蔡胜利
- 作品数:8 被引量:67H指数:5
- 供职机构:北京大学人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京大学人类疾病基因研究中心科研基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 以MAGE基因mRNA为特异标记检测肝癌患者外周血肿瘤细胞被引量:6
- 2002年
- 目的 以黑色素瘤抗原 1(MAGE 1)和MAGE 3基因mRNA为特异性标记物 ,检测肝细胞癌 (HCC)患者外周血中的肿瘤细胞 ,并探讨其临床意义。 方法 采集 2 5例HCC患者及 2 0例健康志愿者的外周血 ,用巢式RT PCR方法检测外周血单核细胞 (PBMC)中MAGE 1和MAGE 3基因mRNA。同时用RT PCR方法检测HCC患者肝癌组织中上述MAGE基因的表达。 结果 4 4 % (11/2 5 )和 36 % (9/ 2 5 )HCC患者的PBMC中可分别检测到MAGE 1和MAGE 3基因mRNA ,而相应肝癌组织中MAGE 1和MAGE 3的表达率分别为 6 8% (17/ 2 5 )和 5 6 % (14 / 2 5 ) ;在 6 4 % (16 / 2 5 )的HCC患者PBMC中至少可检测到一种MAGE基因mRNA ;肝癌组织中不表达MAGE基因的病例以及 2 0例健康志愿者的PBMC中均未测出MAGE基因mRNA。HCC患者PBMC中两种MAGE基因mRNA的检出率与肿瘤TNM分期、直径密切相关 ,而与肿瘤分化程度、血清AFP水平无相关性。但 9例血清AFP正常或轻度升高者 (<5 0ng/ml) ,6例的PBMC中MAGE 1和 /或MAGE 3mRNA为阳性。 结论 MAGE 1和MAGE 3基因mRNA可作为特异性肿瘤标记物用于检测HCC患者PBMC中的肝癌细胞 ,巢式RT PCR的敏感性及特异性较高 ,其检测结果可能有助于判断HCC患者的预后。
- 彭吉润蔡胜利冷希圣牟东成吕建锋陈红松芮静安
- 关键词:MAGE基因肝癌外周血肿瘤细胞
- 恶性黑色素瘤抗原编码基因-MAGE-1在肝细胞肝癌中表达的研究被引量:5
- 1999年
- ruggen等[1]首先在恶性黑色素瘤中发现MAGE1基因,它在胃癌、食管癌等多种恶性肿瘤中都有较高程度的表达,而在正常组织中(除睾丸外)均不表达[24]。MAGE1基因编码抗原MZ2E可以被主要组织相容性抗原HLAI类分子提呈,活化并诱导...
- 蔡胜利陈红松王瑜赵海涛彭吉润庞学文龚顺友朱继业丛旭王宇芮静安冷希圣杜如昱陈慰峰
- 关键词:黑色素瘤MAGE-1基因编码
- 肿瘤特异性抗原-MAGE家族的研究进展被引量:4
- 2001年
- 蔡胜利冷希圣杜如昱
- 关键词:黑色素瘤食管癌胃癌肠癌肺癌肝癌
- 黑色素瘤抗原-1基因在肝细胞癌中的表达被引量:31
- 1999年
- 目的 检测黑色素瘤抗原 1(MAGE 1)mRNA在肝细胞癌 (HCC)中的表达 ,为用MAGE 1基因编码蛋白作为疫苗对HCC患者进行免疫治疗提供依据。方法 用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法对 4 5例HCC患者癌组织和相应癌旁肝组织以及 16例肝硬化组织和 12例正常肝组织的MAGE 1mRNA表达情况进行研究 ,对 6例RT PCR扩增产物中的目的基因片段进行DNA序列测定 ,并以测序证实为MAGE 1基因的cDNA片段为模板合成 [α32 P]标记的探针 ,进行Southernblot分析。同时用ELISA方法对其中 4 3例HCC患者进行人类白细胞抗原 (HLA)class1 A及B位点分型。结果 4 5例HCC患者中 ,3 2例表达MAGE 1mRNA ,而相应癌旁组织及非HCC患者肝组织均不表达 ;DNA测序 ,6例PCR产物中的目的基因片段均证明为MAGE 1cDNA序列 ,其中 3例均有 3个相同位置碱基的点突变 ,导致 2个氨基酸残基改变 ;5例电泳阳性癌组织的RT PCR产物Southernblot结果也为阳性 ,而癌旁组织均为阴性 ;HCC患者中常见HLA类型为A2 ( 5 3 5 % ) ,A11( 2 5 6% ) ,A2 4( 2 0 9% ) ,A33( 2 0 9% ) ,B13( 2 8 3 % ) ,B35( 2 3 2 % ) ;MAGE 1的表达与肿瘤直径、α FP水平等临床指标无相关关系。结论 MAGE 1在肝细胞癌中呈高比例表达 。
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- 关键词:黑色素瘤肝细胞癌基因表达
- 肝细胞肝癌中bcl-10基因突变的研究
- 2000年
- 目的 研究bcl 10基因在早期和进展期人肝细胞肝癌中的突变频率。方法 提取 46例新鲜肝癌及癌周组织的基因组DNA ,应用聚合酶链式反应 单链构像多态性分析 (PCR SSCP)方法 ,研究bcl 10基因 3个外显子的突变情况 ,并对每个外显子随机抽取 6例突变样本进行测序分析。同时分析bcl 10基因突变与血清甲胎蛋白 (AFP)水平以及肝癌大小的关系。结果 46例肝细胞肝癌中共检测到外显子 1突变 2 6例 ,占 5 6 .5 % ,6例测序样本中有 5例表现为第 5 744位C→G颠换突变 ;外显子 2突变 2 5例 ,占 5 4.3 % ,6例测序样本中有 4例表现为第 11311位T碱基缺失突变 ;外显子 3突变 2 1例 ,占 45 .7% ,6例测序样本皆表现为第 14116位C→T转换突变。统计分析表明bcl 10突变和血清AFP以及肝癌大小无相关性。结论 bcl 10基因在肝癌中突变频率较高。
- 程纪华冷希圣蔡胜利彭吉润曹广王申五杜如昱
- 关键词:肝细胞癌基因突变突变频率
- 黑色素瘤抗原-3基因在肝细胞癌中的研究被引量:16
- 2000年
- 目的 检测黑色素瘤抗原 3(melanomaantigen 3 ,MAGE 3)mRNA在肝细胞癌 (HCC)中的表达 ,探讨用MAGE 3基因编码蛋白作为疫苗对HCC患者进行免疫治疗在理论上的可行性。 方法 用RT PCR方法对 45例HCC患者癌组织和相应癌旁肝组织以及 16例肝硬化组织和 12例正常肝组织的MAGE 3mRNA表达情况进行研究 ,对 3例RT PCR扩增产物中目的基因片段进行DNA序列测定 ,并以测序证实为MAGE 3基因的cDNA片段为模板合成 [α32 P]标记的探针 ,进行Southern杂交。同时用ELISA方法对其中 43例HCC患者进行HLA 1 A及B位点分型。 结果 45例HCC患者中 ,35例 (78% )MAGE 3mRNA表达阳性 ,癌旁组织有 6例阳性 (13% ) ,病理检查证实这 6例癌旁组织中都有明显的异型增生 ,而非HCC患者的肝硬化及正常肝组织均不表达 ;DNA测序 ,3例PCR产物中的目的基因片段均证明为MAGE 3cDNA序列 ;Southern杂交结果和RT PCR电泳结果完全一致 ;HCC患者中常见HLA类型为A2 (5 3 5 % ) ,A11(2 5 6 % ) ,A2 4 (2 0 9% ) ,A33(2 0 9% ) ,B13(2 8 3% ) ,B35(2 3 2 % ) ;MAGE 3的表达与肿瘤直径 ,AFP水平等临床指标无相关关系。 结论 MAGE 3在肝细胞癌中呈高比例表达 ,这使得以此抗原用于HCC患者的免疫治疗成为可能 ;一些细胞有异型增生的癌旁组织中表?
- 蔡胜利赵海涛冷希圣程继华龚顺友彭吉润丛旭王宇芮静安回允中杜如昱陈慰峰
- 关键词:肝细胞癌DNA
- 两种黑色素瘤抗原基因在肝细胞癌中的表达被引量:7
- 2001年
- 目的 检测黑色素瘤抗原MAGE 4和MAGE 10mRNA在中国人肝细胞癌 (HCC)中的表达 ,为用这两种基因编码蛋白作为疫苗对HCC患者进行免疫治疗提供依据。方法 用RT PCR方法对 48例HCC患者癌组织和相应癌旁肝组织、10例肝硬化组织和 10例正常肝组织的MAGE 4和MAGE 10mRNA表达情况进行研究 ,并对RT PCR扩增产物中目的基因片段进行cDNA序列测定。结果 48例HCC患者中 ,有 15例 (31.3% )表达MAGE 4,14例 (2 9.2 % )表达MAGE 10mRNA ;而相应癌旁肝组织、肝硬化和正常肝组织均不表达。cDNA测序进一步证明 ,PCR产物中的目的基因片段为MAGE 4和MAGE 10cDNA序列 ,两种MAGE基因的表达与肿瘤大小、甲胎蛋白 (α FP)水平等临床指标无相关关系。结论 MAGE 4和MAGE 10在HCC组织中呈特异性的表达 ,而在癌旁非瘤性肝组织中均不表达 ,这使得以此抗原用于HCC患者的免疫治疗成为可能。
- 蔡胜利冷希圣王宇彭吉润程继华丛旭芮静安杜如昱陈慰峰
- 关键词:黑色素瘤抗原基因肝肿瘤基因表达
- 甲胎蛋白启动子调控表达p53基因的肝癌细胞靶向性基因治疗载体的研究被引量:12
- 2000年
- 目的 利用含有人甲胎蛋白启动子的腺相关病毒载体 ,构建能在人肝癌细胞株中特异表达目的基因的质粒。方法 通过设计含有特定酶切位点的引物 ,选择性地从人基因组中扩增出人甲胎蛋白启动子 (AFPpromoter)序列并克隆到含有绿色荧光蛋白 (GFP)报告基因的质粒pTR UF5上 ,构建成含报告基因的重组腺相关病毒质粒rAAV AFP GFP ;再通过平端连接的方法 ,构建成含p5 3基因的质粒rAAV AFP 5 3。通过用rAAV AFP GFP转染表达AFP的HepG2 细胞株和不表达AFP的 2 93细胞株 ,以检测AFP启动子的功能。rAAV AFP 5 3转染HLE肝癌细胞株后 ,用流式细胞分析检测对细胞周期的影响。结果 rAAV AFP GFP和经测序、酶切鉴定证实为含有人AFP启动子的质粒。细胞转染表明rAAV AFP GFP能特异地在AFP阳性细胞中高效表达目的基因 (质粒转染效率为 36 .5 % ) ;rAAV AFP 5 3使HLE的凋亡率达到 73 .88%。结论 成功构建了以腺相关病毒为载体、受人AFP启动子调控表达人野生型p5 3基因和报告基因的质粒。
- 程纪华冷希圣彭吉润何湘君蔡胜利张佑彬王申五杜如昱
- 关键词:腺相关病毒甲胎蛋白启动子基因治疗肝癌