蒋大伟
- 作品数：41 被引量：128H指数：7
- 供职机构：河南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- “十三五”国家重点研发计划中的畜牧兽医科技布局与评述被引量：12
- 2020年
- 科技资源的布局和配置对于畜牧兽医领域科技创新和产业发展具有重要支撑作用。"十三五"科技计划改革组建了全新的国家重点研发计划,设置"畜禽重大疫病防控与高效安全养殖综合技术研发"等国家重点研发专项对畜牧兽医领域科技创新进行支持,在动物疫病防控、高效安全养殖、养殖环境处理、养殖装备等方面进行了布局,按照基础研究、重点关键技术研发、集成示范进行"全链条设计、一体化实施"。本文以该专项为主,介绍并分析"十三五"国家重点研发计划畜牧兽医类项目实施背景和立项情况,对我国畜牧兽医领域的科技布局进行阐述并提出评述与展望。
- 孙康泰王小龙王小龙蒋大伟张建民
- 关键词：畜牧兽医
- 不同鸡源志贺菌分离菌株药敏试验研究
- 对河南省不同地区的鸡源志贺菌进行耐药性测定,本研究采用K-B纸片扩散法对34株不同的鸡源志贺菌进行药敏试验.结果显示:所有分离菌对每种抗生素的耐药率在1.76％(4/34) 97.06％(33/34)之间,平均耐药率为5...
- 蒋大伟苗银萍李克宇许兰菊
- 关键词：菌株分离纸片扩散法
- 鸡腹泻病原菌的分离鉴定及药敏试验研究被引量：2
- 2012年
- 为了对来自河南省部分地区的腹泻病(死)鸡进行病原确诊及了解病原对药物的敏感性,恰当采集动物病料进行细菌常规分离鉴定和药敏试验。结果共鉴定出5株鸡白痢沙门氏菌和17株鸡源志贺氏菌。分离的志贺氏菌中,痢疾Ⅰ型5株,痢疾Ⅱ型3株,鲍氏多价1株,福氏多价1株,其余7株尚未定型。每株沙门氏菌和志贺氏菌对试验鸡的致病性不同,沙门氏菌发病率为40%～80%,死亡率为10%～20%;志贺氏菌发病率为30%～100%,死亡率为0～90%。药敏试验结果显示:5株鸡白痢沙门氏菌对阿莫西林、氨苄西林、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星的耐药率均为80%(4/5),对罗红霉素、甲氧苄啶和四环素的耐药率高达100%(5/5);但对头孢唑啉、头孢曲松、阿奇霉素、庆大霉素、阿米卡星较为敏感,敏感率分别为80%(4/5)、80%(4/5)、80%(4/5)、100%(5/5)、100%(5/5)。多数志贺氏菌对四环素、甲氧苄啶、罗红霉素耐药,耐药率分别为82.35%(14/17)、88.24%(15/17)、100%(17/17);而对头孢唑啉、头孢曲松、阿米卡星较为敏感,敏感率分别为88.24%(15/17)、94.12%(16/17)、94.12%(16/17)。由此可见,在临床上可选取庆大霉素、头孢曲松和阿米卡星作为防治鸡腹泻病的首选药物。
- 苗银萍蒋大伟许兰菊张光辉尤晓楠李克宇
- 关键词：腹泻志贺氏菌沙门氏菌药敏试验
- 双重溶菌质粒制备鸡痢疾志贺菌菌壳的研究
- 2013年
- 通过将2种不同的重组溶菌质粒转化至鸡痢疾志贺菌中,构建含有双重溶菌质粒的志贺菌重组菌株,以提高该菌菌壳制备的裂解率和稳定性,并对其特性进行研究。用重组溶菌质粒pBV220::E和pBBRIMCS-E共同转化到鸡痢疾志贺菌,构建志贺菌重组菌株Sd(pBV220::E/pBBRI MCS-E),重组菌株于28℃培养至D600值为0.5时升至42℃继续培养,间隔30min检测菌液D600值,进行重组菌株的溶菌裂解动力学比较试验,绘制裂解曲线图并计算出裂解率,制备菌壳并对其形态进行电镜观察。重组菌株Sd(pBV220::E/pBBRIMCS-E)经42℃诱导后可形成菌壳且保留了基本的细胞形态,裂解率达到了99.999 9%。本研究成功制备出鸡痢疾志贺菌菌壳,为研究利用该菌菌壳预防鸡痢疾志贺菌病的可行性奠定了基础。
- 蒋大伟刘军张瑞安夏力亮孙洋祝令伟冯书章许兰菊
- 关键词：志贺菌疫苗
- 鸡源志贺氏菌IpaC基因新型表达载体构建及其在毕赤酵母中的表达
- 2016年
- 为使鸡源志贺氏菌IpaC蛋白保持天然的生物学活性,在毕赤酵母表达系统中实现分泌表达,进一步研究IpaC蛋白的生物学功能,本研究在不改变IpaC蛋白氨基酸序列的情况下,根据酵母密码子偏爱性优化合成IpaC#基因,利用真核表达载体p GAPZA和8种真核信号肽,分别构建真核表达载体pGAPZA-Inu/Inv/Kil/Lys/Mat/Amy/Glu/Ser-IpaC#,然后将线性化的重组质粒电转化至毕赤酵母X-33中,对阳性转化子进行表达,并用SDS-PAGE及Western-blot检测其表达产物。结果表明:在8种重组菌表达产物的菌体沉淀中检测到大小约为60 ku的目的蛋白。说明鸡源志贺氏菌IpaC基因成功实现了在毕赤酵母的胞内表达。
- 马金玉韩志霞蒋大伟王亚宾许兰菊苗银萍孔江南
- 关键词：毕赤酵母
- 粗糙型布鲁菌M111菌壳的制备被引量：4
- 2014年
- 将含有裂解酶基因重组温控裂解质粒pBBR1MCS∷PR-PL-E电转化至粗糙型布鲁菌M111中,构建重组布鲁菌M111(pBBR1MCS∷PR-PL-E)。重组菌株在28℃培养,42℃诱导表达裂解酶E,从而制备布鲁菌菌壳。绘制布鲁菌生长曲线及裂解曲线,计算裂解率并用透射电镜观察布鲁菌菌壳的形态。结果显示,成功制备了布鲁菌菌壳,温控裂解质粒pBBR1MCS∷PR-PL-E对布鲁菌的裂解率为100%。透射电镜观察可见细菌内容物部分流出,细菌表面出现不同程度的皱缩,细胞形态发生变化。结果表明,本试验成功制备了粗糙型布鲁菌菌壳,初步研究了其基本特性,为下一步开展布鲁菌菌壳疫苗的研究奠定了基础。
- 张瑞安刘军蒋大伟夏力亮孙洋祝令伟纪雪郭学军冯书章
- 双重溶菌质粒制备鸡痢疾志贺菌菌壳的研究
- 将两种不同的重组溶菌质粒转化至鸡痢疾志贺菌中,构建含有双重溶菌质粒的志贺菌重组菌株,以提高该茵菌壳制备的裂解率和稳定性,并对其特性进行研究.用重组溶菌质粒pBV220::E和pBBRIMCS-E共同转化到鸡痢疾志贺菌,构...
- 蒋大伟刘军冯书章许兰菊李克宇
- 关键词：免疫疫苗
- 非洲猪瘟病毒CD2v胞外区蛋白多克隆抗体的制备及其应用被引量：1
- 2022年
- 非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)CD2v蛋白是病毒粒子外层囊膜上的糖蛋白,是介导病毒血细胞吸附和鉴定病毒血清型的关键蛋白,对于ASFV疫苗研发和疫病净化具有重要作用。为制备ASFV CD2v胞外区蛋白多克隆抗体,本研究以NCBI公布的China/2018/AnhuiXCGQ毒株的EP402R基因为研究对象,利用生物信息学软件进行分析,确定蛋白胞外区序列并进行同源性比对,将其进行密码子优化后克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建CD2v胞外区蛋白重组表达质粒His-CD2v-ex-pcDNA3.1(+),转染293 F细胞进行表达。SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,重组蛋白在293 F细胞中以分泌形式表达,相对分子质量为63~89 kDa,能够与ASFV阳性血清特异性结合。利用Ni-NTA进行亲和层析纯化,将纯化后的蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,通过Western blot、免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)和间接免疫荧光试验(IFA)鉴定其生物活性,结果显示兔抗ASFV CD2v胞外区蛋白多克隆抗体能够特异性识别PK-15细胞表达的CD2v蛋白,可用于ASFV CD2v蛋白的Western blot、IPMA和IFA检测。本研究为进一步研究ASFV CD2v蛋白的功能和ASFV诊断方法的建立提供了材料。
- 姜文廷王嘉宾石雪建万博杜永坤蒋大伟姬鹏超张改平
- 关键词：ASFV多克隆抗体
- 双重溶菌质粒制备鸡痢疾志贺菌菌壳的研究
- 通过将两种不同的重组溶菌质粒转化至鸡痢疾志贺菌中,构建含有双重溶菌质粒的志贺菌重组菌株,以提高该菌菌壳制备的裂解率和稳定性,并对其特性进行研究。用重组溶菌质粒pBV220::E和pBBRIMCS-E共同转化到鸡痢疾志贺菌...
- 蒋大伟刘军孙洋祝令伟冯书章许兰菊
- 关键词：疫病防治
- 文献传递
- 鸡志贺氏菌多价凝集抗原及其标准血清的应用被引量：2
- 2009年
- 利用研制的鸡志贺氏菌多价凝集抗原及其标准血清,对信阳地区18家鸡场的351份鸡待检血清进行了血清抗体检测。结果显示:351份被检血清中,鸡鲍氏和痢疾志贺氏菌混合感染的抗体阳性率达8.33%(1/12)～73.91%(17/23),平均抗体阳性率为44.16%(155/351)。通过与鸡志贺氏菌单价凝集抗原的检测结果相比较,发现其吻合率高达98.58%(346/351),说明鸡志贺氏菌多价凝集抗原及其标准血清用于血样的检测,具有高度的特异性,准确可靠、方法简便快速。
- 宋海霞李炜蒋大伟许兰菊李凯潘国民贾文科
- 关键词：标准血清血清学调查抗体阳性率
