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石洁: 作品数：61 被引量：183H指数：8; 供职机构：河南省疾病预防控制中心更多>>; 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目河南省科技攻关计划国家科技重大专项更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学文化科学更多>>

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结核分枝杆菌mpt59和esxA融合基因编码蛋白的原核表达及免疫原性观察被引量：3: 2015年; 目的:获取结核分枝杆菌mpt59和esx A基因编码的原核表达融合蛋白,并将该蛋白初步用于结核患者的快速诊断。方法:PCR扩增含有柔性链接肽段的esx A核苷酸序列,并将其连接至原核表达载体p ET28a上,再将mpt59连接至p ET28a-esx A上。该融合蛋白在大肠杆菌BL21中原核表达后,用镍珠子进行亲和纯化。采用垂直电泳和免疫印迹分析重组蛋白,并用于结核患者的诊断。结果:成功构建了原核表达载体p ET28a-esx A-mpt59,转化大肠杆菌BL21后经诱导产生了高水平的表达产物。用该纯化蛋白进行ELISA检测,结果表明其诊断结核的灵敏度为97.8%,特异度为100%。结论:构建了含mpt59和esx A融合抗原基因的原核表达载体,并诱导表达了融合蛋白,为进一步研究结核分枝杆菌疫苗或诊断试剂奠定了基础。; 石洁朱岩昆郑丹薇马晓光王少华李辉邢进吴彩霞; 关键词：结核分枝杆菌血清学诊断原核表达

耐多药结核分枝杆菌吡嗪酰胺药物敏感性及pnc A突变情况: 2023年; 目的通过鉴定耐多药(multidrug-resistant,MDR)结核分枝杆菌中吡嗪酰胺(pyrazinamide,PZA)耐药的表型和基因型特性,为制定合适的治疗方案提供实验室依据。方法采用液体培养对耐多药结核分枝杆菌进行PZA药物敏感性测定。通过测序鉴定pncA的突变情况,并与标准菌株H37Rv的序列进行比较。结果75株耐多药结核菌中,52株(69.33%)为PZA表型耐药菌株。80.76%的准广泛耐药(pre-extensive drug resistant,pre-XDR)菌株、92.31%的广泛耐药(extensive drug resistant,XDR)菌株以及84.61%的对四种一线药物(异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素)耐药的菌株发生了PZA耐药。在PZA耐药菌株中45株(45/52,86.53%)的pncA基因发生了突变。在这些MDR菌株共存在40种不同类型的pncA的突变,包括33个点突变和7个插入缺失突变。在这些突变类型中,有17个为新发现位点。结论对四种一线药物全部耐药的菌株,准广泛耐药菌株和广泛耐药菌株的PZA具有较高耐药率。大多数PZA耐药与pncA相关,该突变散在分布且具有多样性。; 彭小婉石洁陈瑞琴; 关键词：结核分枝杆菌耐多药吡嗪酰胺

2022年河南省结核病检测专业知识水平及影响因素被引量：1: 2023年; 目的了解河南省结核病实验室检测专业技术人员理论知识水平及影响因素,为提升结核病检测专业技术人员技能提供科学依据。方法测评对象为河南省18个地市及10个省直管县结核病实验室354名专业技术人员,2022年5月18日利用问卷星软件发放调查问卷,收集测评对象人口统计学特征及答题情况。采用多元线性回归分析测评得分影响因素。结果共收回有效问卷354份。结核病防治政策、结核病病原学基础知识、痰涂片镜检、分离培养知识、药敏技术知识、分子生物学诊断技术、实验室质量控制和生物安全得分率分别为64.00%,59.31%,80.46%,76.91%,57.25%,58.90%,69.31%,60.36%;测评平均分为(71.63±14.00)分,不同学历、职称、专业、单位级别平均得分结果显示本科及以上学历(76.41±12.88)分高于大专及以下(66.20±13.25)分,中级及以上(74.82±12.87)分高于初级及以下(70.09±14.28)分,临床医学检验专业(73.41±13.94)分高于其他专业(67.93±13.45)分,市级(78.50±13.26)分高于县级(67.73±12.89)分,差异均有统计学意义(P<0.05);不同机构类型实验室平均得分结果显示独立结核病防治所(独立结防所)(80.04±10.74)分、结核病定点医院(76.69±14.03)分、综合医院(71.60±13.93)分、疾病预防控制中心(疾控中心)(67.16±12.97)分,组间差异有统计学意义(P<0.05);多元线性回归分析结果显示,影响结核病检测专业技术人员测评得分的主要因素为学历(95%CI:3.353~9.497)、机构类型(95%CI:4.662~13.600)、单位级别(95%CI:0.880~8.669)。结论河南省结防机构检测人员在结核病理论知识掌握上总体良好,但仍需要重点加强对结核病病原学基础知识、药敏检测技术及分子诊断技术知识培训学习。此外,不同学历人群、机构类型及单位级别实验室对知识掌握情况存在差异,需要精准加强对大专及以下学历与疾控中心实验室技术指导与培训,同时发挥省、市�; 苏茹月朱岩昆常文静陈瑞琴郑丹薇孙国清王少华石洁马晓光孙定勇; 关键词：测评影响因素

两种痰标本分子检测方法诊断菌阴肺结核的价值被引量：1: 2019年; 目的探讨痰标本分子检测方法利福平耐药实时荧光定量核酸扩增(XpertMTB/RIF)和恒温扩增荧光检测试剂盒(RealAmp)在菌阴肺结核快速诊断中的应用价值。方法研究组选取2014年10月~2015年10月永城市结核病防治所确诊的涂阴肺结核患者91例;对照组选取同一时期就诊期间诊断为肺部其他疾病患者31例,两组均进行XpertMTB/RIF和RealAmp检查,比较两种方法的敏感性、特异性。结果菌阴肺结核组痰XpertMTB/RIF和RealAmp的敏感性分别为70.3%,60.4%;XpertMTB/RIF和RealAmp相比明显差异无统计学意义(P>0.05);特异性分别为93.5%,83.9%。结论痰XpertMTB/RIF和RealAmp两种检测方法在菌阴肺结核诊断中都具有较高的灵敏度和特异性在临床中应用能提高菌阴肺结核的病原学检出率。; 王少华郑丹薇朱岩坤马晓光石洁李辉张国龙; 关键词：结核分枝杆菌菌阴肺结核

维生素D受体基因rs2222570位点多态性与结核发病相关性的meta分析被引量：4: 2016年; 目的：判断维生素D受体（VDR）基因rs2222570位点多态性与结核发病风险的关联性。方法：用关键词＂维生素D受体多态性＂和＂结核病＂搜索数据库中相关研究,根据各研究间的异质性,使用随机或固定效应模型进行meta分析。最终有20篇文献纳入研究。对基因型以及合并后产生的遗传模型和等位基因多态性与结核发病的相关性进行分析。结果：F等位基因携带者结核发病风险降低（OR=0.84,95%CI=0.73~0.95）;显性模型遗传模式降低结核发病风险（OR=0.74,95%CI=0.60~0.92）。结论：VDR基因rs2222570位点多态性与结核发病风险有关。; 石洁朱岩昆郑丹薇马晓光王少华李辉邢进吴彩霞; 关键词：结核病维生素D受体基因 META分析

河南省耐多药结核分枝杆菌利福平耐药基因rpoB的突变特征被引量：10: 2012年; 目的:分析河南省耐多药(MDR)结核分枝杆菌利福平耐药相关基因rpoB的突变特征。方法:收集150株MDR结核分枝杆菌,应用PCR扩增利福平耐药相关基因rpoB编码区全长并测序,以结核分枝杆菌H37Rv标准株DNA序列为参比序列,分析菌株的突变特征。结果:MDR菌株rpoB基因编码区存在突变者占97.2%(140/144),突变在利福平耐药决定区(RRDR)内者占96.5%(139/144),RRDR内和RRDR外同时存在突变者占99.3%(139/140);突变热点依次为rpoB531、rpoB526和rpoB516。发现未被记录的15个突变位点和4个突变类型,其中rpoB1284位点突变可能是多态性位点,与利福平耐药无关。结论:检测河南地区结核分枝杆菌rpoB基因RRDR内位点的突变可预测MDR结核分枝杆菌的耐药性。; 赵玉玲杨洪毅马晓光石洁李辉赵东阳; 关键词：结核分枝杆菌耐多药利福平 RPOB 突变

氧化还原指示剂法检测结核分枝杆菌药物敏感性的研究: 目的：评价氧化还原指示剂法(CRI,colorimetric redox indicator)检测结核分枝杆菌对一线抗结核药物敏感性的效能. 方法：使用国家结核病参比实验室下发的结核分枝...; 王少华朱岩昆郑丹薇马晓光石洁李辉邢进; 关键词：耐药结核病抗结核药物敏感性结核分枝杆菌; 文献传递

河南省结核菌分离株26位点MIRU-VNTR和Spoligotyping分子分型及耐药分析被引量：4: 2018年; 目的探讨河南省结核杆菌的遗传多样性。方法使用26位点(经典24位点和其他2位点)的分支杆菌散在重复单元中数目可变串联重复序列(mycobacterium interspersed repetitive unit-variable number tandem repeat,MIRU-VNTR)和间隔区寡核苷酸分型(spoligotyping)对来自2015年期间河南省不同地区的668株结核杆菌分离株进行分型分析。对结核菌spoligotype类型和耐药表型的相关性进行分析。结果 Spoligotyping分析表明668株结核杆菌被分到10个不同的基因簇中。北京家族基因型是河南地区结核杆菌中的优势菌株。北京家族基因型菌株对四种一线药全耐药以及耐多药菌株比例明显高于非北京型菌株。668株结核杆菌通过26位点VNTR被分为567个不同的基因型。26个位点中15个位点具有高度或适中的分辨能力。10个分辨能力最强位点的组合分辨力能与26位点相当。结论北京家族是河南省最流行的结核杆菌基因型。10位点VNTR和spoligotyping相结合可有效地用于河南省结核杆菌进化遗传学研究。; 石洁郑丹薇朱岩昆马晓光王少华李辉张国龙; 关键词：间隔区寡核苷酸分型

结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药相关蛋白的原核表达及纯化: 目的构建结核分枝杆菌PNCA基因的原核表达质粒,获得结核分枝杆菌吡嗪酰胺酶的表达蛋白。方法制备结核分枝杆菌基因组DNA,采用聚合酶链反应扩增目的基因片段；通过PET28A构建表达载体PET28A-PNCA,序列测定...; 李辉石洁马晓光赵玉玲闫国蕊邢进张颖; 关键词：结核分枝杆菌原核表达; 文献传递网络资源链接

实验室质量管理项目在结核病实验室试点应用效果评价: 2021年; 目的评估"强化实验室质量管理以达到认可标准(Strengthening Laboratory Management Toward Accreditation,SLMTA)"项目在河南省结核病实验室系统推广应用的可行性。方法依据中国疾病预防控制中心在全国试行的SLMTA项目指标,以郑州市结核病防治所实验室为试点,于2018年3月对试点开展基线调查,2018年7月进行中期评估,2019年6月进行终末评估。根据项目核查清单,量化评审结果。结果根据项目核查清单,试点单位基线评估总分为269分,共发现119个不符合项,综合评分为106分,占总分的39.4%,评定星级为0星,主要问题包括未开展管理评审、内部评审和不符合项的纠正措施和预防措施,及实验室设备管理体系不完善。中期评估总分为271分,共发现93个不符合项,综合评分为133分,占总分的49.1%,评定星级为0星,改进效果不明显。终末评估总分为271分,没有不符合项,综合评分为260分,占总分的95.9%,评定星级为5星,管理评审、组织机构和人员、设备、内部评审和纠正措施等部分改进明显。结论通过SLMTA项目的实施,试点实验室质量管理体系得到提升,该项目较适合在全省结核病实验室范围内推广。; 郑丹薇王璞石洁孙定勇孙国清王少华马晓光朱岩昆苏茹月常文静; 关键词：结核病实验室质量管理

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