白浩
- 作品数:5 被引量:2H指数:1
- 供职机构:复旦大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 重组人组织因子途径抑制物及其突变体的基因克隆、表达与性质和药效学的初步研究
- 弥散性血管内凝血(DIC)是一种常见的临床综合征,起病急、病情危重、预后差,引起该病的基础疾病涉及临床各个学科.目前的治疗药物主要为肝素,剂量难以把握,存在诱发血小板减少、出血和骨质疏松等众多不良反应.由于绝大多数DIC...
- 白浩
- 关键词:TFPI突变体半衰期药代动力学药效学
- 长效重组组织因子途径抑制物及其制备方法
- 本发明属生物技术领域,具体涉及长效组织因子途径抑制物(LTFPI)及其制备方法和应用。本发明对组织因子途径抑制物(TFPI)及其受体低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)的生物信息学和结构分子生物学分析和实验,确定了TFPI...
- 马端宋后燕白浩张农
- 文献传递
- 重组TFPI缺失突变体TFPI_(1-161)在毕赤酵母中的高效表达及功能鉴定被引量:2
- 2004年
- 人组织因子途径抑制物 (TFPI)是一种体内天然存在的外源性凝血途径特异性抑制物。缺失突变体TFPI1 - 1 6 1 仅包括TFPI的N末端、K1和K2结构域 ,是一种研究TFPI结构与功能及其相互关系的理想对照分子。以克隆质粒pGEM 3Zf( ) TFPI为模板 ,用PCR方法获得TFPI1 - 1 6 1 基因 ,构建表达质粒pPIC9K TFPI1 - 1 6 1 并转化毕赤酵母GS115。通过筛选多拷贝转化子及优化发酵培养条件 ,首次在毕赤酵母中高效表达了TFPI1 - 1 6 1 ,经纯化后最终产量高于酿酒酵母 2 0倍以上。由于糖基化程度不同 ,TFPI1 - 1 6 1 表达为TFPI1 - 1 6 1 (2 4kD)和TFPI1 - 1 6 1 (2 7kD)两种分子形式 ,其等电点分别为 4 8和 4 9。根据等电点差异 ,二者可通过阴离子交换层析得到分离 ,其活性无显著性差异。经分子筛和阴离子交换层析分离纯化后 ,从 4L发酵培养液中可分别获得 1 4gTFPI1 - 1 6 1 (2 4kD)和 1 8gTFPI1 - 1 6 1 (2 7kD) ,其比活性分别达 12 880u mg和 12 4 0 0u mg ,回收率达 5 5 %。经稀释的凝血酶原时间及发色底物法检测 ,重组TFPI1 - 1 6 1 具有良好的抗凝及抑制FXa活性的作用。为获得大量TFPI1 - 1 6 1 提供了一种廉价高效的蛋白表达纯化方式 。
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- 关键词:组织因子途径抑制物PICHIAPASTORIS
- 长效TFPI突变体的分子设计及性质研究
- 组织因子途径抑制物(Tissue Factor Pathway Inhibitor,TFPI)是外源性凝血途径的特异性抑制物,具有抗凝和抗炎的双重作用,对重度败血症、感染性休克/DIC等疾病具有明显的治疗作用.但其半衰期...
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- 关键词:TFPI突变体半衰期药代动力学
- 文献传递
- 长效重组组织因子途径抑制物及其制备方法
- 本发明属生物技术领域,具体涉及长效组织因子途径抑制物(LTFPI)及其制备方法和应用。本发明对组织因子途径抑制物(TFPI)及其受体低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)的生物信息学和结构分子生物学分析和实验,确定了TFPI...
- 马端宋后燕白浩张农
- 文献传递