赵辉
- 作品数：13 被引量：45H指数：5
- 供职机构：安徽安科生物工程(集团)股份有限公司更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程医药卫生理学更多>>
- 高效液相色谱法测定重组人干扰素α-2b注射液中乙二胺四乙酸二钠含量被引量：4
- 2012年
- 目的：利用高效液相色谱（HPLC）法测定重组人干扰素α-2b注射液中EDTA二钠（乙二胺四乙酸二钠）的含量。方法：将EDTA二钠与氯化铁溶液于70℃水浴中反应20 min左右;色谱柱为SunFire C18（250 mm×4.6 mm,5μm,Waters）,流动相为5%甲醇＋95%0.64 g/L四丁基溴化铵和4.1 g/L三水合乙酸钠混合液,用冰乙酸调pH值至4.0,流速1 mL/min,检测波长254 nm。结果：该测定方法线性范围为0.025-0.5 g/L,线性关系良好（r=0.9997）,加样回收率为98.27%（n=9,RSD=2.55%）。结论：本方法准确、快速、可靠,可用于重组人干扰素α-2b注射液中EDTA二钠含量的测定。
- 李增礼周乐春赵辉储成风倪晓燕王荣海宋礼华
- 关键词：高效液相色谱NAFEEDTA
- HPLC法测定重组人干扰素α2b注射液中吐温80的含量被引量：7
- 2012年
- 目的采用HPLC法测定重组人干扰素α2b注射液中吐温80的含量。方法按设置的色谱条件对检测重组人干扰素α2b注射液中吐温80含量的HPLC方法进行专属性验证、系统适应性验证、线性范围测定、实验内重复性验证、日间重复性验证、最低检测限测定、准确性验证,并对3批重组人干扰素α2b注射液中吐温80的含量进行检测。结果该测定方法具有专属性;系统适应性良好;线性范围为0.031 25～2.5 mg/ml,R2=0.999 7,线性关系良好;实验内重复性,峰面积和浓度的RSD值分别为0.71%和0.56%;日间重复性,保留时间和峰面积的RSD值分别为0.47%和2.76%;最低检测限为10 mg/L;加样回收率分别为101.99%、99.96%和102.2%,RSD=1.16%;3批人干扰素α2b注射液中吐温80的相对含量分别为0.940、0.936和0.950 mg/ml,分别为标示量的94.0%、93.6%和95.0%。结论本方法准确、快速、可靠,可用于重组人干扰素α2b注射液中吐温80含量的测定。
- 赵辉李增礼周乐春储成风倪晓燕王荣海宋礼华
- 关键词：干扰素Α2B
- 重组人干扰素α-2b在大肠杆菌中分泌表达被引量：2
- 2011年
- 人干扰素α-2b原始基因在重组原核工程菌中表达量偏低,所以我们在不改变干扰素原有氨基酸组成的前提下,根据大肠杆菌密码子偏爱性使用定向突变技术对huIFNα-2b基因进行点突变。将大肠杆菌STⅡ信号肽基因与突变后huIFNα-2b基因融合并于信号肽5′端和huIFNα-2b基因3′端引入合适的酶切位点。融合基因克隆至载体pCSE,pET-22b和pPAK4L中,此3种载体分别含有组成型启动子、T7启动子和phoA启动子。融合基因在载体pCSE中表达量很低,其中约有50%的目标蛋白能够成功实现分泌。在E.coliBL21中,pET-22b经过IPTG诱导可以实现huIFNα-2b的高表达,但STⅡ信号肽不能被有效切除。含有phoA启动子的载体pPAK4L其在E.coliW3110中可以实现huIFNα-2b较高水平的分泌表达,经过低磷诱导其表达量最高可至20μg/mL(A550)菌液,约有30%的目标蛋白质信号肽能够被成功切除并分泌到胞间质中。
- 卢晨赵辉邹文艺范清林付永标宋礼华
- 关键词：人干扰素Α-2B分泌大肠杆菌
- 壳聚糖固定化酶一步纯化抑肽酶研究被引量：5
- 2000年
- 采用化学改性与修饰微珠壳聚糖为栽体,共价法偶联牛胰蛋白酶,制成抑肽酶亲和吸附剂,单位活力5190KIU/g(湿),蛋白偶联率605%,酶活性回收率55%;将其直接亲和层析牛肺提取液,分离纯化高比活抑肽酶。方法过程简单,样品比活力5700KIU/mg,质量稳定,成本较低;该吸附剂机械强度高,抗污染能力较强,非特异性吸附较小,可以反复使用,价格低廉,适合工业化生产。
- 宋扬侯司赵辉袁克文石华峰汪姗霖
- 关键词：固定化酶抑肽酶壳聚糖
- 化学改性与修饰壳聚糖固定化酶制备高比活抑肽酶新工艺被引量：6
- 1999年
- 目的 研究一步层析制备高比活抑肽酶新工艺。方法 将化学改性与修饰壳聚糖体，共价偶联配基牛胰蛋白酶，制成固定化酶为抑肽酶亲和吸附剂，直接对黄牛肺提取液一步层析纯化，再超滤脱盐、浓缩、去热原，冻干即抑肽酶。结果 抑肽酶比活５７００ｋｉｕ／ｍｇ，收率２２×１０＾４ｋｉｕ／ｋｇ（牛肺）；固定化酶单位活力２５９５０ｋｉｕ／ｇ（干）。酶活性回收率５５％，非特异性吸附较小，机械强度高，可反复使用。结论
- 宋扬赵辉侯司袁克文石华峰汪姗霖
- 关键词：固定化酶抑肽酶化学改性化学修饰
- 抗精子抗体检测试剂(MAR法)的研制和产业化
- 宋礼华徐振山陶仪声杜贤宇周业亭赵辉
- 该项目主要内容为研究工业化生产检测人体液(血清、精液和宫颈粘液)抗精子抗体的方法。MAR-test(Mixed Antiglobulin Reaction Test，混合抗球蛋白反应试验)是世界卫生组织(WHO)和美国生...
- 关键词：
- 关键词：抗体检测试剂抗体诊断试剂盒
- 直接从黄牛肺中制取高纯度抑肽酶的方法
- 一种直接从黄牛肺中制取高纯度抑肽酶的方法，它是将中国专利申请号为96120646.2的化学改性和修饰的壳多糖类活性载体与胰蛋白酶偶联制成壳多糖类固定化胰蛋白酶亲和吸附剂，然后对牛肺进行静态吸附和动态洗脱，制得的抑肽酶其比...
- 宋杨侯司汪姗霖赵辉陶沪蓉石华峰
- 文献传递
- 改性与修饰壳聚糖固定化酶纯化抑肽酶研究
- 彩化学改性与修饰微珠壳聚糖为载体，共价法偶联牛胰蛋白酶，制成抑肽酶新和吸附剂，单位活力5190KIU/g（湿），蛋白偶联率60.5℅，酶活性回收率55℅;将其直接按亲和层析牛肺提取液，分离纯化高比活抑肽酶，方法过程简单，...
- 宋扬侯司赵辉王荣海吴中华
- 关键词：固定化酶抑肽酶壳聚糖
- 文献传递
- 直接从黄牛肺中制取高纯度抑肽酶的方法
- 一种直接从黄牛肺中制取高纯度抑肽酶的方法，它是将中国专利申请号为96120646.2的化学改性和修饰的壳多糖类活性载体与胰蛋白酶偶联制成壳多糖类固定化胰蛋白酶亲和吸附剂，然后对牛肺进行静态吸附和动态洗脱，制得的抑肽酶其比...
- 宋杨侯司汪姗霖赵辉陶沪蓉石华峰
- 文献传递
- 化学改性和修饰的壳多糖类活性载体
- 一种化学改性和修饰的壳多糖类活性载体，它是由每一个单分子葡萄糖结构上只有一个乙酰氨基或氨基的壳多糖类用甲醛，表氯醇和氨进行化学改性和修饰，然后再用戊二醛进行活化，成为每一个单分子葡萄糖结构上具有四个活性氨基的化学改性和修...
- 宋杨侯司汪姗霖赵辉陶沪蓉王士珍
- 文献传递
