克隆抗体
- 小鼠nulp1基因多克隆抗血清的制备及检测
- 2014年
- 为了在小鼠模型中更深入地研究nulp1蛋白在心脏发育中的功能,采用PCR技术扩增出小鼠nulp1基因的部分编码区并连接入pET-28a表达载体中,之后将重组质粒转入大肠杆菌(E.coli)通过IPTG诱导表达Hisnulp1融合蛋白,对该融合蛋白采用Ni-IDA凝胶柱层析纯化后,免疫新西兰兔制备了多克隆抗体,并用western blotting对抗体进行分析.结果表明,获得了高效价的特异性兔抗nulp1多克隆抗体.这为nulp1功能的进一步研究奠定了基础.
- 易珍袁佳佳冯德峰王盼盼邓云吴秀山
- 关键词：小鼠原核表达多克隆抗体
- 斑马鱼CFL基因的克隆、多克隆抗体的制备及分析
- 2013年
- 在心脏发育过程中,相关基因的正常表达是有功能心脏形成的关键.斑马鱼CFL基因是从斑马鱼胚胎的cDNA文库中克隆出来的一个心脏发育候选基因.生物信息学分析表明:CFL基因编码278个氨基酸,含有一个CXXC结构域.为进一步研究该基因的功能,采用生物信息学结合RT-PCR的方法获得了该基因.将所得片段插入原核表达载体pET-28a载体中,经测序鉴定正确后转化入Rosetta菌株中,用IPTG诱导表达出pET-28a-CFL融合蛋白,表达的融合蛋白占菌体总蛋白的71%,融合蛋白相对分子质量约为30 kD.经包涵体纯化后,免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗体.经验证,具有较好的特异性和较高的效价,可以用作western-blot免疫印迹等实验分析.
- 王盼盼彭夕洋易珍江志刚邓云吴秀山万永奇
- 关键词：融合蛋白多克隆抗体
- 斑马鱼CXXC5基因通过TNF-α凋亡信号通路调控心脏发育
- 心脏的发育过程伴随着一系列精确的细胞增殖、分化及凋亡过程,其相关基因的调控异常将导致胚胎心脏发育成畸形心脏.CXXC 锌指蛋白5(CXXC5)是CXXC 家族成员,具有物种进化保守的DNA 结合锌指结构域.前人的研究表明...
- 彭夕洋王盼盼王西君易珍邓云吴秀山
- 关键词：斑马鱼SMADSTNF-Α
- 果蝇EF-1α蛋白的原核表达及多克隆抗体制备被引量：1
- 2013年
- 为进一步研究延长因子-1(elongation factor-1α,EF-1α)在调控心脏发育和果蝇心脏功能中发挥的作用,制备延长因子-1的抗体.利用生物信息学选择果蝇EF-1α基因抗原亲水区,并设计出特异性引物,PCR扩增出的片段克隆到原核表达pET-28a载体中,转入E.coli中后通过IPTG诱导融合蛋白表达,将His-EF-1α融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,再用Western Blot检测抗体的效价和特异性.研究结果表明,获得了EF-1α原核表达重组融合蛋白以及高效价的、特异性兔抗EF-1α多克隆抗体.EF-1α多克隆抗体的效价可以达到1比1500,并且有很强的特异性,为后续研究EF-1α基因在心脏发育和心脏功能中的作用奠定了基础.
- 戴悦任恋彭佩莹王盼盼袁婺洲吴秀山
- 关键词：果蝇原核表达多克隆抗体
