赵文静
- 作品数：57 被引量：154H指数：7
- 供职机构：吉林省肝胆病医院更多>>
- 发文基金：长春市科技发展计划项目吉林省科技厅重点项目长春市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 五倍子酸通过调节人肝癌HepG-2细胞线粒体氧化磷酸化对细胞凋亡的诱导作用被引量：5
- 2021年
- 目的:观察五倍子酸(GA)对人肝癌HepG-2细胞生长的抑制作用,并阐明其作用机制。方法:选择人肝癌HepG-2细胞,采用不同浓度(0,3.125、6.250、12.500、25.000、50.000和100.000 mg·L^-1)GA处理HepG-2细胞,分别作为对照组和3.125、6.250、12.500、25.000、50.000及100.000 mg·L^-1 GA组,采用MTT法检测各组细胞存活率。HepG-2细胞分为对照组及6.25,12.50,25.00 mg·L^-1 GA组,采用能量代谢分析仪检测线粒体氧化磷酸化(OXPHOS)动态全过程,流式细胞术检测各组细胞线粒体膜电位(MMP),比色法检测各组细胞中三磷酸腺苷(ATP)水平,Western blotting法检测各组细胞胞浆和线粒体中细胞色素C(Cyt C)蛋白表达量,吖啶橙染色观察各组细胞形态表现,AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果:与对照组比较,不同浓度GA组细胞存活率明显降低(P<0.05)。与对照组比较,6.25、12.50和25.00 mg·L^-1 GA组细胞基础有氧呼吸、最大有氧呼吸能力、有氧呼吸储备能力和ATP产生量均明显降低(P<0.05),细胞中MMP和ATP水平均明显降低(P<0.05),细胞胞浆中Cyt C蛋白表达量增加,线粒体中Cyt C蛋白表达量降低,吖啶橙染色可见细胞体积缩小、细胞核碎裂和染色质凝集,细胞早期凋亡率和晚期凋亡率明显升高(P<0.05)。结论:GA可以抑制HepG-2细胞增殖并诱导细胞凋亡,其机制可能与GA降低MMP和抑制线粒体OXPHOS功能有关。
- 张海英张文馨赵文静李伟
- 关键词：五倍子酸肝肿瘤细胞凋亡能量代谢线粒体氧化磷酸化
- 体外定向诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的实验研究被引量：3
- 2012年
- 骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cell,MSCs）是骨髓中一类具有多分化潜能的干细胞,在一定诱导条件下不仅可分化为中胚层的骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞,而且能分化成外胚层的神经元、神经胶质细胞及内胚层的肝细胞[1-4]。MSCs向心肌细胞的分化为扩张性心肌病、心肌梗死等的治疗带来了新的希望[5]。
- 孙庆国赵文静王日中陈锋
- 关键词：干细胞分化心肌样细胞体外定向神经胶质细胞扩张性心肌病
- 482例乙型病毒性肝炎核苷(酸)类药物耐药数据分析
- 目的:对出现乙型肝炎病毒核苷(酸)类药物耐药的患者做耐药位点、既往用药、用药时间及挽救治疗效果进行分析总结.方法:自2012年1月至2015年1月,有573例患者在我院接受了乙型肝炎病毒核苷(酸)类药物的耐药检测,检测内...
- 张淑芹孙海英赵文静
- 自体骨髓干细胞移植治疗终末期肝病56例临床观察被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨自体骨髓干细胞移植对终末期肝病患者的治疗作用。方法:56例终末期肝病患者无菌采集骨髓,负收集法分离纯化骨髓干细胞,经肝固有动脉注入肝脏。术后观察肝脏储备功能和合成功能,同时观察患者症状体征和不良反应。结果:患者骨髓采集量为120～180ml,分离细胞数为5.8×107～9.6×108个,与术前比较,术后1周91.6%的患者食欲改善,87.5%的患者体力明显改善;术后12周吲哚氰绿血浆清除率(ICGK)升高,吲哚氰绿15min滞留率(ICGR15)下降,与术前比较差异有显著性意义(P<0.05);血清血蛋白(Alb)在术后4周开始升高,12周达到最高,与治疗前比差异有显著性意义(P<0.05);胆碱酯酶(CHE)、凝血酶原时间(PT)移植术后持续改善,12周时较术前增加最明显,差异有显著性意义(P<0.05);18例并发腹水者,有11例患者腹水消失,有5例腹水减轻但没有消退。结论:自体骨髓干细胞移植技术治疗终末期肝病,患者肝脏储备功能、合成功能改善明显,术后无不良反应,安全可行。
- 赵文静张淑芹刘淑荣叶东霞刘薇
- 关键词：骨髓干细胞干细胞移植终末期肝病
- 酒精性肝硬化患者血清诱导人骨髓间充质干细胞定向分化为肝细胞样细胞被引量：5
- 2009年
- 背景:肝脏损伤后机体能够分泌一系列细胞因子和化学增活素,重型肝病患者血清中肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子等具有诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的作用。目的:探讨在酒精性肝硬化患者血清诱导条件下,人骨髓间充质干细胞向肝细胞样细胞的定向分化情况。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2006-07/2007-07在吉林省肝胆病医院科研室完成。材料:创伤患者术后废弃肋骨,由吉林省人民医院胸外科提供。实验血清来源于吉林省肝胆病医院住院的1例40岁男性酒精性肝硬化患者。方法:冲洗骨髓腔,采用密度梯度离心、贴壁培养法体外分离培养人骨髓间充质干细胞,接近融合时按1:4传代扩增。取第3代人骨髓间充质干细胞,按1×107L-1密度接种,设立2组:诱导组加入含体积分数为0.2酒精性肝硬化患者血清的L-DMEM培养基,对照组仅加入常规L-DMEM培养基。主要观察指标:相差显微镜下观察细胞形态变化,免疫组化法检测甲胎蛋白和白蛋白的表达。结果:诱导组骨髓间充质干细胞在含体积分数为0.2酒精性肝硬化患者血清的L-DMEM培养基中生长状态良好,呈类上皮样细胞形态;对照组细胞未发生形态学改变,呈成纤维细胞样。培养7d时,诱导组大部分细胞呈甲胎蛋白阳性,随培养时间延长甲胎蛋白表达减弱,而白蛋白阳性表达情况完全相反,呈逐渐增强趋势;整个培养过程对照组细胞始终未出现甲胎蛋白及白蛋白表达。结论:密度梯度离心和贴壁培养法相结合可在体外分离获得纯度较高的人骨髓间充质干细胞,酒精性肝硬化患者血清能够诱导人骨髓间充质干细胞表达甲胎蛋白及白蛋白,向肝细胞样细胞分化。
- 赵文静牛凤兰刘淑荣刘薇
- 关键词：骨髓间充质干细胞肝细胞甲胎蛋白
- 人骨髓间充质干细胞体外定向诱导分化为神经元样细胞被引量：1
- 2010年
- 背景:文献报道体外诱导骨髓间充质细胞定向分化为神经元样细胞多应用神经生长因子类多肽制剂,选择纯化学诱导剂尚不多见。目的:建立人骨髓间充质干细胞分离培养体系,体外定向诱导人骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞。方法:密度梯度离心、贴壁培养法和消化时间控制相结合分离纯化人骨髓间充质干细胞并鉴定,采用β-巯基乙醇和二甲基亚砜诱导分化为神经元样细胞,观察细胞形态,通过尼氏染色、NSE和NF-200免疫细胞化学染色对已分化的神经元样细胞进行鉴定和分化率分析。结果与结论:分离得到的骨髓间充质干细胞为成纤维样细胞,可见多个核仁,β-巯基乙醇和二甲基亚砜诱导后,间充质干细胞分化为神经元样细胞,伸出较长轴突样和树突样突起且有分支,诱导后的神经元样细胞胞质中存在着深蓝色颗粒状的尼氏小体,NSE、NF-200免疫荧光细胞化学染色均呈阳性,阳性率分别为(85.6±6.7)%和(73.2±5.6)%。结果证实采用密度梯度离心、贴壁培养法和消化时间控制相结合能够成功分离和培养人骨髓间充质干细胞,人骨髓间充质干细胞能够在诱导剂β-巯基乙醇和二甲基亚砜的诱导下体外诱导分化为神经元样细胞。
- 王莹赵洪昌赵文静叶冬霞李晶罗速
- 关键词：神经细胞骨髓间充质干细胞诱导分化
- HBV感染者脂肪间充质干细胞体外诱导为肝样细胞被引量：2
- 2017年
- 背景:有报道显示,人脂肪间充质干细胞在体外特定为环境下可诱导分化为具有白蛋白合成功能及分泌尿素功能的肝样细胞。目的:探讨乙型肝炎病毒感染者皮下脂肪组织间充质干细胞体外向肝样细胞分化的潜能。方法:胶原酶消化乙型肝炎病毒感染者脂肪组织,结合贴壁培养法获得脂肪间充质干细胞。采用三阶段诱导法诱导脂肪间充质干细胞向肝样细胞分化,观察其形态变化,免疫组织化学染色检测肝细胞相关蛋白甲胎蛋白、白蛋白和细胞角蛋白18表达,糖原染色法检测细胞糖原合成功能。结果与结论:脂肪间充质干细胞经3阶段诱导培养后,大部分细胞成多角形,类肝细胞形态;免疫组织化学染色结果显示,诱导培养后脂肪间充质干细胞白蛋白、细胞角蛋白18和甲胎蛋白染色阳性,且细胞白蛋白和细胞角蛋白18的表达随着诱导培养时间的延长逐渐增加;诱导培养后的脂肪间充质干细胞具有糖原合成功能,过碘酸雪夫试剂染色阳性。结果表明,乙型肝炎病毒感染者皮下脂肪组织间充质干细胞经成肝诱导培养后可分化为有功能的肝样细胞。
- 王彦会王志茹孙岩赵文静杨姝媛赵淑丽
- 关键词：干细胞脂肪干细胞间充质干细胞HBV感染肝样细胞
- 乙型肝炎病毒感染者脂肪间充质干细胞分离培养及生物学特性
- 2015年
- 背景:慢性乙型肝炎病毒感染影响骨髓间充质干细胞的生物学特性,而脂肪来源间充质干细胞因其取材安全、创伤小、易纯化、增殖快等优点而备受关注。目的:建立乙型肝炎病毒感染者脂肪间充质干细胞的体外分离培养方法,观察其生物学特性。方法:胶原酶消化结合贴壁培养法分离培养乙型肝炎肝硬化患者皮下脂肪组织间充质干细胞,MTT法检测细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞表型,体外检测其诱导分化为脂肪细胞和成骨细胞的能力。结果与结论:110例乙型肝炎病毒感染者脂肪间充质干细胞全部培养成功,脂肪间充质干细胞的原代培养时间为(8.3±1.2)d,生长曲线均呈"S"形,培养三四天进入对数生长期,第7天进入平台期。2第3代脂肪间充质干细胞高表达CD29,CD166,HLA-ABC和CD44,不表达或低表达CD34和HLA-DR。3脂肪间充质干细胞在成脂肪诱导培养基培养下分化为脂肪细胞,油红O染色阳性,在成骨诱导培养基培养下分化为成骨细胞,碱性磷酸酶染色阳性。以上结果显示胶原酶消化结合贴壁培养法可以高效分离乙型肝炎病毒感染者脂肪间充质干细胞,其增殖迅速,在短期内即可获得大量的细胞。
- 王彦会张淑芹赵文静
- 关键词：干细胞间充质干细胞分化潜能细胞表型HBV感染乙型肝炎肝硬化
- 自体骨髓干细胞移植治疗慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者疗效初步研究被引量：10
- 2019年
- 目的探讨血浆透析滤过联合自体骨髓干细胞移植治疗慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者的疗效。方法入组120例慢加急性乙型肝炎肝衰竭早中期患者,均接受内科综合治疗和血浆透析滤过(PDF)治疗,其中58例接受PDF联合自体骨髓干细胞移植治疗,观察患者症状、体征、生存率、活动状态评分(ECOG)、终末期肝病模型(MELD)评分、CTP分级和肝功能的变化。结果在治疗24 w和48 w,干细胞移植组患者生存率分别为70.7%和55.2%,显著高于血浆透析滤过组的51.6%和32.2%(P<0.05),干细胞移植组患者ECOG评分≥2级者分别为27.5%和12.5%,显著低于血浆透析滤过组的56.3%和40.0%(P<0.05);在治疗24 w,干细胞移植患者MELD评分和吲哚菁绿15分钟存留率(ICGR15)分别为(18.6±4.1)和(20.6±8.1)%,显著低于血浆透析滤过患者【分别为(20.4±5.2)和(28.7±10.3)%,P<0.05】;58例行自体骨髓干细胞移植治疗患者术中未出现严重不良反应。结论自体骨髓干细胞移植治疗经血浆透析滤过术后的早中期患者可明显提高患者生存率,并且有良好的安全性。
- 闫焕杰张淑芹赵文静
- 关键词：慢加急性肝衰竭骨髓干细胞移植疗效
- 肝衰竭患者血清诱导脐血间充质干细胞表达白蛋白和甲胎蛋白的研究
- 2011年
- 目的:建立分离、纯化脐血间充质干细胞(HUMSCs)的方法,探讨肝衰竭患者血清对HUMSCs的诱导分化作用。方法:采用密度梯度离心和贴壁培养法相结合分离培养HUMSCs并鉴定,以含重型肝病患者血清的低糖DMEM培养基诱导培养,不同时间点采用免疫组织化学方法 (SP)检测甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(Alb)的表达。结果:分离获得高纯度的HUMSCs,HUMSCs高表达CD44和CD29,不表达CD34,可以分化为脂肪细胞;SP结果表明,对照组HUMSCs不表达AFP和Alb,肝衰竭患者血清在培养7天时,大部分细胞呈AFP阳性表达(75.2±7.8)%,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.05);诱导培养14天、21天和28天时AFP表达阳性率分别为(40.1±8.2)%、(10.4±3.5)%和(6.8±2.3)%;肝衰竭患者血清培养7天时仅少数细胞内可见Alb表达,表达阳性率为(9.8±2.7)%;培养14天、21天和28天,Alb表达阳性率分别为(25.4±5.2)%、(67.2±7.8)%和(83.4±7.9)%,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论:密度梯度离心和贴壁培养法相结合是一种较好的分离纯化HUMSCs的方法;肝衰竭患者血清可以诱导HUMSCs表达AFP和Alb。
- 赵文静刘淑荣王佳楠鞠红梅
- 关键词：脐血间充质干细胞甲胎蛋白白蛋白
