郑美娟
- 作品数：31 被引量：238H指数：9
- 供职机构：安徽医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划安徽高校省级自然科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 慢性乙型肝炎患者外周血NKG2A+NK细胞与Treg的关系研究被引量：6
- 2016年
- 目的:探讨慢性乙型肝炎病毒(CHB)患者外周血NKG2A+NK细胞与调节性T细胞(Treg)的关系及临床意义。方法:收集46例CHB患者和17例健康对照者外周血,采用实时荧光定量PCR法检测血清HBV DNA;采用流式细胞术检测NKG2A+NK细胞及Treg的比例。结果:将CHB患者分为Low HBV DNA组(300~10~4U/ml)及High HBV DNA组(10~5~10~8U/ml)。我们发现High HBV DNA组ALT明显高于Low HBV DNA组(P<0.05)。High HBV DNA组CD56^(dim)NK细胞及NKG2A+CD56^(dim)NK细胞的比例均分别明显高于Low HBV DNA组(P<0.05)。且High HBV DNA组Treg明显高于Low HBV DNA组和对照组(P<0.05)。此外,NKG2A+CD56^(dim)NK细胞的比例与High HBV DNA载量及Treg水平均呈正相关性(r=0.59,P<0.05;r=0.53,P<0.05)。结论:CHB患者的NKG2A+CD56^(dim) NK细胞的水平与HBV的免疫逃逸及疾病的进展相关。
- 郑美娟秦义组张敏张振华徐元宏
- 关键词：慢性乙型肝炎NK细胞NKG2A调节性T细胞
- 髓过氧化物酶抗体相关性血管炎患者外周血中性粒细胞胞内髓过氧化物酶表达及其意义
- 2022年
- 目的初步探讨髓过氧化物酶(MPO)抗体相关性血管炎(AAV)患者外周血中性粒细胞胞内MPO表达及其临床意义。方法选2018年7月至2021年6月安徽医科大学第一附属医院住院的初诊未治的MPO-AAV患者36例(MPO-AAV组), 另选年龄、性别与MPO-AAV组匹配的健康志愿者36例(健康对照组)。流式细胞术(FCM)和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)分别检测所有受试者中性粒细胞胞内MPO水平和MPO mRNA表达。酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测所有受试者外周血MPO、补体C5活化片段a(C5a)水平及MPO-AAV组患者MPO-ANCA。采用修订的伯明翰血管炎活动度评分(BVAS-V3)对MPO-AAV组患者的疾病活动度进行评估。结果与健康对照组比, MPO-AAV组中性粒细胞胞内MPO mRNA表达水平、血清MPO和血清补体C5a水平显著升高[MPO mRNA:30.2±11.5 比 1.9±0.6, P<0.001;MPO:(112.0±68.7)IU/L比(87.4±22.9)IU/L, P=0.01;补体C5a:(187.3±90.3)ng/ml比(107.3±31.1)ng/ml, P<0.001], 而中性粒细胞胞内MPO水平显著降低(平均荧光强度1 343.3±723.4比2 868.0±1 136.5, P<0.001)。相关分析结果显示, 中性粒细胞胞内MPO mRNA表达水平与MPO-ANCA阳性、血清MPO水平呈正相关(r=0.537, P=0.001;r=0.358, P=0.032), 多元线性回归分析显示, 中性粒细胞胞内MPO mRNA表达水平与MPO-ANCA阳性呈正相关(β=0.695, P=0.006);中性粒细胞胞内MPO水平与MPO-ANCA阳性、血清MPO、血清补体C5a水平呈负相关(r=-0.335, P=0.046;r=-0.372, P=0.026;r=-0.577, P<0.001), 多元线性回归分析显示, 中性粒细胞胞内MPO水平与血清补体C5a水平呈负相关(β=-0.374, P=0.043);BVAS-V3与中性粒细胞胞内MPO mRNA、MPO-ANCA阳性、血清MPO、血清补体C5a呈正相关(r=0.598, P<0.001;r=0.599, P<0.001;r=0.537, P=0.001;r=0.415, P=0.012), 与中性粒细胞胞内MPO水平呈负相关(r=-0.342, P=0.041), 多元线性回归分析显示, BVAS-V3与中性粒细胞胞内MPO mRNA表达水平呈正相关(β=0.511, P=0.002)。结论 MPO-AAV中性粒细�
- 刘悦彭新晨徐俊楠郑美娟帅宗文
- 关键词：抗中性粒细胞胞质抗体抗髓过氧化物酶抗体髓过氧化物酶血管炎
- 日本血吸虫谷胱甘肽-S-转移酶在虫卵阶段的定位被引量：19
- 2007年
- 目的探讨谷胱甘肽-S-转移酶(Sj26GST)在虫卵阶段的表达、定位和重组蛋白(rSj26GST)的免疫诊断价值。方法从感染日本血吸虫尾蚴6周的兔肝脏中分离虫卵,分别用RT-PCR和免疫印迹(Western blotting)法检测Sj26GST基因在虫卵阶段的转录和翻译;同时用兔肝做免疫组化观察Sj26GST在虫卵内的分布。利用纯化的rSj26GST和日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA),采用间接ELISA法检测急、慢性血吸虫病患者和正常人血清。结果RT-PCR从血吸虫虫卵中扩增670bp的基因片断,Western blotting证明在虫卵阶段Sj26GST的表达;同时免疫组化显示Sj26GST主要分布在虫卵内毛蚴两边的侧腺。rSj26GST检测急、慢性血吸虫病患者和正常人血清的阳性率分别为92%、80%和0;用SEA检测以上标本,阳性率分别为96%、84%和2%。结论Sj26GST是SEA的主要组分之一,能刺激机体产生高滴度的抗体;rSj26GST为抗原诊断日本血吸虫病显示出高度的敏感性和特异性,具有实用价值。
- 王志成徐元宏汪学龙李敏罗飞郑美娟罗庆礼沈继龙
- 关键词：血吸虫
- 抗中性粒细胞胞质-髓过氧化物酶抗体相关性血管炎肽酰基精氨酸脱亚胺酶4表达的变化及临床意义被引量：4
- 2020年
- 目的初步探讨抗中性粒细胞胞质髓过氧化物酶抗体相关性血管炎(MPO-AAV)患者中性粒细胞肽酰基精氨酸脱亚胺酶4(PAD4)表达的变化及临床意义。方法选择39例初诊未治的MPO-AAV患者为病例组,记录患者伯明翰血管炎活动度积分(BVAS),选择39名健康志愿者为对照组。采用流式细胞术检测2组受试者外周血中性粒细胞PAD4的表达水平,ELISA法检测外周血中性粒细胞胞外陷阱(NETs)、补体C5活化片段a(C5a)及抗中性粒细胞胞质髓过氧化物酶抗体(MPO-ANCA)水平。采用t检验比较2组间PAD4、C5a及NETs水平差异,采用Spearman相关分析和多元线性回归分析病例组内各检测指标与BVAS间关系。结果病例组表达PAD4中性粒细胞比例及PAD4表达的平均荧光强度(MIF)均显著高于对照组[分别为(71±11)%与(26±6)%,t=22.456,P<0.01;(33±4)与(14±4),t=18.668,P<0.01]病例组NETs和C5a水平均高于对照组[分别为(0.62±0.22)与(0.26±0.15),t=8.466,P<0.01;(4.6±1.0)ng/ml与(2.9±1.0)ng/ml,t=7.697,P<0.01]。相关分析结果显示病例组BVAS分别与表达PAD4的中性粒细胞百分比、PAD4的MFI、NETs、C5a和MPO-ANCA呈正相关(分别为r=0.843,P<0.01;r=0.821,P<0.01;r=0.4111,P<0.01;r=0.613,P<0.01;r=0.790,P<0.01)。多元线性回归分析显示表达PAD4中性粒细胞百分比和MPO-ANCA水平分别是BVAS的独立影响因素(分别为β=0.325,t=5.889,P<0.01;β=0.796,t=4.298,P<0.01)。结论活动期MPO-AAV患者外周血中性粒细胞PDA4表达水平显著增强,且是影响MPO-AAV疾病活动度的独立因素,干预中性粒细胞PAD4的表达可能是MPO-AAV治疗的潜在新靶点。
- 庞博文王森何倩郑美娟张铭明帅宗文
- 关键词：补体C5A
- 日本血吸虫信号蛋白14-3-3在虫卵的定位及其免疫诊断价值初探被引量：23
- 2007年
- 目的探讨日本血吸虫信号蛋白14-3-3(Sj14-3-3)在虫卵内的定位和重组Sj14-3-3(rSj14-3-3)的免疫诊断价值。方法从日本血吸虫尾蚴感染42 d的兔肝脏中分离虫卵,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Sj14-3-3基因在虫卵期的转录水平;兔肝组织石蜡切片免疫组化染色,观察内源性Sj14-3-3在虫卵内的分布和表达丰度。利用纯化的rSj14-3-3和可溶性虫卵抗原(SEA),采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测急、慢性血吸虫病患者和正常人血清。结果RT-PCR从日本血吸虫成熟虫卵中检出760 bp左右的基因片断;免疫组化显示Sj14-3-3主要分布在虫卵内毛蚴的体壁和两边的侧腺。检测急性、慢性患者和正常人血清抗rSj14-3-3抗原的抗体阳性率分别为91.0%、78.9%、0.0%;上述标本中抗SEA抗体的阳性率分别为97.4%、88.9%和2.5%。结论用ELISA检测抗SEA抗体和rSj14-3-3抗体诊断血吸虫病具有高度的特异性和敏感性,而Sj14-3-3在成熟虫卵阶段高表达,可能是SEA的主要组分,具有实用价值。
- 王志成徐元宏罗飞李敏郑美娟罗庆礼沈继龙
- 关键词：日本血吸虫虫卵免疫诊断
- miRNA-143对人鼻咽癌细胞CNE-2Z增殖、迁移和侵袭的影响被引量：6
- 2017年
- 目的探讨miRNA-143对鼻咽癌细胞CNE-2Z增殖、迁移和侵袭的影响。方法利用荧光定量PCR检测人永生化鼻咽上皮细胞(NP69)、高分化鼻咽癌细胞(CNE-1)、低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)中miRNA-143的表达水平。利用感染慢病毒的方式建立稳定过表达miRNA-143的CNE-2Z细胞,并用荧光定量PCR法进行检测。通过CCK-8法检测过表达miRNA-143对CNE-2Z细胞增殖的影响,通过Transwell迁移和侵袭试验分析过表达miRNA-143对CNE-2Z细胞迁移和侵袭的影响。结果低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)中miRNA-143的表达水平显著低于CNE-1和NP69细胞(P<0.01)。稳定过表达miRNA-143的CNE-2Z细胞(CNE-2Z/miR-143)中miRNA-143的表达水平显著高于CNE-2Z细胞(P<0.01)和慢病毒对照组细胞(CNE-2Z/miR-NC)(P<0.01)。细胞增殖能力检测显示,与CNE-2Z组和CNE-2Z/miR-NC组相比,CNE-2Z/miR-143组在72 h和96 h时细胞活力显著降低(P<0.05,P<0.01)。Transwell迁移和侵袭试验结果显示,CNE-2Z/miR-143组与CNE-2Z组和CNE-2Z/miR-NC组相比细胞迁移和侵袭能力显著下降(P<0.01)。结论 miR-143能够抑制鼻咽癌细胞CNE-2Z的增殖、迁移和侵袭能力,提示其可能对鼻咽癌的诊断、治疗及预后评价有重要意义。
- 张欣郑美娟徐元宏
- 关键词：鼻咽癌MIR-143CNE-2Z细胞
- 乙型肝炎病毒外膜大蛋白、DNA、前S1抗原检测用于评价乙型肝炎病毒复制状况的对比分析被引量：9
- 2017年
- 目的 对比分析乙型肝炎病毒外膜大蛋白（HBV-LP）、乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）和前S1抗原（Pre S1-Ag）评价慢性乙型肝炎（CHB）患者血清中乙型肝炎病毒复制状况的有效性.方法 收集2013年6月至2015年3月在合肥某医院就诊的482例CHB患者的血清标本,采用ELISA法检测HBV-LP、乙型肝炎病毒标志物（HBV-M）和Pre S1-Ag;实时荧光定量PCR检测HBV-DNA.比较HBV-DNA、HBV-LP、Pre S1-Ag阳性率的差异,采用Spearman秩相关分析HBV-DNA拷贝数的对数值和HBV-LP的吸光度值相关性.结果 482例CHB患者HBV-DNA、HBV-LP和Pre S1-Ag阳性率分别为67.22%（324/482）、73.86%（356/482）和37.34%（180/482）（P〈0.01）;339例HBeAg阴性CHB患者的3项指标阳性率分别为54.57%（185/339）、64.90%（220/339）和27.73%（94/339）（P〈0.01）.在HBeAg阴性患者中,185例为HBV-DNA阳性,HBV-LP阳性率为90.81%（168/185）,高于Pre S1-Ag[39.46%（73/185）]（P〈0.01）;154例患者HBV-DNA阴性,其HBV-LP阳性率为33.77%（52/154）,也高于Pre S1-Ag的13.64%（21/154）（P〈0.01）.HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性患者HBV-DNA、HBV-LP、Pre S1-Ag阳性率分别为97.04%（131/135）、94.81%（128/135）和60.00%（81/135）（P〈0.01）;HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性患者3项指标阳性率分别为53.74%（122/227）、63.88%（145/227）和27.31%（62/227）（P〈0.01）;HBsAg、HBcAb阳性患者3项指标的阳性率分别为55.79%（53/95）、67.37%（64/95）和28.42%（27/95）（P〈0.01）.HBV-LP的吸光度值随着HBV-DNA拷贝数的对数值增加而呈上升趋势（Spearman秩相关系数=0.908,P〈0.01）.结论 HBV-LP与HBV-DNA载量对数值之间的相关性良好,可作为HBV-DNA和HBV-M检测的有效补充,较Pre S1-Ag更能反映CHB患者的病毒复制状态.
- 夏芳徐元宏郑美娟汪学龙
- 关键词：肝炎病毒乙型DNA大蛋白前S1抗原
- 肺结节患者焦虑抑郁与Th17/Treg和炎症水平改变的相关性研究被引量：27
- 2020年
- 背景与目的肺癌的发病率逐年攀升,人们在体检时尤其注重对肺进行检查,得益于低剂量计算机断层扫描技术的普及,不仅肺癌能够得到早期诊断,很多肺结节也在体检时被发现,并成为当下不可忽视的重要健康问题。肺结节患者极易出现焦虑、抑郁等不良情绪,研究表明情绪障碍患者存在机体免疫功能失调和炎症水平变化,本研究旨在探讨肺结节患者焦虑抑郁与Th17/Treg和炎症水平改变的相关性。方法纳入2019年4月-2019年7月就诊于安徽医科大学第一附属医院门诊受试者共143例,采用贝克焦虑量表(Beck Anxiety Inventory,BAI)、贝克抑郁量表第二版(Beck Depression Inventory-Ⅱ,BDI-Ⅱ)进行评估。其中健康对照(healthy control,HC)组40例;肺结节患者103例,依据量表评分分为焦虑和(或)抑郁(anxiety and/or depression,AD)组41例和无焦虑抑郁(non-anxiety and non-depression,NAD)组62例。检测外周血辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)、调节T细胞(regulatory T cells,Tregs)百分比,计算Th17细胞绝对值;检测血清炎症因子,并分析组间差异及相关性。结果三组间Th17细胞百分比、Th17细胞绝对数、Th17/Treg、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平的差异有统计学意义(均P<0.001),AD组高于HC组和NAD组(均P<0.05),HC组和NAD组间差异无统计学意义(均P>0.05)。以上指标与焦虑、抑郁的严重程度无显著相关性(P>0.05)。Tregs百分比、IL-4、IL-10水平在各组间差异无统计学意义(均P>0.05)。女性肺结节患者焦虑和(或)抑郁比例高于男性(P<0.05)。结论肺结节患者易出现不同程度的焦虑、抑郁的情绪变化,进而导致机体出现免疫功能失调和低级别炎症。
- 王丽娜韦媛媛胡华青张晓雨郑美娟费广鹤
- 关键词：肺结节焦虑抑郁免疫细胞炎症
- 新型布尼亚病毒感染患者凝血功能异常及其临床意义被引量：3
- 2022年
- 目的探讨新型布尼亚病毒感染后患者发热伴血小板减少症状(SFTS)发病期和恢复期的凝血和血栓相关指标及其临床意义。方法选择2020年4月12日至8月12日在安徽医科大学第一附属医院收治的新型布尼亚病毒感染后SFTS患者,其中SFTS发病期36例,SFTS恢复期18例,并招募36名健康人作为健康对照组,采集血浆标本。回顾性分析血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原含量(FIB)、血浆凝血酶时间(TT)、抗凝血酶-Ⅲ(AT-Ⅲ)、纤维蛋白降解产物(FDP)、D-二聚体(D-D)、血栓调节蛋白(TM)、凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)、纤溶酶-α2纤溶酶抑制物复合物(PIC)、组织型纤溶酶原激活剂-抑制剂1复合物(t-PAIC)浓度。统计比较3组间上述指标的差异。结果与健康对照组比较,SFTS发病组PT[12.5(12.1,13.6)s比10.8(10.5,11.5)s,P<0.05]较长,但仍在正常参考值范围内(14.0~21.0 s);APTT[49.1(42.0,58.2)s比28.5(26.6,30.4)s,P<0.05]较长;FDP[6.07(2.67,8.64)μg/ml比1.00(0.80,1.87)μg/ml]和D-D[2.27(1.04,2.98)μg/ml比0.30(0.21,0.47)μg/ml]较高(P均<0.001);血浆TAT[16.05(8.05,26.58)ng/ml比3.55(2.60,4.85)ng/ml]和PIC浓度[4.44(2.52,5.54)μg/ml比0.84(0.60,1.35)μg/ml]较高(P均<0.001);TM[(19.41±8.29)TU/ml比(9.33±1.89)TU/ml]和t-PAIC浓度[(37.52±21.10)ng/ml比(7.06±3.37)ng/ml]较高(P均<0.001)。SFTS恢复组患者血浆中TAT浓度为9.10(3.95,18.40)ng/ml,仍高于正常参考范围(<4 ng/ml),PIC浓度低于SFTS发病组[1.91(1.45,2.93)μg/ml比4.44(2.52,5.54)μg/ml,P<0.05],TM和t-PAIC低于SFTS发病组(P均<0.05)。结论SFTS患者发病期机体凝血系统激活,血管内皮受到损伤;恢复期血管内皮损伤情况减轻,但机体依然存在一定程度的凝血系统障碍,提示当体内病毒清除后,仍需继续监测凝血指标。
- 宗璐杨凡司力郑美娟徐元宏
- 关键词：布尼亚病毒科感染血小板减少凝血酶血栓调节蛋白
- 日本血吸虫信号蛋白14-3-3在毕赤酵母菌中的分泌表达及其抗原性分析被引量：6
- 2007年
- 目的在毕赤酵母菌(Pichia pastoris)表达系统中表达日本血吸虫信号蛋白14-3-3(Sj14-3-3),并与原核表达rSj14-3-3比较其抗原性。方法以重组质粒pET28a-rSj14-3-3为模板,PCR扩增Sj14-3-3基因,将特异片段连接到pMD18-T载体,DNA序列分析后,亚克隆目的片段Sj14-3-3至酵母菌分泌表达载体pPICZαB。测序正确后,重组质粒经电转化转染至毕赤酵母菌X-33菌株,经抗生素Zeocin筛选得到高拷贝转化子。经甲醇诱导表达,取诱导上清进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blotting)分析。用间接ELISA法比较毕赤酵母菌表达的rSj14-3-3和原核表达rSj14-3-3检测血吸虫病患者血清抗体的特异性和敏感性。结果目的基因已在酵母菌基因组中得到整合,PCR扩增得到约1 300 bp的片段。经甲醇诱导,Sj14-3-3表达并分泌到培养上清中。表达产物经SDS-PAGE测定为Mr 35 000。Western blotting结果显示,Mr 35 000蛋白可被Sj14-3-3单克隆抗体识别,表明该真核表达产物具有免疫反应性。间接ELISA检测结果表明,该重组蛋白检测36份急性血吸虫病患者血清rSj14-3-3抗体,阳性率为81%。与12份华支睪吸虫感染者血清未见交叉反应,32份健康人血清假阳性反应率为9.3%。以原核表达的rSj14-3-3为抗原,间接ELISA检测,36份急性血吸虫病患者血清的rSj14-3-3,抗体阳性率为88.9%;与12份华支睪吸虫感染者的交叉反应率为16.7%,32份健康人血清假阳性反应率为12.5%,其差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在毕赤酵母菌中成功表达了Sj14-3-3,培养上清中产物丰度较高,且免疫反应性良好。
- 郑美娟李敏王志成罗飞罗庆礼储德勇李丛磊沈继龙
- 关键词：日本血吸虫信号蛋白14-3-3毕赤酵母菌真核表达
