郭长凯
- 作品数：27 被引量：52H指数：5
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金卫生部临床学科重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 豚鼠I型前庭毛细胞胆碱能受体通道特性
- 2008年
- 本文旨在探讨豚鼠I型前庭毛细胞上有无胆碱能受体存在，并对其相应的离子通道特性进行研究。应用全细胞膜片钳技术检测急性分离的豚鼠I型前庭毛细胞对乙酰胆碱（acetylcholine，ACh）的反应。结果显示，7．5％（21／279）的I型前庭毛细胞对10-1000μmol／L ACh敏感，引发明显的外向电流。该电流对ACh的反应呈浓度依赖性，半数激活浓度（EC50）为（63.78±2．31）μmol／L，但该电流为非电压依赖性。在-50mV钳制电压和正常细胞外液中，100μmol／L ACh激活-持久缓慢的外向电流，电流幅值为（170±15）pA，该电流幅值依赖于胞外钙离子浓度，可被胞外给予的钙依赖性钾通道拮抗剂TEA阻断。I型前庭毛细胞的再次激活时间不小于1min。长时间暴露在ACh的情况下，受体离子通道不会发生自发性关闭。以上结果提示，部分豚鼠I型前庭毛细胞上存在胆碱能受体，胞外给予ACh可激活-持久缓慢的外向电流，其胆碱能受体通道对于ACh的作用呈浓度依赖性和外钙依赖性、非电压依赖性或失敏性。本研究结果对于阐明前庭传出神经的功能及其作用机制，证实并揭示I型前庭毛细胞上存在传出神经递质受体以及日后临床指导眩晕疾病的康复治疗具有重要的意义。
- 朱云孔维佳夏交张宇程华茂郭长凯
- 关键词：前庭毛细胞内耳膜片钳技术
- 豚鼠耳蜗血管纹边缘细胞钾离子通道特性的研究被引量：1
- 2007年
- 目的研究单个豚鼠耳蜗血管纹边缘细胞的基本电生理特性。方法应用耳蜗血管纹组织块培养技术和全细胞膜片钳技术,观察单个培养的豚鼠血管纹边缘细胞在电压钳模式下的电流特性。结果边缘细胞上记录到钾离子电流,该钾通道有以下特性:①具有电压依赖性;②通道的活动可被4-氨基吡啶(4-aminopyridine,4-AP)和四乙铵(tetraethylammonium,TEA)在相对高浓度下阻滞;③细胞外钙离子浓度的减少可导致该钾通道电流的降低。结论豚鼠耳蜗血管纹边缘细胞钾离子通道电流包括钙离子依赖性钾电流、外向延迟整流钾电流和A型钾电流。
- 吴婷婷孔维佳姚琦李隽郭长凯李之望
- 关键词：血管纹边缘细胞钾通道膜片钳
- 5-杂氮-2'-脱氧胞苷抑制人喉癌裸鼠移植瘤的机制探讨被引量：3
- 2005年
- 目的:探讨5-杂氮-2′-脱氧胞苷对Hep-2人喉癌裸鼠移植瘤生长的影响,寻找喉癌治疗的新靶点。方法:建立喉癌裸鼠移植瘤模型,用5-杂氮-2′-脱氧胞苷处理裸鼠,观察移植瘤的生长情况并绘制其生长曲线。用RT-PCR和免疫组织化学技术检测死亡相关蛋白激酶(Death-associatedproteinkinaseDAPK)基因mRNA及蛋白表达的变化。结果:5-杂氮-2′-脱氧胞苷对人喉癌裸鼠移植瘤处理后用药组和对照组之间裸鼠的体重无明显差异(t=0.011,P>0.05),而移植瘤的体积用药组较对照组明显减小,统计学差异有显著性(t=10.11,P<0.01)。在喉癌移植瘤组织中,对照组DAPK均不表达,而用药组出现表达。结论:5-杂氮-2′-脱氧胞苷在体内能使因甲基化而失活的抑癌基因再转录,诱导其表达,进而抑制喉癌移植瘤的生长。
- 张松孔维佳郭长凯王彦君韩月臣
- 关键词：HEP-2细胞系裸鼠模型死亡相关蛋白激酶
- 豚鼠Ⅱ型前庭毛细胞乙酰胆碱敏感性大电导钙依赖性钾通道与L型钙通道共存
- 2008年
- 目的研究豚鼠Ⅱ型前庭毛细胞乙酰胆碱（acetylcholine，ACh）敏感性大电导钙依赖性钾通道（big conductance, calcium-dependent potassium channel, BK） 激活过程中的钙离子内流机制。方法健康杂色豚鼠52只，断头后取出前庭终器，经胶原酶LA消化后获取Ⅱ型前庭毛细胞。采用全细胞膜片钳技术检测新鲜单离的Ⅱ型前庭毛细胞ACh-敏感性BK电流对细胞外钙通道阻断剂和激动剂的敏感性。结果①细胞外ACh激活一缓慢持久的外向性电流，其反转电位为（-70．5±10．6）mV（x±s，下同，n=10）；-50mV钳制电压下，100μmol／LACh激活电流的幅值为（267±106）pA（n=11）。②ACh-敏感性钾电流对细胞外IBTX（iberiotoxin，200nmol／L）敏感，而细胞外蜂毒明肽（apamin，1μmol／L）对ACh-敏感性钾电流幅值无抑制作用。③ACh-敏感性BK对细胞外钙通道阻断剂NiCl2敏感，可被细胞外钙通道阻断剂CdCl2强力阻断。NiCl2和CdCl2对ACh-敏感性BK的半数抑制浓度分别为（135．5±18．5）μmol／L（n=7）和（23．4±2．6）μmol／L（n=7）。④L型钙通道激动剂（-）-Bay-K8644激活Ⅱ型前庭毛细胞产生一种与ACh-敏感性BK类似的外向性电流，并能被IBTX强力阻断。结论Ⅱ型前庭毛细胞中ACh-敏感性BK与细胞膜L型钙通道共存，可能具有重要的生理学作用和意义。
- 郭长凯李冠乔孔维佳张松吴婷婷李家荔李擎天
- 关键词：毛细胞前庭大电导钙激活钾通道钙通道膜片钳术
- 大鼠前庭内侧核神经元的内在膜特性及其对前庭模拟传入信号的反应被引量：1
- 2008年
- 目的观察大鼠前庭内侧核神经元的膜特性及其对前庭外周模拟传入信号的放电反应，探讨前庭系统生理功能的可能机制。方法运用红外微分干涉相差技术，可视状态下对前庭内侧核神经元进行全细胞记录，按平均动作电位形状对神经元分型，比较不同类型神经元膜特性的差异。向胞内注入刺激电流以模拟头部作直线加速和匀速旋转运动时外周前庭的传入信号，观察神经元的放电反应。结果在大鼠前庭内侧核神经元可记录到放电活动，在低钙高镁人工脑脊液中放电活动仍然存在。神经元可被分为有单相后超极化及A样整流的A型（33％），有双相后超极化的B型（63％），以及同时具有或不具有以上特征的其他型（4％）；A、B型神经元的部分主动膜特性存在明显差异，对同样的模拟传入信号可作出不同的反应。结论大鼠前庭内侧核神经元的放电基于其内在膜特性的自发活动；大部分神经元的放电表现为典型的A型或B型，但仍有少量非典型放电存在；A、B型神经元膜特性和放电反应特性的差异是它们执行不同生理功能的基础。
- 夏交孔维佳朱云周彦张宇郭长凯
- 关键词：前庭内侧核膜片钳术动作电位
- 耳病患者可多嚼口香糖
- 2015年
- 在门诊时，我经常建议一些耳病患者嚼口香糖（幼儿慎用）以缓解不适。但是年前碰到一位当空姐的患者因经常连续执行飞行任务后出现耳闷不适、有时伴有耳痛，我建议她经常嚼口香糖来缓解症状，结果被质疑。我觉得有必要写点什么，希望能帮助更多的患者。
- 郭长凯
- 关键词：嚼口香糖耳病飞行任务
- 豚鼠Ⅱ型前庭毛细胞ACh-敏感性BK电流
- 2006年
- 目的研究豚鼠球囊和椭圆囊Ⅱ型前庭毛细胞乙酰胆碱(ACh)-敏感性钾电流的特性。方法应用全细胞膜片钳技术检测新鲜单离的豚鼠球囊和椭圆囊Ⅱ型前庭毛细胞ACh-敏感性钾电流的离子特性及其药理学特点。结果①细胞外ACh激活一缓慢持久的外向性电流,其效应呈浓度依赖性,半数激活浓度为45μmol.L-1。②ACh-敏感性钾电流对钾通道阻断剂TEA(tetraethylammon ium)、IBTX(ibe-riotoxin)和Cs+敏感,而对4-AP(4-am inopyride)和apam in不敏感。③细胞内应用钙离子螯合剂BAPTA[b is(2-am inophe-noxy)ethane-N,N,N,′N-t′etra-acetic ac id],ACh-敏感性钾电流的幅值迅速被抑制。④ACh-敏感性钾电流对细胞外液中钙离子浓度变化敏感,0.2 mmol.L-1低钙外液中ACh-敏感性钾电流被抑制,电流最大值由0~10 mV向-20 mV^-30 mV超极化方向移动。结论细胞外ACh激活豚鼠球囊和椭圆囊Ⅱ型前庭毛细胞产生大电导钙依赖性钾电流(BK)。ACh-敏感性BK电流在豚鼠Ⅱ型前庭毛细胞超极化保护机制中具有重要的作用。
- 郭长凯余青松孔维佳李冠乔李擎天
- 关键词：前庭毛细胞乙酰胆碱
- 豚鼠耳蜗外毛细胞的变性机制
- 2008年
- 目的:探讨外毛细胞维持形态及变性过程发生的可能机制。方法:倒置相差显微镜下,对于急性酶分离所得的外毛细胞进行6 h的连续性观察。结果:半数以上活性良好的单离外毛细胞可保持活性平均约6 h,变性过程中均出现自表皮板至基底部的纵行褶线。含钙和不含钙的细胞维持活性时间相同。静纤毛缺失可以同样维持较长时间的活性。结论:钙离子浓度和静纤毛损伤不是外毛细胞变性的决定性因素,而环细胞表面的某种弹性机制可能是维持形态保持活性的根本原因。
- 康喜讯孔维佳黎万荣曾晓荣张松郭长凯黄翔
- 关键词：外毛细胞形态学
- 鼻咽清毒颗粒加鼻渊舒口服液抑制鼻咽癌高危人群EB病毒VCA/IgA的临床观察被引量：6
- 2006年
- 目的:观察鼻咽清毒颗粒加鼻渊舒口服液对鼻咽癌高危人群EB病毒壳抗原抗体VCA/IgA的抑制作用。方法:将136例鼻咽癌高危患者按就诊顺序分成实验组(鼻咽清毒颗粒加鼻渊舒口服液组)76例和对照组(鼻咽清毒颗粒组)60例。两组在治疗前均经电子鼻咽镜检查和鼻咽部活检排除有鼻咽癌。结果:实验组和对照组治疗前EB病毒VCA/IgA几何平均滴度分别为1∶38.04和1∶30.80,两组几何平均滴度基本一致,u=1.18,P=0.320。治疗后,实验组76例患者中痊愈42例(55.3%)、显效16例(21.0%)、有效10例(13.2%)及无效8例(10.5%),未见任何不良反应;对照组60例患者中痊愈10例(16.7%)、显效4例(6.6%)、有效10例(16.7%)及无效36例(60.0%)。两组疗效比较差异有统计学意义,u=4.2,P=0.000。治疗后,对照组VCA/IgA几何平均滴度降至1∶22.15,鼻咽清毒颗粒对EB病毒VCA/IgA滴度水平影响不大,u=1.34,P=0.220;而实验组VCA/IgA几何平均滴度降至1∶8.26,鼻咽清毒颗粒加用鼻渊舒口服液能显著性降低鼻咽癌高危人群EB病毒VCA/IgA滴度水平,u=8.92,P=0.000。结论:鼻咽清毒颗粒加用鼻渊舒口服液对鼻咽癌高危人群EB病毒VCA/IgA滴度水平有明显的抑制作用,有助于降低鼻咽癌的发病率。
- 郭长凯孔维佳余青松张松李擎天
- 关键词：滴定分析法危重病
- 颞骨骨化纤维瘤被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨颞骨骨化纤维瘤的诊断和治疗,提高对该病的认识。方法:报道1例颞骨骨化纤维瘤男性患儿,取耳后沟外切口,暴露瘤体,彻底切除肿瘤组织,封闭外耳道残端,取自体腹壁脂肪填塞术腔;术后定期随诊。结果:术后病理证实为颞骨骨化纤维瘤,术后随访1年无复发,外耳道内端封闭完好。结论:颞骨骨化纤维瘤临床罕见,虽为良性肿瘤,但可压迫和侵袭邻近重要组织和器官,引起功能障碍和颅内感染,一旦确诊,应尽早完整切除。
- 肖红俊龚树生聂秀郭长凯钟刚
- 关键词：颞骨骨化纤维瘤
