罗敏
- 作品数：60 被引量：90H指数：5
- 供职机构：昆明医科大学更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金国家自然科学基金云南省应用基础研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学理学更多>>
- 肝细胞生长因子预处理对过氧化氢诱导大鼠神经干细胞凋亡的保护作用
- 2009年
- 目的研究肝细胞生长因子(HGF)对神经干细胞(NSC)凋亡的保护作用及其作用机制,为HGF用于NSC移植提供实验基础。方法分离培养大鼠NSC。细胞分为正常对照、模型(H2O2100μmo.lL-1)、HGF+H2O2(HGF15,30及60μg.L-1预处理24h后,再加入H2O2100μmol.L-1处理4h),LY294002(PI3K/Akt通路抑制剂)+HGF+H2O2(先加入LY29400220μmol.L-1处理30min,再加入HGF60μg.L-1处理24h,最后再加入100μmo.lL-1H2O2培养4h)组。MTT法检测细胞存活率;TUNEL法检测细胞凋亡率;比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3活性;Western印迹分析Bcl-2,Bax蛋白表达。结果MTT检测发现,随着HGF浓度的增加,NSC细胞的存活率也增加。与模型组〔(63.5±2.4)%〕比较,HGF15,30及60μg.L-1预处理组细胞存活率明显升高〔(79.1±7.5)%,(83.8±6.1)%和(86.6±8.2)%;n=3,P<0.05〕。TUNEL法检测发现,HGF预处理组凋亡细胞明显减少,模型组的凋亡率为(43.5±6.2)%,HGF预处理组则分别为(34.2±8.6)%,(21.7±3.8)%及(19.4±4.0)%。Caspase-3活性检测表明,与模型组相比,HGF预处理组细胞caspase-3活性降低。Western印迹分析结果显示,与模型组比较,HGF预处理使细胞的Bcl-2蛋白表达升高,但Bax蛋白表达不受影响;HGF的抗凋亡效应可被PI3K/Akt通道阻滞剂LY294002阻断。结论HGF可减轻H2O2所诱导的大鼠NSC凋亡,且呈一定的浓度依赖关系,其作用机制可能与NSC的PI3K/Akt通路激活和Bcl-2表达增强有关。
- 胡智兴耿菊敏周轶平罗敏梁道明
- 关键词：细胞凋亡1-磷脂酰肌醇3-激酶蛋白激酶B
- 单层分步法诱导人胚胎干细胞定向肝样细胞分化被引量：1
- 2010年
- 目的采用单层分步法诱导人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)分化为肝样细胞,建立hESCs分化为肝细胞的诱导体系。方法将hESC株H1细胞接种到Matrigel包被的培养板上,早期(细胞贴壁4d后)加入含有细胞因子活化素A(Activin A)的分化液诱导5d;中期将诱导液换为含FGF-1和BMP-4的肝分化液诱导6d;最后添加肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)和制癌蛋白M(Oncostatin M,OSM)继续诱导分化5～7d。采用免疫细胞化学染色、RT-PCR、过碘酸-雪夫(Periodicacid-Schiff,PAS)反应鉴定分化细胞的性质。结果经Activin A、FGF-1、BMP-4、HGF和OSM连续诱导的hESCs呈多角形、卵圆形或圆形,排列紧密;部分细胞出现二核或三核,呈现肝细胞所特有的形态。分化细胞在诱导早期表达SOX17、叉头框(Forkhead box,FOX)A2、GATA-4,中期表达甲胎蛋白(αfetoprotein,AFP)、白蛋白、角蛋白18,晚期表达成熟肝细胞特异性基因乙醇脱氢酶1C、细胞色素P4501B1。免疫细胞化学染色示,Activin A诱导后,细胞呈SOX17和FOXA2阳性;经FGF-1和BMP-4诱导后,呈AFP和α1抗胰蛋白酶阳性。HGF和OSM诱导后,PAS糖原染色检测阳性。结论采用单层分步法逐步添加细胞因子,可诱导hESCs分化为肝样细胞。该分化体系可为肝细胞移植、肝组织工程等临床治疗提供一个有效的细胞来源。
- 胡智兴罗敏梁道明
- 关键词：人胚胎干细胞肝细胞分化
- UVA损伤人表皮细胞模型中载物界面的选择被引量：1
- 2009年
- 目的选择一种建立长波紫外线(ultrayiolet,UVA)照射人表皮角质形成细胞损伤模型的理想载物界面。方法选取原代培养的处于指数生长期的角质形成细胞,分别采用泡沫板、锡纸板、冰面作为载物界面,进行相同剂量的UVA照射,同时设未照射组为对照组,通过改良MTT法检测细胞损伤程度。结果冰面作为载物界面时,细胞损伤相对较弱,损伤率仅为19.88%;锡纸面作为载物界面时,细胞照射损伤最重,损伤率高达82.76%;泡沫板作为载物界面时的细胞照射损伤率为55.58%,介于上述两种载物界面之间,各组与对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论泡沫板是UVA照射人表皮细胞损伤模型的理想载物界面。
- 马林琳张玲罗敏邓杨林李玛琳
- 关键词：UVA人表皮角质形成细胞
- 云南白药含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的影响
- ＜正＞骨折（Bone Fracture）是常见病,会给患者及其家人的生活和工作带来很多痛苦和不便。骨髓中存在一种多能成体干细胞--间充质干细胞[1]（Mesenchymal Stem Cells,MSCs）,它们在各种因...
- 张慧班立丽顾胜华杨兵兵罗敏韩宏昇李玛琳
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞增殖成骨分化血清药理学
- 文献传递
- 微生物接种针
- 本实用新型提供微生物接种针，包括主针管、连接在主针管上的针头、滑动地设于主针管内的主推塞，还包括推针和接种副针。推针滑动地设于主推塞内和针头内；至少一个接种副针设于主针管之上，接种副针包括与主针管连通的接种副针管和滑动地...
- 纳鑫刘丹丹陈丽君张旋罗敏罗绍忠张玲陈亚娟卿晨
- 文献传递
- 人胚胎干细胞接种在鼠尾胶原包被培养板上定向分化为血管内皮细胞被引量：2
- 2012年
- 背景:胚胎干细胞在体外可诱导分化为血管内皮细胞,进而形成血管,因而成为血管组织工程理想的种子细胞来源之一。目的:探讨建立定向诱导人胚胎干细胞向血管内皮细胞分化的方法。方法:在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上培养人胚胎干细胞H1,将H1细胞团块转移到鼠尾胶原包被的培养板,贴壁24-48h后,培养基换为含不同辅助因子和内皮细胞生长添加剂的EGM-2内皮细胞培养基。结果与结论:①在EGM-2内皮细胞培养基诱导下,细胞逐步表达内皮细胞特异性标记基因VEGFR-2、PECAM1、vWF、CD34、VE-cadherin、GATA-2。②分化细胞表达内皮细胞特异性标记VE-cadherin、CD31。③分化细胞具有吞噬低密度脂蛋白功能。说明将人胚胎干细胞接种在鼠尾胶原包被培养板上,通过EGM-2内皮培养体系诱导,可直接分化为功能性血管内皮细胞。为研究胞外基质对诱导胚胎干细胞血管内皮细胞分化的作用以及相关信号分子机制打下了基础。
- 罗敏耿菊敏梁道明胡智兴
- 关键词：胚胎干细胞血管内皮细胞分化鼠尾胶原干细胞
- 稀土配合物抗肿瘤活性研究进展被引量：16
- 2014年
- 大量研究表明,稀土具有一定的抗肿瘤活性,稀土与配体形成配合物后其抗肿瘤活性强于配体。目前,国内外研究安全、有效、可控的稀土配合物的抗肿瘤药物已经成为热点,已研究出多种稀土配合物并对其进行抗肿瘤机制分析。本文对已研究出的多种稀土配合物如邻香兰醛缩氨基酸Schiff碱稀土配合物、氧氟沙星稀土配合物、嘧啶类稀土配合物和芦丁素稀土配合物等进行分类,并对其抗肿瘤机制进行归纳、总结。
- 刘燕周轶平罗敏李玛琳
- 关键词：稀土配合物抗肿瘤
- 不同剂量CCl_4急性肝损伤模型的评价被引量：6
- 2014年
- 目的：建立一种简单易行和系统稳定的CCl4诱导的急性肝损伤模型，以便于对肝细胞移植效果进行观察。方法选用20％和50％浓度的CCl4植物油溶液2mL/kg腹腔注射小鼠，分别于在不同时间点取材。检测小鼠的存活率、肝功能中的血丙氨酸转氨酶（ALT）和天门冬氨酸转氨酶（AST）以及肝脏病理变化。结果20％CCl4腹腔注射小鼠的生存率高于50％。实验组的动物血ALT和AST均明显升高，显著高于对照组（P＜0．01），但两实验组之间差异无统计学意义（P＞0．05），病理切片显示20％CCl4腹腔注射小鼠肝细胞出现典型的胞浆疏松化、气球样变，可见散在的点状、碎片状坏死及炎性细胞浸润；50％CCl4除上述病变明显加重外，还伴有明显的纤维化改变。结论应用20％～50％CCl4在2mL/kg剂量下腹腔注射可诱导出不同程度的较为稳定的肝损伤，其浓度的高低决定肝损伤的程度；20％～50％CCl4所致急性肝损伤是肝细胞移植治疗实验较为理想的模型。
- 梁道明胡智兴罗敏张毅陈嘉勇
- 关键词：肝细胞移植急性肝损伤四氯化碳
- 10株人癌细胞基因组的微卫星不稳定性特征被引量：1
- 2015年
- 背景:为了解实验室常用人癌细胞的微卫星不稳定性情况。目的:从基因组微卫星水平分析各组织来源人癌细胞株的遗传背景差异。方法:取10株指数生长期的人白血病、结肠癌、胃癌、肝癌、肺癌、宫颈癌、膀胱癌细胞及2株人正常细胞(人脐静脉内皮细胞、人皮肤成纤维细胞),提取细胞DNA,对BAT-25,BAT-26,CAT-25,NR-24,SEC-63五个几近单态性的微卫星位点进行PCR扩增,12%聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染法对产物进行检测,同时用ABI3720XL自动测序仪测序。结果与结论:人脐静脉内皮细胞、人皮肤成纤维细胞的5个微卫星位点扩增片段长度具有一致性及稳定性,可作为正常对照。人结肠癌细胞、人膀胱癌细胞在BAT-25、BAT-26、CAT-25或NR-24位点扩增片段长度均较人脐静脉内皮细胞及人皮肤成纤维细胞缩短,缩短产度为7-13 bp,属于微卫星高度不稳定细胞。其他细胞在5个位点扩增片段的长度与人脐静脉内皮细胞、人皮肤成纤维细胞一致,属于微卫星稳定细胞。实验结果揭示了受试人癌细胞基因组微卫星不稳定性水平,为未来选择合适的细胞株进行药物活性筛选等试验奠定了基础。
- 石中正刘燕罗敏陈英杰周轶平
- 关键词：微卫星不稳定性银染
- 脊髓中间外侧神经元NOS与FAS和NT_3共存被引量：1
- 2002年
- 目的 :研究脊髓中间外侧神经元除含有NOS外是否还含有Fas和NT3 .方法 :取成年猫脊髓L3 节段制作 2 0 μm厚冰冻切片并分组 .用相邻切片分别进行ABC法免疫染色和NADPH -d组织化学反应双染 .观察NOS与Fas和NT3 在脊髓中间外侧神经元是否共存 .结果 :在脊髓中间外侧神经元观察到双标反应物 ,Fas主要位于细胞核 ,胞浆弱阳性反应 ,NOS的阳性反应物则主要位于细胞浆 .相对之 ,NOS和NT3 的阳性反应物则均位于细胞浆 .神经突起内均见双标染色 .结论 :脊髓中间外侧神经元内NOS ,Fas和NT3 共存 ,进而提示这些成员可能与脊髓中间外侧神经元的某些生理功能有关 .
- 罗敏王廷华陈彦红
- 关键词：一氧化氮合酶神经营养素-3
