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陈嘉瑜
作品数:
2
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供职机构:
广州市第十二人民医院
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发文基金:
广州市医药卫生科技项目
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
陈运贤
中山大学附属第一医院
周育森
军事医学科学院微生物流行病研究...
刁东英
广州市第十二人民医院
张祥忠
中山大学附属第一医院
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作者
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陈嘉瑜
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张祥忠
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刁东英
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周育森
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陈运贤
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中国临床医学...
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中华临床医师...
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1篇
2011
1篇
2005
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携带人肝细胞生长因子腺病毒重组体的构建
2011年
目的构建一种同时携带人肝细胞生长因子(hHGF)及绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒重组体,为hHGF的基因治疗提供实验基础。方法对重组质粒pcDNA3-hHGF进行酶切鉴定及测序正确后,酶切获得hHGF,亚克隆至带有GFP标记的穿梭质粒pAdTrack-CMV上。选取hHGF正向插入的重组穿梭质粒经PmeⅠ充分线性化后,与骨架质粒pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中同源重组,挑取阳性克隆行PCR及酶切鉴定。重组病毒质粒用PacⅠ酶切线性化后,脂质体转染HEK293细胞进行包装并扩增获取重组病毒上清,RT-PCR及WesternBlot方法检测hHGF的表达。结果目的基因的测序结果与Genebank上的hHGF序列一致。hHGF基因插入重组腺病毒载体的预期位置,感染Ad-hHGF的HEK293细胞中可检测到hHGFmRNA和蛋白的表达。结论成功构建了同时携带hHGF和GFP的重组腺病毒表达载体Ad-hHGF,为进一步探讨hHGF的生物学功能提供了实验依据。
朱小玉
朱薇波
张祥忠
周育森
陈嘉瑜
孙自敏
陈运贤
关键词:
肝细胞生长因子
绿色荧光蛋白质类
基因疗法
乳房粒细胞肉瘤彩色多普勒超声表现1例
2005年
刁东英
陈嘉瑜
关键词:
乳房肿瘤
多普勒
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