罗渊
- 作品数：12 被引量：25H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 5种虫媒病毒悬浮芯片检测方法的建立被引量：11
- 2008年
- 目的建立同时检测1-4型登革病毒、乙型脑炎病毒、西尼罗病毒、森林脑炎病毒和黄热病病毒等5种虫媒病毒的悬浮芯片检测方法。方法根据GenBank发表的上述病毒的序列,通过生物信息学分析和参考相关文献,在黄病毒属高度保守的NS5区设计属通用引物和种特异检测探针。将探针共价交联到不同的Luminex色标微球上,利用属通用引物进行RT-PCR扩增,与混合微球杂交,最后利用Luminex200仪器分析荧光强度值。结果将平均荧光强度的判定阈值定为背景对照的两倍可以对这5种共8型病毒进行有效鉴定。通过多批次的实验,均能准确鉴定出上述5种病毒,没有出现交叉反应,且批次间的平均荧光值偏离不大,变异系数（CV）均小于8%,表明本方法的特异性和稳定性均较好。在空斑滴定病毒的基础上,对本方法的检测敏感性进行了验证,结果表明对乙脑和黄热病病毒的检测敏感性可达到1.4个PFU,对西尼罗病毒可达14个PFU。进而将本方法用于检测55份临床标本和传代标本,其检测结果和种特异RT-PCR方法相比,具有很高的一致性,而且其在混合样本的快速检测中具有显著的优势。结论通过设计合适的引物和探针,成功建立了可同时检测和分型5种虫媒病毒的悬浮芯片方法,为疾病的诊断和预防以及流行病学调查提供了新的手段。
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- 关键词：虫媒病毒悬浮芯片
- 人源H5N1亚型禽流感病毒株空斑特性和致病性研究被引量：2
- 2008年
- 目的观察不同H5N1亚型禽流感病毒株空斑特性,对比研究不同空斑类型H5N1病毒致病性和复制能力差异。方法将不同稀释度的H5N1亚型禽流感病毒株分别接种于MDCK单层细胞,加盖营养琼脂,合适时间染色,观察不同H5N1亚型禽流感病毒株空斑形成特点,按照DullbeccoR的方法计算病毒PFU数;根据空斑大小进行挑选、纯化、筛选不同类型空斑病毒,测定这些病毒对Balb/c小鼠致病性差异和在MDCK细胞上复制差异。结果野生的人源H5N1禽流感病毒株在空斑形成上都存在不同程度的不均一性,空斑大小、形状差异明显:A/Vietnam/1194/2004(H5N1)以大圆形斑为主,夹杂少量小点状斑。A/Beijing/01/03(H5N1)大多数为中等大小空斑,并有少数针尖状斑。野生A/Vietnam/1194/2004经过分离纯化后,得到的两种空斑类型病毒在致病性和复制能力存在明显差异。结论野生的人源H5N1禽流感病毒株在空斑形成上都存在不同程度的不均一性,从野生病毒株中分离、纯化的大小斑病毒在致病性和复制能力上存在明显差异。
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- 关键词：H5N1不均一性毒力
- 山西运城日本乙型脑炎病毒分离和基因组特征的分析
- 利用BHK-21细胞对采集自2006年山西运城乙脑疫区内的150份猪脑病料进行了病毒分离,结果从其中一份标本中分离到1株病毒,经血清学、分子生物学以及小鼠感染实验证实其为日本乙型脑炎病毒。采用RT-PCR、5'-RACE...
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- 关键词：乙型脑炎病毒分子生物学血清学氨基酸
- 文献传递
- 汉坦病毒H8205株基因组全序列分析
- 采用RT-PCR技术扩增出汉坦病毒H8205株L、M、S基因序列,利用5'-RACE和3'-RACE扩增出基因的末端,将其分别克隆于pGEM-T Easy载体上进行序列测定,利用重叠片段拼装出汉坦病毒H8205株的基因组...
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- 关键词：汉坦病毒基因组全序列RACE系统发生树
- 文献传递
- 人及野鸟H5N1病毒株在人体靶细胞复制及拮抗人细胞因子能力差异分析
- H5N1禽流感病毒跨越种属屏障感染人类是当前全球关注的重要社会公共卫生问题之一。为了揭示H5N1病毒跨种传播的机制,本研究利用分离/保存的3株人源及7株青海野鸟源的H5N1病毒株(人分离株株A/Beijing/01/03...
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- 文献传递
- 汉坦病毒H8205株基因组全序列分析
- 汉坦病毒118205株为本室1982年利用Vero E6细胞从黑龙汀省病人全血标本中分离,采用RT-PCR、5'-RACE和3'-RACE扩增出H8205株基因全序,序列分析表明H8205株L片段长度为6533bp,读码...
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- 关键词：汉坦病毒氨基酸
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- 五种虫媒病毒悬浮芯片检测方法的建立
- 虫媒病毒又称节肢动物病毒,是指能在敏感的节肢动物,如蚊、蜱、白蛉、蠓等吸血昆虫体内繁殖但不致病,通过吸血昆虫叮咬而在人畜间传播的一组病毒。国际上已发现的虫媒病毒约537种,其中130余种可引起人畜疾病,表现为发热、皮疹、...
- 罗渊
- 关键词：虫媒病毒悬浮芯片
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- 一种拯救流感病毒的方法及其专用双向转录载体
- 本发明公开了一种拯救流感病毒的方法及其专用双向转录载体。该双向转录载体，是在pVAX1的多克隆位点插入RNA聚合酶I的启动子和RNA聚合酶I的终止子得到的环状重组载体；所述RNA聚合酶I的终止子位于所述pVAX1的CMV...
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- 几种虫媒病毒悬浮芯片检测方法的建立
- 虫媒病毒在我国分布广泛,有些病毒可造成严重的公共卫生问题,对于这类病毒快速甄别目前缺乏高通量、快速的检测方法。悬浮芯片是近年来兴起的一种检测技术,具有高通量、操作简便、重复性好、灵敏度高以及线性范围宽等优点,特别适合于多...
- 罗渊杨保安刘伯华祝庆余
- 关键词：虫媒病毒芯片检测悬浮芯片
- 文献传递
- 悬浮芯片在核酸和蛋白质检测中的应用被引量：9
- 2007年
- 悬浮芯片是近年来兴起的一种新型检测技术,不同于固相基因芯片,它整合了高分子化学、分子生物学、免疫学、激光检测、微流体、高速数字信号处理、计算机分析等方面的先进技术,能够对少量样本进行高通量的定性、定量检测。主要综述了悬浮芯片技术的基本原理,并概要介绍了其在核酸和蛋白质检测中的应用。悬浮芯片技术在核酸和蛋白质检测中有着显著的优点,如高通量、操作简便、重复性好、灵敏度高、线性范围宽等,不但可以广泛应用于科学研究领域,而且还将逐渐普及于临床诊断实验室,具有广阔的应用前景。
- 罗渊刘伯华祝庆余
- 关键词：悬浮芯片
