邱义兰 作品数:62 被引量:232 H指数:10 供职机构: 湖南师范大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖南省自然科学基金 湖南省科技计划项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
EBV包膜糖蛋白gp350抗原表位及其单克隆抗体 本发明涉及一种EBV包膜糖蛋白gp350抗原表位及其单克隆抗体。其中所述抗原表位的氨基酸序列为如SEQ ID NO:12所示。所述的单克隆抗体包含重链可变区的VHCDR1‑3和轻链可变区的VLCDR1‑3,其中所述VHC... 刘如石 邱义兰文献传递 莴苣大孢子发生过程中钙的分布动态 被引量:6 2005年 莴苣胚囊发育为蓼型,减数分裂形成的4个大孢子中只有合点端的一个大孢子可继续发育,其余3个大孢子从珠孔端依次退化。大孢子母细胞中的钙沉淀颗粒很少,减数分裂后的四分体中的钙沉淀颗粒稍有增加。以后,4个大孢子中的钙沉淀颗粒在数量上有明显差异:即将退化的大孢子中钙明显减少,而未退化大孢子细胞质中则保持有较多的细小钙沉淀颗粒。大孢子的退化是一种细胞程序死亡现象,细胞中的钙浓度降低时可能启动了大孢子细胞的程序性死亡过程,而细胞中的钙浓度高时则保持大孢子细胞的继续发育。文章首次揭示了大孢子发生过程中钙的分布特征。 邱义兰 刘如石 谢潮添 杨延红 葛丽丽 田惠桥关键词:莴苣 大孢子 大孢子发生 钙 毕赤酵母发酵生产颗粒性乙肝表面抗原的条件优化(英文) 被引量:2 2008年 乙型肝炎病毒的流行对人们的生命健康造成了极大的威胁,而有效准确的诊断和预防性疫苗是阻止其流行的主要手段,乙肝表面抗原是诊断试剂和疫苗的主要成分。本试验在构建稳定表达HBsAg的毕赤酵母菌株后,对其发酵条件进行了研究。采用摇瓶分批培养方法,探讨了不同培养基、溶解氧、诱导物甲醇的浓度以及pH值等因素对菌体生长与重组蛋白表达的影响。在10L发酵罐上采用分批补料培养的方法研究了进行扩大培养生产重组HBsAg。结果表明,FBS无机盐合成培养基是理想的工业发酵培养基,溶解氧对菌体的生长与表达有显著的影响,甲醇诱导最佳终浓度为1%(V/V),发酵的最适pH值为5.4~6.0。发酵罐放大培养后,ELISA和SDS—PAGE分析表明重组HBsAg获得了高效表达,最终菌体生物量达到310 OD600,表达量达到27mg/L。电子显微镜观察表达重组乙肝抗原可以自组装为22nm类病毒颗粒,为HBV的新一代早期血清学诊断和疫苗的大规模生产提供了一定的参考。 刘如石 林亲录 孙意 邱义兰 徐甜 丁海 郭向荣关键词:发酵参数 毕赤酵母 重组乙肝表面抗原 Asp.niger No.3液态发酵生产单宁酶条件的研究 被引量:13 2001年 研究不同碳源、氮源种类和比例及不同起始pH值等因素对黑曲霉生产单宁酶的影响;并考察了豆粕+NH4NO3分别与单宁、K2HPO4的交互作用。结果表明:不同碳源、氮源种类和比例、不同起始pH值等因素对黑曲霉生产单宁酶的影响较大,单宁1.25,小麦粉0.35,豆粕0.67%,NH4NO3 0.05%,K2HPO4 0.035,pH6.0为产酶的适宜条件,最高酶活达到144. 25U/100ml发酵液,酶比活为17.71。豆粕+NH4NO3、单宁、小麦粉对产酶有极显著影响;豆粕+NH4NO3与K2HPO4的交互作用极显著,与单宁的交互作用显著。本文还探索了菌丝生长与产酶的关系,结果表明:黑曲霉产单宁酶属于生长偶联型。 刘如石 李清明 谢达平 邱义兰关键词:单宁酶 液态发酵 菌丝生长 产酶 莴苣花药发育过程中钙的分布特征 被引量:8 2005年 减数分裂前,莴苣花药中的钙颗粒很少。减数分裂后,花药绒毡层细胞中的钙颗粒明显增加, 同时在花药药室基质中也出现许多细小的钙颗粒。刚从四分体中释放出的小孢子内钙颗粒很少,伴随着花粉外壁物质在小孢子表面的沉积,钙颗粒开始积累在花粉壁部位。随后,小孢子中开始出现钙颗粒。当小孢子开始形成液泡后,钙颗粒向其中聚集,伴随着小液泡融合成大液泡,体积较大的钙颗粒主要集中在液泡中,而细胞质基质中的钙颗粒很少。随着二胞花粉中的大液泡消失,花粉细胞质中的钙颗粒变得很少。在以后的发育中,只有花粉壁中积累较多的钙颗粒。在莴苣花药发育过程中,钙与绒毡层细胞的退化和小孢子液泡形成以及二胞花粉中大波泡的消失有关。而花粉外壁表面积累丰富的钙与以后花粉的萌发有关。 邱义兰 刘如石 谢潮添 杨延红 徐青 田惠桥关键词:莴苣 花药 花粉 钙 发育过程 花粉外壁 减数分裂 白菜核雄性不育系可育和不育花药中Ca^(2+)的分布 被引量:18 2005年 研究了白菜(Brassica campestris L. ssp. chinensisMakino)细胞核雄性不育系花药中 Ca2+的分布特征。在可育花药发育过程中,减数分裂后花药壁细胞中钙颗粒明显增加。早期小孢子开始积累钙颗粒并特异性地附在小液泡膜上。小孢子分裂后,大液泡消失过程中又伴随着许多钙颗粒附在小液泡膜上,显示出Ca2+与花粉中液泡的形成和分解有关。在不育花药中,最早出现的钙颗粒异常分布是在小孢子母细胞的胼胝质壁中积累了较多的钙颗粒。然而,在小孢子细胞质中钙颗粒一直很少,也不形成大液泡,最后通过细胞质收缩的方式败育。这是首次发现Ca2+参与调控花药发育过程,其异常分布与花粉败育密切相关。 谢潮添 杨延红 邱义兰 葛丽丽 田惠桥关键词:白菜 花药 雄性不育 CA^2+ 人β-actin蛋白原核表达及其单克隆抗体制备 2012年 为获得分泌抗人β-actin蛋白单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞,通过在大肠杆菌中原核表达人β-actin蛋白,以纯化的人β-actin蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠。经过细胞的融合及筛选获得1株能稳定分泌抗人β-actin蛋白McAb的杂交瘤细胞,命名为2B4。采用间接ELISA和Western blot方法对McAb的特异性、稳定性和适用范围进行鉴定。结果显示:蛋白的相对分子质量为43 kDa,可溶于8 mol/L尿素;杂交瘤细胞上清的抗体效价为1×105,腹水的抗体效价为1×107;间接ELISA结果表明,杂交瘤细胞在体外传20代或液氮冻存3个月后,分泌的抗体效价不变;37℃保存24 h后,抗体的效价开始下降。Western blot结果显示,单克隆抗体识别人、鼠、兔和鱼的β-actin蛋白,与其发生特异性反应。2B4分泌的单克隆抗体可以广泛的应用于细胞生物学和免疫学试验,具有良好的应用价值。 吴俊文 许凤 熊璎珞 鲁健 邱义兰 刘胜姿 李烨 刘如石关键词:原核表达 电洗脱 单克隆抗体 Β-ACTIN 生菜矿质养分特性的品种差异比较研究 被引量:8 2005年 为了探明生菜不同品种类型之间的矿质养分特性差异,本实验采用深水栽培方式,比较研究了玻璃生菜、油麦菜和意大利生菜3个品种在不同生长时期地上部Fe、Zn、Ca含量的差异,以及根际缺氧处理对3个品种地上部Fe、Zn、Ca含量的影响.结果表明,随着植株的生长,3个品种地上部的Fe、Zn、Ca含量均呈上升趋势,到出苗后50d达到最高水平,随后稍有下降.3个品种地上部3种矿质养分含量由高到低的顺序依次是:意大利生菜、玻璃生菜、油麦菜.但3个品种地上部的生长速率的大小顺序却相反.根际缺氧处理(以正常通气栽培植株作对照)均使3个品种地上部的Fe、Zn、Ca含量下降,其中意大利生菜所受的影响最大,其地上部的Fe、Zn、Ca含量分别比对照降低18.04%、12.70%、17.56%;油麦菜的影响最小,其地上部Fe、Zn、Ca含量的降低率不及意大利生菜的一半;玻璃生菜地上部Fe、Ca含量受影响比较大,分别比对照降低10.54%和14.79%,但Zn含量的影响比较小. 刘如石 邱义兰 黎建文 彭克勤关键词:生菜 铁 锌 钙 水稻斑马叶性状表达条件研究 2010年 以水稻斑马叶突变体B411为材料,对剪根尖处理的秧苗和未移栽的对照进行不同光强、光周期、光周期数和温度处理,研究了斑马叶性状的表达条件。结果表明:大于300μmol.m-2.s-1光强和剪根是诱导B411斑马叶性状表达的必要条件。在光强1 000μmol.m-2.s-1,光照期温度32℃和暗期温度22℃的条件下,诱导斑马叶性状表达的临界光长为3 h。在光周期为12 h/12h的条件下,诱导斑马叶性状表达的最少光周期数为2个。在强光照条件下,温度越高黄色横纹失绿程度越明显。遗传分析表明,B411斑马叶性状符合一对隐性基因控制的性状。 李红 谢刚 邱义兰 梁满中 陈良碧关键词:光照 剪根 监测活细胞中诱导激活的Rac、Cdc42信号转导通路的FRET单分子探针 被引量:3 2008年 Rho家族鸟苷三磷酸酶,包括Rac1和Cdc42等,参与调节细胞形态、细胞迁移、转录激活和基因表达等一系列细胞过程。根据FRET(Fluorescent resonance energy transfer)技术原理,构建了包含红色荧光蛋白dsRed1与青色荧光蛋白ECFP的全长cDNA,效应分子Pak1或N-WASP的GTP酶联结区域,信号分子Rac1或Cdc42的全长cDNA的几种单分子探针。转染NIH3T3或Hela细胞,以胰岛素、缓激肽为诱导剂,分别激活Rac1、Cdc42信号转导通路。离体荧光光谱检测表明,在两种转染动物细胞中均产生了FRET现象。不同信号转导通路的FRET效率,在诱导激活5min后,均达到最高值,但增加幅度有显著差异。随着诱导时间的延长,FRET效率下降,但下降速率在不同信号转导通路间差异显著。Rac1、Cdc42激活试验证实,诱导激活的转染细胞中,Rac1、Cdc42均处于激活状态(GTP-bound),其在不同诱导时间的相对激活程度与FRET效率表现相同。诱导激活的Rac1、Cdc42信号转导通路,分别导致了转染活细胞中片状伪足、线状伪足的产生。这表明,采用这些单分子探针,可直接监测激活的信号转导通路,在活细胞中的3D时空分布变化图像及其产生的细胞学效应。采用这些单分子探针,分析、判断了一些调节蛋白对Rac1、Cdc42的GEF或GAP特性,从而提供一种可大大简化现有的鉴定待测蛋白分子的方法。 孙斌 任道全 张青岩 邱义兰 刘如石 郭向荣关键词:FRET RAC1 CDC42