谢喜秀
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 以人乳头瘤病毒(HPV)病毒样颗粒(VLP)为基础的预防性疫苗的研究
- 世界范围内，宫颈癌是妇女第二高发肿瘤。持续性高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染是引发宫颈癌的主要原因。目前鉴定的高危型HPV有15型，其中HPV16，18是世界范围内的优势流行株，HPV58是东亚地区、中美和南美地区优势流...
- 谢喜秀
- 关键词：人乳头瘤病毒病毒样颗粒预防性疫苗层析纯化
- 人乳头瘤病毒(HPV)58型中和单克隆抗体的制备及初步应用被引量：1
- 2012年
- 人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)58型是宫颈癌的主要诱因之一.HPV58在亚洲地区宫颈癌组织中的检出率仅次于HPV16/18.HPV58中和单克隆抗体可用于HPV病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)疫苗的研究,并为病毒感染入侵机制的研究提供实验材料.本研究采用HPV58 L1 VLP免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞进行杂交瘤细胞的制备,通过VLP-ELISA和假病毒中和实验筛选杂交瘤细胞株;经rProtein A纯化阳性杂交瘤细胞培养上清获得单抗;采用ELISA测定型别特异性中和单抗的亲和力,采用相加实验及变性VLP-ELISA分析单抗识别表位的性质;选取高亲和力单抗建立定量分析HPV58 L1 VLP的ELISA方法.获得了2株HPV58特异性中和单抗XM-22和XM-23,亲和常数分别为2.7×107mol-1.L和1.9×106mol-1.L,二者识别表位可能不同.同时获得2株具有交叉中和活性的单抗XM-21和XM-24,除可较高水平中和HPV58外,还可分别交叉中和亲缘关系较远的HPV18和HPV6.以XM-22建立的ELISA方法定量分析HPV58 L1 VLP的检测范围为0.05μg/mL～0.40μg/mL.本研究建立的ELISA方法可用于HPV58 L1 VLP疫苗生产的质量控制研究,获得的4株具有不同特点的中和单抗可用于HPV58感染入侵机制的研究.
- 刘艳春张婷谢喜秀包琦锋许雪梅
- 关键词：ELISA
- L2多表位融合蛋白及其应用
- 本发明涉及L2多表位融合蛋白及其应用。具体而言，本发明涉及包含乳头瘤病毒的L2表位和通用性辅助性T淋巴细胞的串联体和IgG亚型重链基因的改造突变体的融合蛋白、其编码核苷酸、包含所述编码核苷酸的pFastBac1重组质粒、...
- 许雪梅陈雪刘洪洋张婷谢喜秀
- 文献传递
- HPV 18 L1病毒样颗粒的表达纯化及其豚鼠抗血清制备被引量：1
- 2009年
- 目的优化人乳头瘤病毒(HPV)18型晚期基因L1并在昆虫细胞中表达,获得HPV18L1病毒样颗粒(VLP),制备豚鼠抗血清。方法联合利用昆虫细胞偏性密码子、C末端截短32个氨基酸、降低mRNA二级结构等策略优化HPV18L1基因,合成后克隆入pFastBac1载体,构建重组病毒,感染sf9昆虫细胞72h后进行Western blot表达鉴定,密度梯度离心法纯化后进行纯度鉴定及形态学鉴定,获得HPV18L1VLP,联合弗氏佐剂免疫豚鼠制备抗血清。结果HPV18L1优化基因在昆虫细胞中可有效表达,纯化的HPV18L1蛋白纯度达90%以上,电镜观察可见直径约为50nm的VLP,豚鼠免疫血清中HPV18L1VLP特异性抗体滴度达5.12×105。结论HPV18L1优化基因可在昆虫细胞中高效表达并组装成VLP,制备的高滴度抗血清为HPV18L1VLP疫苗的进一步研究打下基础。
- 彭清林张婷范东升郑伟谢喜秀许于飞许雪梅
- 关键词：人乳头瘤病毒18型病毒样颗粒杆状病毒表达系统抗血清
