蒋国松
- 作品数：46 被引量：161H指数：8
- 供职机构：华中科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 茉莉素抗肿瘤作用及其机制研究进展被引量：1
- 2007年
- 茉莉素在调控植物生长发育和应激反应中具有重要作用，亦可以通过促进凋亡、诱导分化等方式抑制多种肿瘤细胞生长，具有选择性作用于肿瘤细胞、可以抗耐药肿瘤细胞的特点，是一类潜在的新型抗肿瘤药物。目前认为，茉莉素的抗肿瘤机制与丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）激活、线粒体PT孔开放、活性氧家族（ROS）产生、促凋亡蛋白Bax与Bcl-xS上调、细胞内ATP耗竭等有关。
- 蒋国松童强松曾甫清
- 关键词：茉莉素肿瘤抗肿瘤药
- 茉莉酸甲酯诱导人神经母细胞瘤细胞株BE(2)-C凋亡作用机制被引量：2
- 2008年
- 探讨茉莉酸甲酯对人神经母细胞瘤细胞株BE（2）-C的生长抑制作用及其对凋亡抑制蛋白家族成员XIAP和survivin表达的影响。1-2 mmol·L^-1茉莉酸甲酯处理BE（2）-C细胞6-24 h后，MTT法检测瘤细胞生长活性，克隆形成实验检测细胞增殖能力，PI单染流式细胞术检测细胞周期，AO/EB荧光染色法、Hoechst 33258荧光染色法、Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡，半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（real-time RT-PCR）检测细胞周期素D1（cyclin D1）、X连锁凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor ofapoptosis protein，XIAP）及survivin表达。结果表明，各浓度茉莉酸甲酯作用后，BE（2）-C细胞呈时间、浓度依赖性生长抑制，1，1.5和2 mmol·L^-1茉莉酸甲酯作用24 h后，细胞生长抑制率为20.6%-85.5%（P〈0.01），IC50为1.35 mmol·L^-1；S期细胞比率增高，部分瘤细胞发生典型的凋亡形态学改变，早期凋亡细胞（FITC^＋PI^-）分别占13.51%、17.32%和24.59%（均P〈0.01），细胞死亡率分别为29.36%、54.73%和75.52%（均P〈0.01）；XIAP和survivin表达分别下调18.5%-68.9%和22.4%-48.7%（均P〈0.05），而cyclin D1表达无显著变化（P〉0.05）。可见，茉莉酸甲酯能通过诱导细胞周期阻滞和凋亡抑制人神经母细胞瘤细胞株BE（2）-C的生长活性，下调XIAP和survivin基因表达可能是其作用机制之一。
- 蒋国松童强松曾甫清胡波郑丽端蔡嘉斌刘媛
- 关键词：茉莉酸甲酯神经母细胞瘤细胞周期阻滞凋亡X连锁凋亡抑制蛋白SURVIVIN
- 小鼠缺氧诱导丝裂原因子基因启动子的结构与功能分析被引量：2
- 2008年
- 缺氧诱导丝裂原因子(hypoxia-induced mitogenic factor,HIMF)是一种肺组织特异性生长因子,可刺激肺细胞增生和再生,但HIMF基因表达调控的机制尚未明确.为探索HIMF基因转录调控机制,首先以小鼠基因组DNA为模板,通过PCR扩增方法获得-348^+61bp、-302^+61bp、-131^+61bp、-68^+61bp的HIMF启动子片段,再将其定向克隆入pGL3-Basic载体,构建荧光素酶报告基因载体,并制备转录因子ETS-1结合位点的突变或缺失体.在阳离子脂质体的介导下,报告基因载体分别瞬时转染正常氧浓度条件下培养的小鼠肺上皮MLE-12和MLE-15细胞、结肠癌CT26细胞.结果发现,各HIMF启动子片段在MLE-12、MLE-15细胞中均有活性,但在CT26细胞中活性缺失;-302^-131bp区存在HIMF启动子的核心调控元件.针对该区域ETS-1转录因子结合位点进行突变或缺失,能导致HIMF启动子活性显著降低;凝胶电泳迁移率实验表明,该区段能结合ETS-1.结果提示,转录因子ETS-1参与正常氧浓度下HIMF启动子活性的调控,为研究HIMF基因的转录调控机制奠定了实验基础.
- 郑丽端童强松蔡嘉斌蒋国松刘媛杜志勇董继华
- 关键词：启动子报告基因
- ALS2CL基因在肾透明细胞癌中的表达及意义
- 2013年
- 目的观察肾透明细胞癌（ccRCC）与正常肾组织中ALS2CL基凶的表达及差异，并探讨其意义。方法采用实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）、免疫组织化学（IPH）及Westernblot检测26例配对癌组织／癌旁正常肾组织标本及2株ccRCC来源细胞（786／0、SN12-PM6）中ALS2CL基凶mRNA和蛋白的表达。结果与正常对照组比较，ALS2CL基凶mRNA在65．38％（17／26）的ccRCC组织中表达显著下调，在786／0、SN12-PM6中表达亦显著下调；IPH结果示73．08％（19／26）ccRCC组织ALS2CL蛋白呈阴性或弱阳性表达；Westernblot结果示53．58％（14／26）ccRCC组织ALS2CL蛋白表达下调，2株细胞ALS2CL蛋白表达亦下调，与各自对照组比较，其表达差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论ALS2CL基因表达缺失或下调可能与肾透明细胞癌发生密切相关。
- 向威赵军刘周强曾鹏蒋国松章小平陈朝晖
- 关键词：肾透明细胞癌基因表达抑癌基因
- 茉莉素对人神经母细胞瘤细胞株SK—N—SH的抑制增殖及诱导凋亡作用被引量：4
- 2008年
- 目的观察茉莉素对人神经母细胞瘤细胞株SK—N—SH的抑制增殖及诱导凋亡作用，并比较茉莉酸甲酯、顺式茉莉酮、茉莉酸作用强度差异。方法1～10mmol／L茉莉酸甲酯、顺式茉莉酮、茉莉酸分别处理SK-N-SH细胞后，NTT法检测细胞生长活性；克隆形成实验检测细胞增殖能力；PI单染法流式细胞术检测细胞周期；AO／EB荧光染色法、Hoechst33258荧光染色法、Annexin V-FITC／PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡。结果各浓度茉莉素作用后，SK-N—SH细胞呈时间、浓度依赖性生长抑制，其中茉莉酸甲酯作用最强，1～10mmol／L茉莉酸甲酯作用24h后，细胞生长抑制率为（22．74～88．67）％，IC50为1．44mmol／L；2．5mmol／L茉莉酸甲酯、顺式茉莉酮、茉莉酸作用后，细胞克隆形成能力分别降低87．00％、78．66％、39．00％，细胞周期示S期细胞比率显著增高，G0／G1期细胞比率下降，部分细胞发生典型的凋亡形态学改变；1．5～2．5mmol／L茉莉酸甲酯作用后，细胞凋亡率为（23．77—36，43）％。结论茉莉素能通过减弱瘤细胞增殖、诱导细胞周期阻滞和凋亡等机制抑制人神经母细恩情瘤细胞株的生长活性。
- 蒋国松童强松曾甫清郑丽端蔡嘉斌刘媛顾朝辉王智宇
- 关键词：茉莉素神经母细胞瘤增殖细胞周期脱噬作用
- 人工合成拟Smac多肽增强膀胱癌细胞化疗敏感性的实验研究
- 2008年
- 背景与目的:Smac是目前发现的惟一能直接同时抑制多个IAPs家族成员活性的凋亡相关蛋白,其N端的4个氨基酸残基AVPI(Ala-Val-Pro-Ile)是重要的促凋亡结构域,我们通过人工合成可穿透细胞的促凋亡融合多肽SmacN7,探讨其对膀胱癌化疗药物敏感性的促进作用。方法:噻唑蓝(MTT)检测SmacN7融合多肽对低剂量丝裂霉素C(MMC)诱导的膀胱癌T24细胞的相对存活率的影响:Annexin V/PI双标流式细胞术检测T24细胞的凋亡1;Western印迹检测SmacN7融合多肽与MMC联用后T24细胞内XIAP、Caspase-3的表达;同时检测Caspase-3活性及SmacN7融合多肽与MMC联用对T24细胞的杀伤作用。结果:SmacN7融合多肽能穿透细胞并与内源性XIAP结合,增加低剂量MMC诱导的T24细胞凋亡并呈时间和浓度依赖性:并能显著降低细胞内XIAP的表达水平,增强Caspase-3的表达及活性:在24 h和48 h,SmacN7+MMC组与单用MMCtg相比,T24细胞的存活率分别降低55%和72.7%。结论:人工合成可穿透细胞的促凋亡融合多肽SmacNT能促进化疗药物诱导的膀胱癌T24细胞凋亡,抑制细胞增殖,增强膀胱癌细胞对MMC的化疗药物敏感性。
- 曾甫清王竞汪良蒋国松
- 关键词：SMAC/DIABLO合成肽膀胱癌化疗敏感性
- 第二次经尿道膀胱肿瘤电切术预防高危非肌层浸润性膀胱癌术后肿瘤复发的临床研究被引量：16
- 2013年
- 目的探讨高危非肌层浸润性膀胱癌患者行二次经尿道膀胱肿瘤电切（TURBT）术的意义。方法已行第一次TURBT的高危非肌层浸润性膀胱癌患者70例随机分为对照组和二次TURBT：对照组患者在电切术后行膀胱内化疗药物（丝裂霉素C）灌注治疗；二次TURBT组完成对照组治疗，术后3个月第一次复查时行第二次TURBT为实验组。两组患者随访2年，观察肿瘤复发的情况。结果2年内实验组患者膀胱肿瘤的复发率相比对照组患者的复发率显著降低（P〈0．05）。结论第二次TURBT术能有效降低高危非肌层浸润性膀胱癌患者术后肿瘤复发率。
- 黄韬王淼王勇军汪良蒋国松曾甫清
- 关键词：经尿道膀胱肿瘤电切术膀胱灌注化疗
- APEH基因在肾透明细胞癌中的表达研究
- 2012年
- 目的研究APEH基因在肾透明细胞癌中的表达,以探索其意义。方法应用半定量RT-PCR、实时定量PCR、免疫组化(IPH)检测30例配对肾透明细胞癌组织/癌旁正常肾组织标本中APEH基因mRNA和蛋白的表达,并对其中16例配对标本进行Western blot蛋白检测,予以统计分析。结果相较正常对照组,RT-PCR、实时定量PCR及IPH均显示肾细胞癌组织中APEH基因表达下调,其比例分别达到60.0%(18/30)、73.3%(22/30)和80.0%(24/30),另外,Western blot示62.5%(10/16)的癌组织标本APEH蛋白表达下调。4种方法检验P值均<0.05,差异有统计学意义,且针对同一批配对标本各检测方法结果之间一致性显著。结论 APEH可能为一新的肾透明细胞癌分子标志物。
- 向威赵军陈朝晖蒋国松梁嘉前刘周强曾鹏王淼张良
- 关键词：肾透明细胞癌基因表达抑瘤基因
- 沉默PKM2增强藤黄酸诱导人前列腺癌PC3细胞凋亡的敏感性被引量：5
- 2013年
- 目的:研究沉默丙酮酸激酶M2型(PKM2)对藤黄酸(GA)诱导人前列腺癌PC3细胞凋亡的影响,并探讨其潜在的作用机制。方法:设计并合成针对PKM2的3条特异性siRNA及阴性对照siRNA(si-NC)。利用脂质体将PKM2 siRNA和si-NC转染至人前列腺癌PC3细胞并检测PKM2 siRNA的沉默效率。MTT和吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双重染色法分别检测沉默PKM2后GA对PC3细胞生长活性和凋亡的影响。采用实时荧光定量PCR和Western印迹法分别检测c-myc和cyclin D1的mRNA和蛋白表达水平。结果:与si-NC组比较,3条PKM2 siRNA都能够有效下调PKM2的mRNA和蛋白表达水平,其中PKM2 siRNA-1的沉默效率最高。转染PKM2siRNA-1 24 h后,PC3细胞中PKM2 mRNA和蛋白表达水平分别下调70%和85%(P<0.05)。转染PKM2 siRNA-1后给予0.5μmol/L的GA处理24 h,PC3细胞生长活性明显受到抑制(对照组的68%)且凋亡诱导增加,而且c-myc和cyclin D1基因的mRNA和蛋白的表达水平显著下调(c-myc分别为对照组的50%和35%;cyclin D1分别为对照组的60%和20%,P<0.05)。结论:抑制PKM2能够提高GA诱导人前列腺癌PC3细胞凋亡的敏感性,PKM2可能成为GA治疗前列腺癌的有效增敏靶点。
- 吕磊汪良蒋国松章传华曾甫清
- 关键词：藤黄酸前列腺癌敏感性
- 拟Smac促凋亡多肽的合成及其生物活性的初步研究被引量：2
- 2008年
- 目的探讨拟Smac多肽的合成及其对膀胱癌细胞的促凋亡生物活性。方法应用固相多肽合成技术,合成具有细胞膜穿透性SmacN7融合多肽,经RP-HPLC纯化、纯度分析,用质谱仪定性鉴定;通过荧光显微镜观察细胞凋亡形态、细胞增殖抑制率测定及流式细胞仪分析,研究其对低剂量丝裂霉素C诱导的膀胱癌T24细胞的凋亡促进作用。结果可穿透性融合多肽SmacN7产物峰纯度达95%以上,分子量为3278.08,质谱鉴定结果与合成预期结果完全一致;50～500μg/LSmacN7作用12～48h,肿瘤细胞出现典型的凋亡形态学改变;随着SmacN7浓度的增加或作用时间的延长,细胞增殖抑制率出现明显增加,药物作用12h、24h、48h后增殖抑制率分别为(9.62±1.07)%～(61.48±1.15)%、(24.17±1.02)%～(72.86±1.68)%、(43.24±1.15)%～(84.91±1.74)%;肿瘤细胞凋亡率也明显增加,分别为(6.12±1.16)%～(49.81±2.11)%、(13.47±1.15)%～(64.54±2.27)%、(28.91±1.08)%～(82.36±2.19)%。结论固相合成的拟Smac融合多肽SmacN7为高纯度的目的肽,能够稳定地转入细胞内且利用率高,并有明显促进低剂量丝裂霉素C诱导的膀胱癌T24细胞凋亡的生物活性,为进一步研究膀胱肿瘤的生物治疗积累了有价值的资料。
- 王竞曾甫清汪良蒋国松廖贵益杜岳峰
- 关键词：SMAC固相合成生物活性
