赵云
- 作品数：5 被引量：53H指数：4
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中国科学院知识创新工程更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 扣囊复膜孢酵母β-葡萄糖苷酶基因在毕赤酵母中的克隆与表达被引量：10
- 2005年
- 利用PCR技术,从扣囊复膜孢酵母的总DNA中扩增得到β-葡萄糖苷酶(β-Glucosidase)基因(BGL1),长度为2596bp,连接到pGEM-T载体上,用限制性内切酶切下目的基因,插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9K中,使之位于α-因子信号肽下游,且与之同框,构建成重组质粒pSHL9K。通过电转化将重组质粒pSHL9K插入到PichiapastorisGS115菌株染色体中,获得高效表达BGL1基因的毕赤酵母重组工程菌株。重组酶的最适温度为50℃,最适pH为5.4。培养基中β-葡萄糖苷酶活性最高可达47U/mL。
- 邵金辉赵云毛爱军朱雅新董志扬江宁
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶
- 多粘芽孢杆菌 (Bacillus polymyxa) β-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达、纯化及酶学性质分析被引量：29
- 2004年
- 从多粘芽孢杆菌 (Bacilluspolymyxa 1 794 )中克隆得到 β_葡萄糖苷酶基因bglA。将其构建在大肠杆菌 (Es cherichiacoli)表达载体pET2 8a(+)上 ,转化E .coliBL2 1,获得重组工程菌BL1979。重组表达的 β_葡萄糖苷酶的酶活力达到 2 4 7IU mL ,经镍柱纯化后的 β_葡萄糖苷酶最适温度为 37℃ ,最适pH值为 7 0 ,该酶经纯化后纯度可达92 7%。用非变性梯度聚丙烯凝胶电泳发现该酶具有多种寡聚体形式 ,经荧光底物活性染色表明这些寡聚体均具有
- 赵云刘伟丰毛爱军江宁董志扬
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶多粘芽孢杆菌
- 耐碱性木聚糖酶高产基因工程菌构建及应用
- ＜正＞内切β-1,4-木聚糖酶[EC3.2.1.8]是木聚糖酶系中最主要的酶,它通过催化水解木聚糖主链内部的β-1,4-木糖苷键来降解木聚糖,其产物以寡聚木糖、木二糖为主伴有少量的木糖。随着木聚糖酶在造纸、饲料及食品发酵...
- 刘伟丰毛爱军祝令香于巍赵云董志扬
- 关键词：木聚糖酶基因工程菌芽孢杆菌
- 文献传递
- 耐碱性木聚糖酶基因在短小芽孢杆菌中高效分泌表达的研究被引量：14
- 2004年
- 从木聚糖酶高产短小芽孢杆菌 (Bacilluspumilus)BP5 1中克隆得到木聚糖酶基因xynA ,将其构建在芽孢杆菌表达载体pWH1 5 2 0中得到重组质粒pWSX1 1。xynA由木糖诱导xylA启动子调控xynA表达。采用同源高效表达策略 ,以原生质体转化方法将pWSX1 1转回原始菌株BP5 1中 ,获得重组菌株BPX1 1。通过木糖诱导重组菌株中的xy nA基因高效分泌表达 ,使木聚糖酶产酶活力比原菌株BP5 1提高了 87% 。
- 刘伟丰毛爱军祝令香赵云董志扬
- 关键词：木聚糖酶耐碱性短小芽孢杆菌分泌表达
- 一种β-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌和巴斯德毕赤酵母中的克隆与鉴定被引量：5
- 2005年
- 目的 :克隆扣囊复膜孢酵母的β-葡萄糖苷酶基因 (BGL 1) ,为β-葡萄糖苷酶基因的表达作准备。方法 :用 PCR方法从扣囊复膜孢酵母的总 DNA中扩增得到 β-葡萄糖苷酶基因连接到 p GEM- T载体上 ,用限制性内切酶切下目的基因 ,插入到巴斯德毕赤酵母表达载体 p PIC9K中 ,使之位于α-因子信号肽下游 ,且与之同框 ,构建成重组质粒 p SHL9K。再将 β-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌和巴斯德毕赤酵母中进行克隆 ,并进行鉴定。结果 :重组p PIC9K转化大肠杆菌和巴斯德毕赤酵母后 ,进行酶切和 PCR鉴定 ,证明形成了目的基因的克隆。结论 :应用大肠杆菌和巴斯德毕赤酵母作为受体菌 ,p PIC9K为载体 ,成功克隆了
- 邵金辉赵云韩金祥柳明洙董志扬
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶聚合酶链反应克隆
