申彦晶
- 作品数:12 被引量:64H指数:6
- 供职机构:华南理工大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 何首乌cDNA文库的构建及分析被引量:2
- 2008年
- 目的为进行药用植物次生代谢产物的生物合成基因调控研究,构建了三年生何首乌叶cDNA文库。方法以何首乌成熟叶片为材料提取其总RNA;纯化出mRNA;反转录合成双链cDNA;钝化cDNA末端;连接上EcoR接头;经Xho酶切后,使用Sepharose CL-2B凝胶介质滤过,收集400bp以上的片段与Uni-ZAP XR载体连接,经包装蛋白包装成cDNA文库。Uni-ZAPXR载体可以在辅助噬菌体ExAssist helper phage的共感染下,快速释放出pBluescript SK-噬菌粒,经转染E.coliSOLR后,铺于氨苄青霉素抗性平板,分别利用PCR和双酶切的方法鉴定插入片段的大小。结果测定该初始文库的滴度为1.07×106pfu/mL,含有5.4×105个重组子,插入片断长度为0.5~2.0kb;扩增文库的重组子为4.25×1011个,重组率为98.5%。结论经检测所构建的文库库容量满足基因筛选要求,为进行中药材相关功能基因调控研究奠定基础。
- 谭雪梅申彦晶严萍郑传进赵树进
- 关键词:CDNA文库何首乌次生代谢产物
- 白木香核型与Giemsa C-带带型研究被引量:9
- 2007年
- 目的:研究白木香染色体的核型与C-带带型,为该种鉴定、起源、良种培育等的研究提供细胞学资料。方法:核型分析采用常规压片法,C-带带型用改良BSG法。结果:白木香体细胞染色体数目2n=16,核型公式为K(2n)=2x=16=6m+6sm+4st,染色体相对长度组成2n=16=4L+4M2+6M1+2S,属于"2B"型。白木香8对染色体共有34条C-带带纹,C-带带型公式为2n=2x=16=4C+2I+2T+2CI++2CI+T+2CI+T++2I+T+。结论:白木香染色体的不对称性较高,处于较进化地位,为进一步研究提供参考。
- 申彦晶赵树进
- 关键词:白木香核型分析C-带
- 何首乌总RNA提取方法的比较及改进被引量:4
- 2008年
- 目的:探讨不同提取方法对提取何首乌总RNA的质量影响,寻找适于何首乌成熟叶组织RNA的提取方法。方法:以何首乌成熟叶组织为材料,采用SDS/酸酚法、常规CTAB法及改良的TRIzol试剂法分别进行实验,并对所提取RNA的质量进行验证。结果:采用3种方法都能提取出RNA,但质量差异较大。其中改良的TRIzol试剂法能有效抑制次生物质的影响,提取的RNA产量可达70~110μg/g,纯度高于其他2种方法,D260nm/D280nm值为1.85~1.97。结论:改良的TRIzol试剂法操作简便,提取的RNA完整性和纯度较高,可以满足下一步实验的要求。
- 谭雪梅申彦晶严萍赵树进
- 关键词:何首乌RNA提取次生物质RT-PCR
- 不同居群白木香的染色体研究(英文)被引量:5
- 2009年
- 采用常规压片法和改良BSG法对3个居群白木香的染色体核型及Giemsa C-带带型进行研究。结果表明:3个居群白木香的核型均属2B类型,其中广西居群白木香的核型公式为2n=16=4m+8sm+4st;其他两个居群白木香的核型公式为2n=16=6m+6sm+4st,居群间核型变异不明显。白木香的C带带型为CIT型,具有着丝粒带、中间带、端带和全带。3个居群白木香C带的分布、数目和类型不完全一样,出现了带型的多态性。
- 申彦晶焦旭雯赵树进
- 关键词:白木香核型GIEMSAC带
- 提取何首乌不同组织总RNA的一种有效方法被引量:5
- 2008年
- 通过优化何首乌不同组织总RNA的提取条件,将去污剂CTAB结合酸性酚的作用,可以有效防止基因组DNA的污染;利用不同的盐浓度下,RNA与多糖在溶解度上存在差异的特点,从而溶解RNA沉淀中残留的多糖,使后者留在上清液中;碱性裂解液(pH值8.0)和高浓度巯基乙醇的作用,PVP能有效结合多酚物质。这种改进方法经济且易于控制,得到的总RNA质量较高,可直接用于随后的分子生物学操作。
- 谭雪梅申彦晶赵树进
- 关键词:何首乌RNA提取
- 正交实验设计优化白木香ISSR-PCR反应体系的研究被引量:8
- 2008年
- 利用正交实验设计的方法,对白木香ISSR-PCR(简单重复序列区间-多聚酶链式反应)反应体系中的5种主要因素(dNTP、Mg2+、模板DNA、引物和Taq酶)在4个水平上进行优化筛选,建立了白木香ISSR-PCR反应的最佳体系(25μl)为:dNTP 0.2 mmo1/L、Mg2+2.5 mmol/L、引物0.5μmol/L、模板DNA 100 ng和Taq酶1.0 U。通过梯度PCR反应得到相应引物的最佳退火温度为49.2℃。这一体系的建立为今后利用ISSR标记技术研究白木香的遗传多样性提供了标准化程序。
- 申彦晶赵翾赵树进
- 关键词:正交设计ISSR-PCR白木香
- 白木香(Aquilaria sinensis(Lour.)Spreng)的遗传变异及分子鉴别研究
- 白木香(Aquilaria sinensis(Lour.)Spreng.)是瑞香科沉香属常绿乔木,其含树脂的木材沉香是名贵药材和名贵天然香料,具有极高的经济价值。白木香是我国特有的珍贵药用植物,也是我国生产国产沉香的唯一...
- 申彦晶
- 关键词:白木香分子鉴别居群染色体带酶切位点遗传标记技术
- 白木香的遗传差异及ISSR分子鉴定被引量:15
- 2008年
- 目的采用简单重复序列区间(ISSR)扩增技术,对不同地区白木香的遗传变异、亲缘关系及分子鉴定进行研究。方法筛选随机引物进行ISSR扩增,通过UPGMA聚类,研究白木香各居群间的遗传关系,构建居群亲缘关系的分子系统树;利用特异性条带对白木香进行指纹分析鉴别。结果共筛选出7条有效引物,经ISSR扩增得到80条带,平均每条引物扩增出11.4条带,其中多态性条带47条,多态性程度达58.8%,居群间遗传距离为0.0733~0.4213。结论ISSR分子标记可作为白木香居群遗传多态性、居群亲缘关系和分子鉴别的有效手段;引物IS-8可以进行白木香种内和种间的鉴别。
- 申彦晶谭雪梅赵翾赵树进
- 关键词:白木香ISSR
- 何首乌三个栽培种核型比较被引量:3
- 2006年
- 目的:分析何首乌Polygonum multiflorum三地栽培种的染色体核型。方法:采用植物染色体常规压片法,结合显微摄影。结果:(1)广西靖西栽培种的核型公式为K(2n)=3X=33=9m+24 sm,核型类型为2A;(2)广东德庆种的核型公式为K(2n)=2X=22=12m+10 sm,核型类型为2B;(3)江西新建种的核型公式为K(2n)=2X=22=6m+14 sm+2st,核型类型为2A。结论:三地栽培的何首乌核型存在差异。
- 焦旭雯申彦晶严萍赵树进
- 关键词:何首乌染色体数目核型
- 酶工程在中药有效成分提取及转化中的应用被引量:11
- 2007年
- 利用酶工程技术,可以提高中药有效成分的提取率,促进微量活性成分的转化。本文综述了酶工程在中药生产中的应用进展。
- 申彦晶赵树进
- 关键词:酶工程中药