谢礼
- 作品数：16 被引量：96H指数：7
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省科技厅科技计划项目浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生电气工程更多>>
- 建兰花叶病毒单克隆抗体的制备及检测应用被引量：10
- 2007年
- 用建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV)免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选克隆,获得3株能稳定传代并分泌抗CymMV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞(2C6、5B7和12G9),分别制备它们的单抗腹水。其中5B7和12G92株单克隆抗体腹水间接ELISA效价达10-6,3株单抗的抗体类型及亚类均为IgG1,轻链均为κ链。利用单克隆抗体建立了抗原包被间接ELISA(ACP-ELISA)检测CymMV的方法。蝴蝶兰病叶作1∶10240倍稀释、提纯CymMV病毒浓度为4.87ng/mL(每孔的病毒绝对量为0.487ng)时,该方法仍能检测到病毒。利用ACP-ELISA方法检测了田间样品,发现CymMV在兰花上发病很普遍。
- 孟春梅吴建祥谢礼郑锦凯洪健周雪平
- 关键词：建兰花叶病毒单克隆抗体
- 家蚕传染性软化病病毒的冷冻电子显微镜三维重构
- 2009年
- 应用冷冻电子显微镜三维重构技术获得了家蚕传染性软化病病毒(Infectious flacherie virus,IFV)衣壳的三维立体结构.重构最终结果使用了5047个病毒粒子的数据.FSC曲线显示该重构结果的分辨率为18?.IFV的衣壳直径为302.4?,遵循拟T=3(P=3)二十面体对称.衣壳为单层,厚度15?,表面光滑致密,无明显突起或凹陷,无孔洞贯穿.将IFV衣壳结构与昆虫的类小RNA病毒-蟋蟀麻痹病毒(Cricket paralysis virus,CrPV)以及人小RNA病毒-人鼻病毒14(human rhinovirus14,HRV14)的衣壳进行比较,发现IFV衣壳结构与CrPV更为接近.与CrPV一样,IFV衣壳表面也缺少"Rossmann峡谷".同时预测了IFV结构蛋白VP2和VP3的肽链折叠拓扑结构,并对亚基在衣壳表面的分布位置进行了推测.
- 谢礼张勤奋鲁兴萌戴兴红李鲲鹏洪健周雪平
- 关键词：FLACHERIE
- 复合侵染的蚕豆黄花叶病病原诊断
- 本文以一株蚕豆病株为例，经透射电镜观察发现病叶汁液中存在高浓度的球状和线状两种病毒粒子。进一步通过超薄切片观察细胞病理学特征，并结合ELISA和RT—PCR检测技术，对该病株的病原进行了诊断鉴定，判明是由蚕豆萎蔫病毒2和...
- 谢礼刘文洪洪健
- 关键词：蚕豆黄花叶病蚕豆萎蔫病毒病原诊断
- 文献传递
- CarMV和IFV衣壳结构、SrMV柱状内含体的电子显微镜三维重构研究
- 病毒不但严重威胁人类健康和生命，还引起农作物及禽、畜和经济动物的流行性病害，造成严重的经济损失。对于病毒的研究一直是结构生物学和病理学研究的重要课题。运用传统电子显微学技术和现代结构生物学技术研究病毒蛋白聚合物的三维结构...
- 谢礼
- 关键词：电子显微镜三维重建
- 藏红花病毒病原的分子鉴定被引量：11
- 2013年
- 目的研究栽培藏红花的病毒病原。方法综合运用病毒粒子形态和细胞病理学电镜观察、DAS-ELISA检测、RT-PCR检测及序列测定等技术进行病原鉴定。结果透射电镜负染色观察到病株汁液含有600～900 nm的线状病毒粒子;超薄切片观察到病株细胞质内有大量线状病毒粒子、II型风轮状内含体和电子致密无定型体,符合菜豆黄花叶病毒Beamyellow mosaic virus(BYMV)的病理学特征。应用BYMV抗体进行病株DAS-ELISA检测结果为阳性,应用马铃薯Y病毒属特异性引物Sprimer和M4对病株进行RT-PCR检测结果为阳性,对阳性结果进行分子克隆及序列测定发现目标序列与BYMV有99%的同源性。结论综合检测结果判明侵染浙江藏红花的病毒病原为BYMV。
- 谢礼吕明芳董峰丽饶君凤毛碧增洪健
- 关键词：藏红花病原鉴定菜豆黄花叶病毒分子鉴定分子克隆
- 敲除和置换2b基因的CMV造成拟南芥和心叶烟病理学的变化
- 本文介绍用不同方法敲除2b基因以及用不同株系CMV的2b基因替换原基因后对拟南芥和心叶烟细胞病理学产生的影响。 1．材料与方法 CMV为Fny株系,寄主为心叶烟和拟南芥。寄主采集自常年恒温光照温室。
- 谢礼杜志游陈集双洪健
- 文献传递
- 稻叶黑粉病菌侵染水稻叶片的细胞学研究被引量：1
- 2023年
- 稻叶黑粉病是由担子菌Entyloma oryzae侵染水稻叶片或叶鞘引起的真菌病害,但对病原菌与寄主互作的细胞学机制一直缺少了解。本文对采自田间自然发病叶片上的病斑进行了初步的细胞学分析,结果发现,病原菌侵染后,寄主病斑部位的表皮细胞外部形态基本保持完整;病原菌主要在寄主叶肉细胞部位产生大量的厚垣孢子并逐渐取代叶肉细胞;病原菌菌丝在寄主胞外扩展,未见其穿透寄主细胞壁进入细胞内,也没有产生典型的真菌吸器。靠近病原菌菌丝的寄主各种细胞内的细胞器均发生降解,降解产生的脂类物质凝聚成了体积较大的脂质球。寄主维管束组织的细胞壁一直保持完整,未发现病原菌菌丝进入维管束,病原菌菌丝和孢子被限制在寄主相邻两个维管束之间。在发病后期,由于寄主叶片表皮结构整体性破坏导致大量细菌进入,加速了叶片的衰老死亡。本研究结果表明,稻叶黑粉病菌的侵染模式为胞外侵染,类似于活体营养真菌;但病原菌的侵染导致附近寄主细胞降解死亡,类似于腐生营养真菌。
- 张晓敏谢礼王伟兰赖朝晖梁五生林福呈胡东维
- 关键词：侵染
- 黄瓜花叶病毒2b蛋白对寄主光合速率和叶绿体结构的影响被引量：8
- 2007年
- 黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)2b蛋白作为重要致病因子的角色在茄科模式植物上已为广泛描述,但其致病机理尚未廓清.从寄主叶绿体结构和光合特征的角度探索了病毒侵染过程中2b蛋白对心叶烟(Nicotiana glutinosa)的影响.首先利用PCR方法导入突变位点,构建了2b蛋白不表达的人工突变体Fny-CMV!2bpro,然后通过平行接种野生型Fny-CMV和Fny-CMV"2bpro,分析二者侵染后心叶烟的症状表现、叶绿素含量、光合速率以及叶绿体超微结构变化.结果显示:接种30天,Fny-CMV侵染的心叶烟表现重花叶、畸形和矮化症状,植株的光合速率和叶绿素含量显著降低,叶绿体形态和结构发生明显病变.但是,Fny-CMV#2bpro侵染的心叶烟植株仅表现轻微花叶或不表现明显症状,与健康对照相比,其光合速率和叶绿素含量没有显著差异,叶绿体形态和结构亦未出现明显病变.由此可见,野生型病毒侵染导致的相对低的光合速率和叶绿素含量,与2b蛋白引起的叶绿体形态和结构的破坏有一定的相关性.RNA杂交分析结果显示:2b蛋白的致病性与CMV子代RNA在寄主体内的积累量有关,不表达2b蛋白使得CMV基因组RNA1和RNA2含量显著下降,其亚基因组RNA4(编码CP蛋白)含量降低尤为显著.
- 陈斐斐杜志游刘歆谢礼陈集双
- 关键词：黄瓜花叶病毒光合速率叶绿体结构
- 复合感染建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒的兰花超微结构观察及病原物快速鉴定被引量：19
- 2007年
- 通过负染和超薄切片观察到蝴蝶兰(Phalaenopsis amabilis)病叶中线状和杆状病毒颗粒。组织切片观察,同时发现两种病毒粒子的典型聚集体:线状粒子的带状聚集体,粒子多层排列,层间呈一定角度或螺旋相叠;杆状粒子的平行、角层状或螺旋型排列聚集体。二种病毒聚集体均出现于薄壁细胞、细胞间隙和输导组织细胞中。感病细胞中叶绿体发育不全;线粒体增生、肿胀甚至空化;细胞核膨大、空化。进一步的多重RT-PCR与病毒核酸序列分析,同时扩增到建兰花叶病毒(CymMV)和齿兰环斑病毒(ORSV)的外壳蛋白基因,与GenBank已知分离物同源性分别达到98%和99%-100%。从细胞和分子层面揭示了蝴蝶兰受CymMV和ORSV复合侵染并可能导致严重病症的事实,分析和明确了感病兰细胞超微结构的病变特征以及田间病症发生的细胞病理学依据。
- 施农农徐莺王慧中谢礼洪健
- 关键词：细胞超微结构多重RT-PCR建兰花叶病毒齿兰环斑病毒
- ICTV最新十五级分类阶元病毒分类系统中的植物病毒被引量：14
- 2021年
- 本文报告了国际病毒分类委员会(ICTV)于2020年3月批准的最新2019病毒分类系统,全面采用了十五级分类阶元,分别为:域、亚域、界、亚界、门、亚门、纲、亚纲、目、亚目、科、亚科、属、亚属、种。寄主为植物的病毒包括了植物病毒和亚病毒感染因子(类病毒、卫星病毒和卫星核酸)。植物病毒共有1608种,涉及2个域、3个界、8个门、13个纲、16个目、31个科、8个亚科、132个属、3个亚属。亚病毒感染因子包括33种类病毒,涉及2个科、8个属;6种卫星病毒,涉及4个属;142种卫星核酸,涉及2个科、2个亚科和13个属。
- 洪健谢礼张仲凯周雪平
- 关键词：植物病毒
