田宇
- 作品数：6 被引量：24H指数：3
- 供职机构：中南林业科技大学更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：化学工程生物学轻工技术与工程更多>>
- 产异丁醇大肠杆菌工程菌的构建
- 随着化石燃料资源的枯竭与环境问题的日益严峻,生物燃料有望成为未来代替化石燃料的新能源。与传统生物燃料（燃料乙醇）相比,异丁醇具有不易吸水、挥发性低、辛烷值高和能量密度大等特点,使其成为潜在的新一代可再生能源。目前,利用微...
- 田宇
- 关键词：异丁醇大肠杆菌乙醇脱氢酶基因
- 文献传递
- 基于杨木发酵产异丁醇大肠杆菌工程菌构建被引量：3
- 2015年
- 【目的】克隆异丁醇生物合成途径中的2个关键酶基因——乙醇脱氢酶基因(adh2)和2-酮酸脱羧酶基因(kivd),构建产异丁醇的工程大肠杆菌;进一步以杨木水解液为底物进行发酵,以期能利用木质纤维原料发酵生产异丁醇,为异丁醇的可再生生产提供研究基础。【方法】分别以酿酒酵母总DNA和乳酸乳球菌总DNA为模板,通过PCR扩增异丁醇生物合成途径关键酶基因adh2和kivd。同时构建重组质粒pSTV-29-adh2和pSTV-29-kivd,分别转化大肠杆菌DH5α,构建重组菌株E.coli DH5α-pSTV-29-adh2和E.coli DH5α-pSTV-29-kivd。进一步构建串联表达质粒pSTV-29-adh2-kivd,导入大肠杆菌DH5α中,构建重组工程菌E.coli DH5α-pSTV-29-adh2-kivd。各重组菌株经IPTG诱导表达后,采用BCA蛋白定量试剂盒测定其粗酶提取液中目的蛋白含量,并通过SDS-PAGE电泳检测重组菌株E.coli DH5α-pSTV-29-adh2,E.coli DH5α-pSTV-29-kivd和E.coli DH5α-pSTV-29-adh2-kivd中目的基因adh2和kivd的蛋白表达量。利用各重组菌E.coli DH5α分别以葡萄糖和杨木水解液为原料发酵生产异丁醇,采用气相色谱检测发酵液中异丁醇含量。【结果】重组质粒pSTV-29-adh2,pSTV-29-kivd和pSTV-29-adh2-kivd经菌液PCR、酶切及测序验证,得到的片段大小与目的基因adh2(1 067 bp)和kivd(1 667 bp)大小和质粒载体pSTV-29(2 999 bp)大小相符,adh2和kivd基因测序结果与NCBI中对应基因序列完全一致,表明表达载体pSTV-29-adh2,pSTV-29-kivd和pSTV-29-adh2-kivd构建成功。蛋白含量测定结果和SDS-PAGE电泳检测结果显示,目的基因adh2,kivd的蛋白在各重组菌中均得到表达,在电泳图谱中的对应位置40 k D(Adh2蛋白分子质量40 k D)和70 k D(Kivd蛋白分子质量70 k D)处均有明显的蛋白特征条带,且adh2基因编码的乙醇脱氢酶蛋白比kivd基因编码的2-酮酸脱羧酶蛋白表达量高,而空白对照菌株未出现任何蛋白特征条带,表明各重组菌E.coli DH5α-pSTV-29-adh2,E.coli
- 王启业王义强田宇彭牡丹陈章靖陆利
- 关键词：异丁醇重组大肠杆菌乙醇脱氢酶基因
- 一株用于燃料丁醇发酵的拜氏梭菌 U-57及其应用方法
- 本发明涉及一株用于燃料丁醇发酵的拜氏梭菌U-57及其应用方法，保藏号为CCTCC NO：M2013208，该菌株由拜氏梭菌Clostridium beijerinckii ATCC55025经多次紫外诱变、反复筛选获得。...
- 王义强华连滩彭牡丹王启业田宇舒桂珍罗浪
- 文献传递
- 生物发酵产丁醇研究进展被引量：11
- 2014年
- 丁醇作为新一代生物燃料,已成为世界研究的热点。利用可再生原料通过微生物发酵生产丁醇受到人们的普遍关注。目前通过发酵法产丁醇的成本较石化途径高。降低丁醇的生产成本,可以从以下几个方面入手:使用廉价的非粮食原料,开发新的高产低能耗发酵工艺,选育高产丁醇菌株。相信在不久的将来,研究者们将研发出高经济竞争力和可持续发展的丁醇生产工艺。
- 华连滩王义强彭牡丹田宇马国辉
- 关键词：丁醇木质纤维发酵
- 一株用于燃料丁醇发酵的拜氏梭菌 U-57及其应用方法
- 本发明涉及一株用于燃料丁醇发酵的拜氏梭菌U-57及其应用方法，保藏号为CCTCC NO：M2013208，该菌株由拜氏梭菌Clostridium beijerinckii ATCC55025经多次紫外诱变、反复筛选获得。...
- 王义强华连滩彭牡丹王启业田宇舒桂珍罗浪
- 文献传递
- 异丁醇生物合成的研究进展被引量：11
- 2013年
- 异丁醇一直以来作为重要的化工原料被用于诸多领域。近年来发现异丁醇也可以作为新一代的生物燃料,并且具有高热值、易混合、高辛烷值等特有的优势,体现出了巨大的发展潜力,越来越受到人们的关注。就异丁醇作为新型生物燃料的生产现状和生物合成异丁醇在国内外的研究进展进行介绍与论述,并对生物合成异丁醇的未来发展的趋势进行展望。
- 田宇王义强王启业
- 关键词：异丁醇生物燃料生物合成工程菌
