胡顺林
- 作品数：101 被引量：329H指数：11
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 鸡胚成纤维细胞酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定被引量：5
- 2011年
- 选取对新城疫病毒（NDV）易感的鸡胚成纤维细胞（CEF）,Trizol提取细胞总RNA,用SMART技术合成双链cDNA,然后利用同源重组的方法在酵母细胞内构建CEF的cDNA文库,以寻找与NDV基质（M）蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,探讨其相互作用对NDV装配和出芽的影响。结果表明：提取的细胞总RNA的D260 nm/D280 nm为1.96,甲醛变性琼脂糖凝胶显示RNA未发生降解,质量良好。获得的文库容量为3×106cfu,插入的双链cDNA片段大小为0.3~3 kb,平均长度为1.3 kb左右,文库重组率为100%。该文库的构建为发现和研究与NDV M蛋白相互作用的宿主细胞蛋白提供有效工具。
- 段志强王郁杨朱艳梅开妍胡顺林王晓泉刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒鸡胚成纤维细胞酵母双杂交CDNA文库SMART技术
- 神经氨酸酶茎部氨基酸缺失对H5N1亚型禽流感病毒生物学特性的影响被引量：19
- 2006年
- 近年来H5N1亚型禽流感病毒（AIV）神经氨酸酶（NA）茎部15—20个氨基酸的自发缺失时有报道，突变对于AIV生物学特性的影响还没有得到系统研究。应用反向遗传操作技术，拯救获得5株具有不同NA茎部长度的H5N1／PR8重组AIV。重组病毒的内部基因和血凝素（HA）基因来源相同，NA基因来源不同，并在NA茎部进行20个氨基酸的删除或添加突变。通过研究其生物学特性发现，5株重组病毒在SPF鸡胚中繁殖良好，其EID50、MDT和平均病毒滴度相似；NA茎部长短影响病毒的解凝能力，长茎病毒红细胞解脱能力比短茎病毒强；NA茎部15或20个氨基酸删除突变提高了重组病毒在MDCK细胞上的繁殖能力，短茎病毒释放出的病毒粒子数量是长茎病毒的10。100倍，释放时间提前6．10h，短茎病毒在MDCK细胞上形成的空斑也明显比长茎病毒的空斑大。实验结果揭示了AIVNA茎部氨基酸缺失突变的生物学意义，NA茎部15或20个氨基酸删除突变增强了AIV的细胞适应性，可能与现阶段H5N1亚型AIV宿主范围进一步扩大有关。利用反向遗传技术成功拯救了5株H5N1／PR8重组流感病毒，为流感病毒基因功能研究和重组疫苗研究建立了技术平台。通过对AIVNA茎部氨基酸的删除突变提高了病毒在MDCK细胞上的繁殖产量，为流感病毒细胞苗的生产提供了新的思路。
- 王曲直龙进学胡顺林吴艳涛刘秀梵
- 关键词：H5N1亚型禽流感病毒反向遗传操作技术
- 禽主要病毒感染的比较蛋白质组学研究进展被引量：1
- 2011年
- 比较蛋白质组学是蛋白质组学的一个重要分支,现已广泛应用于生命科学和医药学的各个领域,尤其在重大疾病研究、治疗和靶向药物的筛选方面得到了更为广泛的应用。比较蛋白质组学在兽医学领域研究的重点在于揭示病毒与宿主细胞的相互作用机制和病毒的分子致病机制,为动物病毒病的诊断、防控和新型疫苗的开发提供新的思路。本文从比较蛋白质组学的研究内容和主要研究技术、在兽医学研究中的应用以及在禽主要病毒感染中的研究进展进行综述。
- 段志强王郁杨开妍胡顺林刘秀梵
- 关键词：比较蛋白质组学蛋白质组学病毒感染
- 冷冻原肠浸泡解冻池水细菌多样性分析被引量：2
- 2017年
- 为了研究冷冻原肠浸泡解冻池水的细菌多样性,采集3份水样直接提取细菌基因组总DNA,再分别用PCR技术扩增出细菌16S rDNA并构建基因文库,经PCR鉴定后从3个文库中分别随机挑取50个阳性克隆进行DNA序列测定。分别对3个文库的测序结果进行分析发现,除去24.00%~32.00%为无法鉴定的未培养细菌和未分类细菌以外,其余细菌来自于芽胞杆菌纲、γ-变形菌纲、放线菌纲和黄杆菌纲,分别占各文库克隆总数的38.00%~42.00%、20.00%~26.00%、4.00%~8.00%和0~2.00%。除去44株无法鉴定的细菌,进一步对其他106株细菌进行分析发现,其中2株放线菌目细菌和5株肠杆菌科细菌无法进一步鉴定,其余99个菌株包含了来自19个属的至少30种细菌,且肠球菌属、变形杆菌属和芽胞杆菌属为其中的优势菌属。本研究显示冷冻原肠浸泡解冻池水中细菌多样性较高,其中部分细菌为致病菌和条件致病菌。
- 仇保丰宋鸿雁董蓉莲高雪梅蒋荧梅顾炳泉胡顺林
- 关键词：细菌多样性
- 免疫鸽群中2株新城疫病毒的分离鉴定及遗传进化分析
- 鸽新城疫俗称鸽瘟,是由鸽Ⅰ型副粘病毒(pigeonparamyxovirus-Ⅰ,PPMV-Ⅰ)引起的一种高度接触性传染病,是危害养鸽业的主要疫病之一,鸽新城疫起源于上世纪70年代的中东,至今几乎已经传遍世界各国。有人认...
- 朱杰赵晴晴宋庆庆胡顺林王晓泉李群辉刘秀梵
- 文献传递
- 新城疫重组病毒灭活疫苗(A-VII株)的研制和临床试验
- 新城疫(ND)是《国家中长期动物疫病防治规划(2012-2020》中优先防治的5种一类动物疫病之一。长期以来ND在我国家禽群体中呈常在的地方流行,疫苗免疫是主要的防控措施之一。我国的免疫鸡群常发生所谓的非典型ND,产蛋鸡...
- 刘秀梵胡顺林胡增垒刘晓文王晓泉
- 文献传递
- 基因Ⅶ型新城疫病毒在鸡脾细胞中的高效复制和对宿主应答的调节
- 引言/目的基因Ⅶ型新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)是世界许多地区的优势流行株。与其他基因型新城疫强毒相比,基因Ⅶ型NDV对家禽淋巴组织表现更强的侵害性,病变以淋巴组织广泛性坏死为特点。...
- 胡增垒胡顺林胡娇王晓泉朱杰刘秀梵
- 荧光定量RT-PCR检测中、强毒力新城疫病毒方法的建立及验证被引量：3
- 2012年
- 根据新城疫病毒F基因的裂解位点序列,设计合成一对引物和TaqMan探针,以本室构建并保存的鹅源新城疫病毒ZJ1株F基因阳性重组质粒作为中、强毒力新城疫病毒RNA定量检测的标准品,建立检测方法。结果表明本试验建立的标准曲线循环阈值(Ct值)与模板浓度具有良好的线性关系,相关系数为0.999,灵敏度约为3拷贝/μL,对禽流感病毒和其他禽病病毒无交叉反应,特异性好、重复性佳,为中、强毒力新城疫病毒检测提供了一种快速高效的定量检测方法。对28株标准分离株强弱毒力的检测与经典病毒分离方法符合率达100%,对187份临床样品的检测,二者结果符合率接近90.0%。在新城疫病毒临床样品快速检测、流行病学监测等方面显示良好的应用前景。
- 曹军平胡新岗吴双胡顺林赵国王晓泉刘晓文陈长春刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒荧光定量RT-PCR
- 新城疫重组病毒灭活疫苗(A-Ⅶ株)的研制和临床试验
- 目的：为了研发针对我国新城疫重组病毒优势流行强毒株的疫苗。方法：从分离的几百株NDV强毒中筛选出遗传稳定、生物学特性优良的基因VIId亚型毒株作母本，应用反向遗传技术平台，构建了NDV重组疫苗株A-VII。结果：因此该A...
- 刘秀梵胡顺林胡增垒刘晓文王晓泉
- 关键词：灭活疫苗病理机制
- 文献传递
- 鹅源新城疫病毒ZJ1株拯救体系相关因素的探索
- 2006年
- 在构建了鹅源新城疫病毒(NewcastleDiseaseVirus,NDV)ZJ1毒株的微型基因组和表达该病毒NP、P与L蛋白的辅助质粒的基础上,通过对该病毒拯救体系中的重要影响因素如ZJ1在易感细胞的增殖、热休克对拯救效率的影响、表达T7RNA聚合酶的重组痘苗的感染复数、胞嘧啶阿拉伯呋喃糖苷(Arac)对重组痘苗复制的影响以及共转染质粒的比例和量等进行了探索。以上研究为该病毒的成功拯救及开展其它相关研究奠定了基础。
- 张艳梅提金凤胡顺林刘玉良刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒
