赵敬湘
- 作品数：75 被引量：158H指数：6
- 供职机构：军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学农业科学更多>>
- 淋巴细胞输注体内示踪方法研究
- 2010年
- 汤永永段文元赵敬湘魏广智王字玲
- 关键词：细胞输注示踪CFSE小鼠淋巴细胞荧光强度
- CD147对白血病细胞U937生长和肿瘤形成的影响被引量：5
- 2008年
- 目的:研究CD147对白血病细胞U937生长和肿瘤形成的影响。方法:分别采用脂多糖(LPS)或CD147单克隆抗体处理U937细胞;用RT-PCR和流式细胞术分别在mRNA和蛋白水平检测各组中CD147的表达情况;用流式细胞术检测在LPS和CD147单克隆抗体作用下U937细胞周期的变化;用MTT法对各组细胞的生长状况进行分析;将细胞经皮下接种于裸鼠体内,对各组间肿瘤生长速度、肿瘤体积及裸鼠存活时间进行统计分析。结果:LPS在体外能够诱导白血病细胞U937表面CD147的表达,同时细胞增殖旺盛,但细胞凋亡数增加;使用CD147抗体阻断CD147后,能够将细胞周期阻断在G0/G1期,细胞活力下降,并诱导细胞凋亡;CD147抗体体外预处理能够抑制U937细胞在裸鼠体内的生长,使小鼠存活时间延长。结论:LPS可诱导U937细胞表面CD147分子表达增加,从而促进U937细胞的生长和肿瘤形成。
- 黄灵芝赵敬湘刘淑静苏醒周虹王字玲
- 关键词：CD147白血病肿瘤生长
- 高效毛细管电泳分析鉴定药物
- 该文共分五章:第一章:介绍了毛细管电泳(CE)的基础理论和毛细管电泳的发展状况.第二章:建立了毛细管区带电泳分析中药金银花中绿原酸的分析方法.最佳分离条件为,缓冲液10mmol/L硼酸盐+19mmol/L/磷酸盐+10﹪...
- 赵敬湘
- 关键词：高效毛细管电泳药物鉴定手性拆分毛细管电色谱
- 文献传递
- PEX慢病毒载体构建及其在293FT细胞中的分泌表达被引量：1
- 2010年
- 目的 构建含人MMP-9信号肽-MMP-2-PEX片段的重组慢病毒,并在293FT细胞中分泌表达PEX蛋白.方法 利用RT-PCR、基因重组等技术,构建含MMP-9信号肽-MMP-2-PEX片段的重组慢病毒表达载体pBPLV-signal-PEX,在脂质体介导下与包装质粒（pLP1、pLP2）、包膜质粒（pLP/VSVG）共转染293FT细胞,包装产生慢病毒并进行滴度测定.慢病毒感染2931;3＂细胞后,Western印迹法检测293FI＂细胞培养上清中PEX的表达.结果 酶切和DNA测序表明慢病毒表达载pBPLV-signal-PEX构建正确,四质粒共转染293FT细胞成功获得慢病毒;慢病毒感染293FT细胞后,在细胞培养卜清中可检测到PEX蛋白的表达.结论 成功构建了含人PEX的重组慢病毒,在体外有效感染293fT细胞并持续分泌表达目的 蛋白,为进一步研究PEX在肿瘤侵袭与转移中的作用提供实验基础.
- 赵中松赵敬湘张韶峰王字玲唐红卫李锦毅
- 关键词：信号肽慢病毒载体
- GST-GP302融合蛋白在大肠杆菌中的表达及其抗血清的制备被引量：3
- 2003年
- 目的 :在大肠杆菌中表达血小板糖蛋白GPIbα之vWF结合区(GP30 2 )与谷胱甘肽S 转移酶GST的融合蛋白并制备其抗血清。方法 :将GP30 2片断插入GST融合表达载体 pGEX 4T 1,重组载体酶切鉴定后 ,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达获得GST GP30 2融合蛋白 ,SDS PAGE分析表达产物。包涵体经变性复性后免疫新西兰白兔 ,制备抗血清 ,ELISA、Westernblot检测重组抗原的免疫活性。结果 :重组质粒酶切鉴定表明 ,GP30 2基因已正确插入到 pGEX 4T 1中 ,经IPTG诱导后 ,表达出相对分子质量 (Mr)约为 5 90 0 0的融合蛋白 ,获得了ELISA效价为 1× 10 -5的多克隆抗体。Westernblot证明所制备的多抗可以与血小板糖蛋白特异性结合。结论 :GP30 2片断在大肠杆菌中的成功表达及制备得到的多克隆抗体 。
- 苏丽赵敬湘王波张玉华管利东王字玲
- 关键词：大肠杆菌
- 高海拔地区献血者红细胞增多症患病比例及其影响因素的调查分析被引量：4
- 2017年
- 目的了解高原献血人群中高原红细胞增多症(HAPC)发病情况及其影响因素。方法收集2015年5-7月在海拔3 000-4 000 m地方献血的289名献血者基本信息、既往病史、体格检查等资料,获得其HAPC患病比例,采用t检验、Wilcoxon秩和检验及Logistic回归等统计方法做单因素或(和)多因素分析。结果收缩压(mm Hg),有、无HAPC的献血者为115.42±14.38vs 121.56±8.42(P<0.01);汉族、藏族与其他少数民族献血者中患HAPC的比例为64.89%(170/262)vs 62.50%(5/8)vs 21.05%(4/19)(P<0.01);从事脑力劳动、不吸烟的献血者患HAPC的比例为81.08%(30/37)、73.25%(178/243),高于体力劳动者和吸烟者(P<0.05);献血者ABO血型中,A、B、O和AB型者患HAPC的比例为45.21%(33/73)vs 63.33%(57/90)vs 69.31%(70/101)vs 70.00%(14/20)(P<0.01)。此外,除单因素分析获得的收缩压、民族、工作性质、吸烟及血型外,经多因素分析显示:年龄(OR=1.333)、舒张压(OR=1.377)、脉搏(OR=1.161)等在HAPC的发生中也有一定影响。结论年龄、民族、工作性质、吸烟、血压、脉搏、ABO血型可能为诱发HAPC的因素,高原采血尤其是应急采血需关注献血者相关资料及参数变化。
- 王瑛张玉华赵敬湘李鹏龙刘佳赵莲周虹
- 关键词：高原红细胞增多症血型
- 抗血小板人源噬菌体抗体库的构建和初步筛选被引量：1
- 2006年
- 目的运用噬菌体抗体库技术构建一个经血小板自身免疫的抗体组合文库。方法从3例慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者的外周血中分离淋巴细胞,提取总RNA,经逆转录合成cDNA,通过半巢式PCR扩增抗体轻链κ链基因和重链Fd段基因,并依次克隆到载体pComb3中构建人源噬菌体Fab抗体库。结果20次电转后得到库容约为2.3×106cfu的人源噬菌体Fab抗体库。用多聚甲醛固定的血小板细胞作为抗原,通过3轮亲和选择,ELISA鉴定结合活性较高者,选取3个经测序分析后显示抗体轻链和重链Fd段在核苷酸和氨基酸水平都符合人免疫球蛋白基因结构特征。结论成功构建了抗血小板人源噬菌体抗体库,可用于进一步筛选针对血小板特异性靶点如GPIIb/IIIa等的人源抗体,进行以GPIIb/IIIa受体等作为靶点的治疗性人源抗体的研究和开发。
- 任霞赵敬湘周虹王字玲
- 关键词：血小板噬菌体展示抗体库
- 平行板流动小室灌流系统
- 本实用新型一种平行板流动小室灌流系统，依次由气瓶、缓冲瓶、平行板流动小室和蠕动泵用管路连接，其中，缓冲瓶置于一水浴槽内，平行板流动小室置于由温度控制器控制的一加热垫上，在气瓶与缓冲瓶连通管路上设一气阀。本实用新型通过气阀...
- 赵莲尤国兴周虹刘庆军赵敬湘王字玲
- 文献传递
- 丙氨酰谷氨酰胺二肽对人脐静脉内皮细胞ECV304缺氧缺糖损伤的保护作用被引量：3
- 2009年
- 目的观察丙氨酰谷氨酰胺二肽(丙谷二肽)对人脐静脉内皮细胞ECV304缺氧缺糖损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法在以低氧低糖培养人脐静脉内皮细胞ECV304为细胞损伤模型的基础上,以噻唑蓝(MTT)比色法优化丙谷二肽的最佳作用浓度,显微镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测线粒体膜电位。自动生化分析仪测定乳酸脱氢酶(LDH)活性,比色法检测谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的浓度,RT-PCR方法检测细胞内肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、热休克蛋白70(HSP70)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA的表达。结果丙谷二肽能够使细胞在缺氧缺糖应激下存活率增加,线粒体损伤减轻,LDH分泌降低,GSH产生增加,HSP70和HIF-1αmRNA的表达增加。结论丙谷二肽对细胞缺氧缺糖损伤有明显的保护作用,这种保护作用可能与保护线粒体、维持细胞膜结构完整、上调细胞中应激基因HSP70和HIF-1α的表达有关。
- 赵敬湘赵玉芬怀文辉吴振唐果王字玲
- 关键词：缺氧缺糖人脐静脉内皮细胞
- 血小板输注对肿瘤生长及免疫调节作用
- 目的初步探讨血小板输注对小鼠肿瘤生长及机体免疫功能的影响。方法将2×105的小鼠黑色素瘤细胞B16F10尾静脉接种于4-5周龄C57BL/6雄性小鼠,建立实验性肺转移模型。实验分成3组:对照组,即不输血小板;自体血小板输...
- 赵敬湘宋直钰魏广智汤永永王宇玲
