田福起
- 作品数：7 被引量：13H指数：2
- 供职机构：江苏大学附属医院更多>>
- 发文基金：镇江市科技支撑计划(社会发展)项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肾癌干细胞的培养鉴定及其凋亡的实验研究被引量：1
- 2010年
- 目的探讨肾癌干细胞在肾癌的发生发展中的作用。方法收集肾癌细胞检测其CD133表达情况,并研究其凋亡特性;然后将其悬浮于含有表皮生长因子(EGF)和成纤维生长因子(bFGF)的无血清培养基中培养7d,收集干细胞球,同时收集利用含10%胎牛血清培养基培养的肾癌细胞作阴性对照,分别检测其CD133表达情况,并研究其凋亡特性。结果悬浮培养2d后出现肾癌干细胞球,培养7d后干细胞球明显增多,收集干细胞球,用流式细胞仪检测发现表达CD133+细胞约占(8.25±1.43)%,阴性对照中CD133+细胞只占(1.22±0.34)%,并且较前者具有较高的凋亡率。结论利用无血清体外培养并收集悬浮生长的肾癌细胞的方法可以从肾癌细胞中获取肾癌干细胞;肾癌干细胞较一般瘤组织有较低的凋亡率,维持着肿瘤的无限增殖。
- 田福起孙浩潘鹏郭涛何鸿保姚宏伟
- 关键词：肿瘤干细胞肾癌细胞培养CD133凋亡
- 5-Aza-CdR对人肾癌OS-RC-2细胞生长及γ-连环蛋白表达的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:研究甲基化抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人肾癌OS-RC-2细胞增殖、凋亡及γ-连环蛋白(γ-catenin)表达的影响。方法:使用不同浓度(10-7,10-6,10-5,10-4mol/L)的特异性DNA甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR处理OS-RC-2肾癌细胞株。MTT检测5-Aza-CdR对肾癌细胞株OS-RC-2的生长抑制作用。流式细胞仪检测5-Aza-CdR对OS-RC-2肾癌细胞株凋亡的影响。细胞免疫化学检测5-Aza-CdR处理OS-RC-2肾癌细胞株后γ-catenin表达的变化。结果:5-Aza-CdR明显抑制肾癌细胞的增殖,促进其凋亡,且与药物浓度及作用时间有关。药物处理后γ-连环蛋白表达增加。结论:γ-catenin蛋白表达受甲基化的抑制,提示5-Aza-CdR可使γ-catenin基因去甲基化而抑制肾癌OS-RC-2细胞株增殖,并促进其凋亡。
- 陶美满孙浩田福起马克钧郭涛潘鹏徐强
- 关键词：肾癌Γ-连环蛋白
- 免疫磁珠分选肾癌干细胞及端粒酶活性在肾癌干细胞中的表达被引量：1
- 2010年
- 目的探讨肾癌干细胞端粒酶活性的改变。方法利用无血清悬浮培养的方法培养富集肾癌干细胞,流式细胞分析技术检测其CD133的表达,用免疫磁珠分选系统分离CD133+及CD133-细胞,以正常肾组织细胞作为阴性对照,采用TRAP实时定量的方法分别检测肾癌CD133+及CD133-细胞端粒酶活性。结果 CD133+细胞和CD133-端粒酶活性分别为(20.54±2.45)和(20.69±2.53)Ct值,而正常肾组织没有检测出端粒酶活性(P<0.05)。结论肾癌干细胞端粒酶活性明显增高。
- 孙浩田福起郭涛潘鹏姚宏伟何鸿保
- 关键词：肿瘤干细胞肾癌端粒酶CD133
- 无血清培养肾癌干细胞及其鉴定被引量：1
- 2009年
- 背景:肿瘤干细胞理论的产生,对肿瘤的发生、发展及其发病机制有了更新的认识,为肿瘤研究提供了新的方向,通过无血清培养技术已从许多肿瘤中分离并鉴定出特定的肿瘤干细胞。目前,无血清培养已成为培养肿瘤干细胞的经典培养方法。目的:运用无血清培养的方法从肾癌细胞中获取肾癌干细胞,并进行鉴定。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-02/2009-02在江苏大学完成。材料:肾癌细胞株OS-RC-2由上海中科院细胞库提供。方法:取处于对数生长期的肾癌细胞OS-RC-2,悬浮于预先配好的DMEM/F12无血清培养基中(含表皮生长因子20μg/L,碱性成纤维细胞生长因子20μg/L),观察生长情况,培养7d后运用流式细胞仪测定CD133及CD34的表达。以不含细胞因子的高糖DMEM/F12培养液培养细胞作为阴性对照。另外收集无血清培养7d的肾癌细胞球,重悬于含体积分数为10%胎牛血清的高糖DMEM/F12培养基中,进行干细胞分化实验观察。主要观察指标:①倒置显微镜下观察肾癌干细胞生长情况。②流式细胞仪检测肾癌干细胞及肾癌细胞中CD133及CD34的表达。③收集无血清培养7d后的肾癌干细胞重新常规培养并观察其分化情况。结果:①肾癌细胞接种于含细胞因子的无血清培养基2d后可见有细胞球生成,7d后细胞球明显增多,体积增大。对照组肾癌细胞则贴壁生长,未见细胞球生成。②流式细胞仪检测显示,肾癌细胞球中CD133+CD34-表达率(8.33±1.26)%,对照组肾癌细胞表达率(1.24±0.36)%(t=-19.71,P<0.05)。③肾癌细胞球重新悬浮于含体积分数为10%胎牛血清的培养液2d后可见细胞球分散为单个细胞,恢复原来贴壁生长特点,CD133及CD34表达与阴性对照相同。结论:利用含细胞因子表皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子无血清培养的方法可以从肾癌细胞中获取肾癌干细胞。
- 潘鹏郭涛田福起孙浩马克钧徐强
- 关键词：肿瘤干细胞肾癌CD133CD34
- 无血清悬浮培养肾癌干细胞表面标志CD133及端粒酶活性的表达被引量：6
- 2009年
- 背景：有研究表明端粒酶活性抑制剂不仅能抑制或杀死肾癌细胞,而且对决定肾癌发生发展的干细胞也有作用。目的：观察无血清悬浮培养的肾癌干细胞表面标志CD133及端粒酶活性的表达情况,并与含血清培养的肾癌细胞作比较。设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2008-06/2009-02在江苏大学完成。材料：手术切除肾癌周围新鲜的正常肾组织标本由江苏大学附属医院提供,肾癌干细胞株OS-RC-2由上海中科院细胞库提供。方法：取处于对数生长期的肾癌干细胞OS-RC-2,胰酶消化后离心弃上清,悬浮于含EGF、bFGF的DMEM/F12无血清培养基中,调整细胞浓度为2×10^8L-1进行接种,在37℃、体积分数为5%的CO2培养箱中悬浮培养。以含血清培养的肾癌细胞及正常肾组织细胞作为对照。主要观察指标：倒置显微镜下观察细胞生长情况,流式细胞仪检测肾癌干细胞CD133及CD34的表达,采用TRAP实时定量检测肾癌干细胞端粒酶活性。结果：肾癌干细胞接种于无血清培养基后,细胞呈圆形悬浮于培养液中;2d后有细胞球生成,每个细胞球含3~8个细胞,折光性较强;7d后细胞球明显增多,体积增大,为规则的圆形或卵圆形。无血清悬浮培养的肾癌干细胞球CD133＋CD34-率明显高于含血清培养的肾癌细胞CD133＋CD34-率,正常肾组织细胞未测出有CD133及CD34的表达,3者间比较差异有显著性意义（F=328.25,P〈0.05）。肾癌干细胞球和肾癌细胞端粒酶活性均高于正常肾组织细胞（F=278.74,P〈0.05）,而前2者间端粒酶活性无明显差异。结论：与含血清培养的肾癌细胞相比,无血清悬浮培养的肾癌干细胞表面标志CD133呈明显高表达,二者端粒酶活性均高于正常肾组织。
- 潘鹏田福起郭涛孙浩马克钧周留正
- 关键词：肿瘤干细胞肾癌端粒酶活性CD133
- 肾癌干细胞的培养及鉴定
- 2009年
- 目的从肾癌细胞中获取肾癌干细胞。方法将肾癌细胞悬浮于含有表皮生长因子(EGF)和成纤维生长因子(bFGF)的无血清培养基中培养。用流式细胞仪检测其CD133及CD34。收集无血清培养7 d后的细胞重新常规培养并观察其分化情况。结果悬浮培养2 d后出现肾癌干细胞球,培养7 d后表达CD1+33CD34-的细胞占8.33%±1.26%,高于肾癌细胞中表达CD1+33CD3-4的细胞(P<0.05),后者只占1.24%±0.36%。结论用无血清培养基和悬浮培养的方法可以从肾癌细胞中获取肾癌干细胞。
- 田福起孙浩潘鹏郭涛
- 关键词：肾肿瘤肾癌肿瘤干细胞肾癌干细胞细胞培养
- 肾癌OS-RC-2细胞CD133的表达及意义被引量：1
- 2009年
- 目的:培养肾癌干细胞球,研究其表面分子特性。方法:肾癌细胞悬浮于含有表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的无血清培养基中培养,培养7天后收集细胞球,流式细胞仪检测CD133及CD34的表达。结果:悬浮培养2天后出现肾癌干细胞球,培养7天后干细胞球明显增多,流式细胞仪检测发现表达CD133+CD34-细胞约占(8.33±1.26)%,对照肾癌细胞组表达CD133+CD34-细胞只占(1.24±0.36)%;干细胞球通过含10%胎牛血清培养基继续培养,又恢复原来的生长特点。结论:利用无血清悬浮培养方法得到的肾癌干细胞球高表达干细胞表面分子标记CD133。
- 田福起孙浩潘鹏郭涛
- 关键词：肿瘤干细胞肾癌细胞培养CD133CD34
