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一种高效表达小干扰RNA载体的构建研究被引量：2: 2007年; 目的:用mir30前体骨架来构建高效表达小干扰RNA载体。方法:通过基因合成的方法,将mir30前体骨架进行全长基因合成,并在合成的mir30前体骨架中引入合适的酶切位点用于外源发夹DNA的克隆,然后将之克隆到含U6启动子的表达载体中。将针对绿色荧光蛋白(greenfluo-rescent protein,GFP)的小干扰RNA克隆到以上表达载体中,通过转染及Western blot来检测新的小干扰RNA表达载体的基因沉默效率。结果:同目前常用的含polIII的小干扰RNA表达载体相比较,用mir30前体骨架表达针对GFP的小干扰RNA的表达载体可以明显抑制GFP的表达。结论:用mir30前体骨架构建的小干扰RNA表达载体可高效表达外源小干扰RNA。; 李慧瑾郑晓晶张伟锋边晔王东阳赵俊丽夏海滨; 关键词：小干扰RNA 基因沉默微小RNA

小干扰RNA快速筛选的载体及其构建方法和应用: 一种小干扰RNA快速筛选的载体，小干扰RNA快速筛选载体具有一个3.0kb的骨架载体并含有一个多克隆位点，在载体5’端的多克隆位点处存在报告基因及用于插入一个筛选靶基因表达元件的多克隆位点，其下游存在两个相反方向的任意两...; 夏海滨边晔王东阳孙晓聪冯真真李婧郑晓晶; 文献传递

人canstatin基因重组腺病毒载体的构建及其病毒制备被引量：3: 2008年; 目的：利用HEK293细胞内同源重组法构建带有绿色荧光蛋白报告基因的人血管能抑素（canstatin）重组腺病毒载体,扩增并纯化重组腺病毒颗粒.方法：PCR法扩增canstatin全长基因,克隆至pGEM-T载体,经酶切和测序证实后,亚克隆到穿梭质粒pAd5-CMV中,获得穿梭质粒pAd5-CMV/canstatin.用PacI酶单独酶切穿梭质粒pAd5-CMV/canstatin和腺病毒E3区带有绿色荧光蛋白表达元件的腺病毒骨架载体,采用标准的磷酸钙方法共转染HEK293细胞.7~10d后收获细胞裂解物,在HEK293细胞中扩增,病毒颗粒经氯化铯密度梯度离心纯化后,分光光度计检测重组病毒滴度.结果：测序证实pEGM-T/canstatin基因片段与GenBank公布的can-statin基因序列一致.重组腺病毒质粒转染293细胞后24h观察到绿色荧光,病毒纯化后制备出高滴度重组腺病毒（病毒滴度为2.0×1015pt/L）.结论：成功构建了表达canstatin基因的重组腺病毒载体并制备了重组腺病毒颗粒,为研究该基因在肿瘤治疗中的作用奠定了基础.; 齐宗利李慧瑾王东阳赵俊丽边晔冯真真蒋羽清郑晓晶夏海滨; 关键词：腺病毒载体血管能抑素绿色荧光蛋白质类

邓小平“摸论”的辩证法启示: 2008年; 邓小平的“摸论”，即“摸着石头过河”的理论是邓小平在改革开放之初提出的重要思想。邓小平的这种思想既来源于他的智慧，更来源于他的经验。简朴的一句话，既体现了马克思主义的基本原理，也反映了中国改革开放之初的实际情况。客观地讲，当改革开放的帷幕刚刚拉开的时候。百废待兴，万物萧条，许多事情都等着我们去探索和解决。; 边晔; 关键词：邓小平辩证法马克思主义

腺病毒载体衣壳蛋白质的遗传修饰被引量：1: 2010年; 腺病毒载体是最早用于基因治疗研究的病毒载体之一,也是目前肿瘤基因治疗中最为常见的病毒载体之一,其主要通过靶细胞表面的天然柯萨奇腺病毒受体(coxsackie and adenovirus receptor,CAR)感染宿主细胞。由于大多数肿瘤细胞表面该受体表达水平较低,降低了腺病毒载体对靶细胞的感染效率,从而制约了腺病毒载体在肿瘤基因治疗中的应用。因此,如何提高腺病毒载体对靶细胞的感染效率是腺病毒载体应用于肿瘤基因治疗的关键。目前对腺病毒载体衣壳蛋白质(capsid protein)的遗传修饰是提高其对宿主细胞感染效率的主要途径。本文将对这一领域的主要研究进展作一综述,为该方面的研究提供有用的信息。; 边晔冯飞雪夏海滨; 关键词：腺病毒载体遗传修饰肿瘤基因治疗

RGD修饰携带tumstatin及eGFP新型腺病毒载体的构建及其表达研究: 2010年; 目的构建RGD修饰表达绿色荧光蛋白（eGFP）和肿瘤抑素（tumstatin）的新型腺病毒载体。方法PCR扩增tttrnstatin基因，经克隆后构建pAd5CMV／tumstatin穿梭载体。重叠PCR方法将RGD序列插入到Ad5纤维蛋白的HI环中，获得pMfiber-RGD穿梭载体。穿梭载体与腺病毒骨架载体线性化后共转化EcoliBJ5183，构建pAd-RGD-eGFP骨架载体。最后，使用磷酸钙法将pAd5-CMV／tumstatin穿梭载体和pAd-RGD-eGFP骨架载体共转化HEK293细胞。7-10d后收集细胞裂解物得到Ad—RGD-tumstatin／eGFP病毒。将经过修饰的Ad-RGD-tumstatin／eGFP和未修饰的Ad—WT-tumstatin／eGFP病毒分别感染脑胶质瘤U87MG细胞（病毒剂量分别为1、10、100Vp／细胞），通过观察其荧光强度评估其感染效率。以上两种病毒分别感染HeLa细胞，并分别采用RT-PCR及Western blotting检测tumstatin细胞mRNA及培养上清中蛋白的表达水平。结果病毒感染48h后，可观察到修饰后的腺病毒Ad-RGD-tumstatin／eGFP对U87MG细胞的感染效率明显高于未修饰的腺病毒斛WT-tumstatin／eOFP。RT-PCR及Western blotting可检测到感染Ad-RGD-tumstatin／eGFP后的HeLa细胞中tumstatin的转录和表达。结论成功构建经RGD修饰并表达tumstatin和eGFP基因的新型腺病毒载体，为进一步研究turnstatin在低表达柯萨奇一腺病毒受体的肿瘤中的作用奠定了良好基础。; 齐宗利王东阳边晔赵俊丽孙晓聪夏海滨; 关键词：RGD 腺病毒科肿瘤抑素

文化生产力探析: 随着人类社会的发展,文化的作用越来越凸显出来。文化生产力的理论正是在全球新经济大发展的背景下,人类文明发展到今天的必然产物。中国的改革开放不仅带来了中国政治、经济的巨大变动,而且带来了中国文化形态文化建设的巨大变动。中国...; 边晔; 关键词：文化生产力文化生产力; 文献传递

小干扰RNA快速筛选的载体及其构建方法和应用: 一种小干扰RNA快速筛选的载体，小干扰RNA快速筛选载体具有一个3.0kb的骨架载体并含有一个多克隆位点，在载体5’端的多克隆位点处存在报告基因及用于插入一个筛选靶基因表达元件的多克隆位点，其下游存在两个相反方向的任意两...; 夏海滨郑晓晶王东阳边晔孙晓聪冯真真李婧; 文献传递

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边晔

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