目的分析西藏地区高血红蛋白人群血液制备的悬浮红细胞在体外保存过程中的质量变化及其临床应用的安全性。方法以体检及血液筛查合格的无偿献血者为对象,参照"青海标准"设高原高血红蛋白浓度(Hb)献血人群组(男性Hb≥210 g/L,女性Hb≥190 g/L,简称高红组):共招募西藏自治区(海拔>3 500 m)13名献血者,均为男性;对照组(男性Hb:120~185 g/L,女性Hb:115~165 g/L):共招募成都市25名献血者,其中男性12名、女性13名。采集全血200 mL/(人)袋,离心去除血浆并加入MAP保养液制备悬浮红细胞(简称悬红),分装到4个50 mL贮存袋于4℃保存。分别于保存d1、d14、d21、d35检测血常规、游离Hb、溶血率等指标,并分离红细胞膜蛋白进行带3蛋白酪氨酸磷酸化检测。结果高红组与对照组比较,RBC(×10^(12)/L)、Hct(%)、Hb(g/L)分别为6.76±0.95 vs 4.65±0.52、63.3±6.8 vs 43.1±4.4、214.4±19.8 vs 143.2±16.9(P<0.01);悬浮红细胞在贮存d1、d14、d21、d35的红细胞变形性检测:在3、5.33、9.49、16.87、30 Pa剪切力下高红组的红细胞变形性均明显低于对照组(P<0.01);高红组与对照组在贮存d1、d14、d21、d35的溶血率(%)分别为0.0502±0.0402 vs 0.0222±0.0111、0.0554±0.043 vs 0.032 1±0.0287、0.0612±0.0259 vs 0.0343±0.0317、0.0696±0.0320 vs 0.0440±0.0333(P<0.05);带3蛋白胞浆段N端Y21的磷酸化检测:在血液采集时高红组红细胞的带3蛋白呈高度磷酸化状态。结论与对照组相比,高红组悬浮红细胞的红细胞变形性降低,在体外保存过程中溶血率更高。但高红组悬浮红细胞的储存期末溶血率仍达到国家标准要求(<0.8%),高红组悬浮红细胞溶血率升高与带3蛋白的高度磷酸化密切相关。
目的分析人血小板及其洗涤后获得的各组分补体灭活前后对小鼠成纤维细胞(L929)和人成纤维细胞(HDP)的增殖作用。方法将所制备的新鲜人富血小板血浆(PRP)3份及血小板浓缩液(PC)5份(50 mL/份),分别用20 mL 0.9%生理盐水洗涤2次,重悬以获得贫血小板血浆(PPP)、生理盐水上清、洗涤血小板(WP)3个组分,同未经处理的PRP及PC一道,分别冻融留取对照样品后作补体灭活处理,ELASA方法测试补体灭活前后血小板源性生长因子(PDGF-AB)、转化生长因子(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)含量,CCK-8试剂盒测定补体灭活前后对L929/HDP细胞的增殖作用。结果 PRP及洗涤各组分补体灭活前后PDGF-AB、VEGF及EGF含量比较,P>0.05,PC及各组分补体灭活前后PDGF-AB、VEGF、EG及TGF-β1含量比较均无明显差异(P>0.05)。PRP及WP促L929细胞增殖比较:PRP为0.68±0.12 vs 2.13±0.18(P<0.05),WP为0.69±0.12 vs 0.66±0.13(P>0.05);PC及WP促L929细胞增殖比较:PC为0.42±0.05 vs 1.94±0.19(P<0.05),WP为1.69±0.13 vs 1.93±0.19(P>0.05)。补体灭活前后,PRP及WP促HDP细胞增殖:PRP为1.36±0.09 vs1.30±0.11(P>0.05),WP为1.26±0.04 vs 1.33±0.10(P>0.05);PC洗涤组分促细胞增殖:PC为1.32±0.07 vs1.28±0.09(P>0.05),WP为1.39±0.13 vs 1.44±0.13(P>0.05)。结论补体灭活对PRP与PC及洗涤获得的各组分PGFs含量影响较小,PGFs含量与促L929/HDP细胞的增殖作用存在非线性正相关关系,PGFs促细胞增殖可能存在种间差异。
