马思杰
- 作品数：26 被引量：52H指数：4
- 供职机构：大榭出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：宁波市自然科学基金国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 鼠类携带淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：3
- 2014年
- 目的建立检测鼠类携带淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitis virus,LCMV)的实时荧光定量RT-PCR方法。方法根据LCMV核蛋白编码基因序列设计合成特异性引物对和TaqMan荧光探针,经优化反应体系和条件,建立LCMV实时荧光定量RT-PCR检测方法,然后进行灵敏度、特异性和重复性试验,并对79份宁波口岸捕获的鼠样品进行检测。结果建立实时荧光定量RT-PCR方法对鼠肺总RNA检测的灵敏度为20pg,是常规PCR方法的100倍;试验的重复性良好,CV值为0.85%;试验的特异性为100%。用该方法检测79份鼠样品有3份LCMV阳性,与常规RT-PCR结果一致。结论成功建立了鼠LCMV实时荧光定量RT-PCR检测方法,对于监测和防控鼠传LCM有重要意义。
- 胡群邹春颖马思杰童淑梅
- 关键词：实时荧光定量RT-PCR鼠类
- CODEHOP RT-PCR方法在汉坦病毒基因型别鉴定和分子溯源中的应用被引量：3
- 2013年
- 目的分析CODEHOP RT-PCR方法对于汉坦病毒(HV)基因型别鉴定和分子溯源中的应用效果。方法选取实验室保存的汉滩型病毒阳性鼠肺样品DX0901和汉城型病毒阳性鼠肺样品DX1101,用CODEHOP RT-PCR扩增HV病毒L基因片段并测序,进行Blast同源性比对和系统发生分析。结果两份样品均获得478bp大小的RT-PCR扩增产物,汉滩病毒DX0901与汉滩病毒株Nc167同源性最为接近,遗传距离为0.142。汉城病毒DX1101与汉城病毒株ZT10,ZT71,Z37同源性最为接近,遗传距离为0.049。结论 CODEHOP RT-PCR方法可以有效的用于对汉坦病毒进行基因型别鉴定和分子溯源。
- 胡群马思杰童淑梅
- 关键词：汉坦病毒CODEHOPRT-PCR基因型别
- 宁波野生鼠类携带的沙粒病毒检测和种系进化分析
- 2015年
- 目的对宁波地区野生鼠类携带的沙粒病毒进行检测并分析病毒基因序列特征。方法设计沙粒病毒L、S基因的简并引物,采用RT-PCR方法对宁波口岸捕获的鼠类样品进行沙粒病毒检测,分离病毒,对PCR产物进行测序及系统发生分析。结果共检测73份鼠类样品,其中12份褐家鼠经检测为阳性,分离获得沙粒病毒株DX1401,该病毒株S片段扩增片段大小为413bp,L片段扩增大小1 204bp。S片段的系统发生分析显示DX1401与Mobala病毒株ACAR3080位于同一分支,与Mobala病毒株ACAR3080遗传距离最为接近,值为0.467;L片段的系统发生分析显示DX1401与Lassa病毒株Josiah、NL、Z148、Bamba-R114、Soromba-R、Nig08-A37、Nig08-A47,Mobala病毒株ACAR3080,Morogoro病毒株13017/2004,Mopeia病毒株Mozambique、AN 21366-BNI位于同一组,与Mobala病毒株ACAR 3080遗传距离最为接近,值为6.953。结论本研究证实了宁波地区野生鼠类中存在沙粒病毒流行。
- 胡群马思杰邹春颖童淑梅梅勇
- 关键词：鼠类系统发生分析
- 首例入境集装箱中发现疑似鼠疫感染死鼠的检测被引量：3
- 2011年
- 目的通过对入境集装箱中发现的死鼠进行实验室检测,加强口岸对入境啮齿动物携带鼠疫杆菌的监测力度。方法分别用胶体金和PCR方法对入境集装箱中发现的死鼠进行鼠疫杆菌检测。结果该样本鼠疫杆菌F1抗原阳性,pla基因和fra基因PCR扩增均为阳性,判定该样本为疑似鼠疫杆菌感染。结论在口岸一线加强对入境鼠类携带鼠疫杆菌检测具有重要意义。同时,应不断加强口岸公共卫生核心能力建设,加强公共卫生实验室建设及重大疫情检测技术储备。
- 胡群童淑梅马思杰郭利平
- 关键词：鼠疫杆菌F1抗原PCR
- 一例输入性板齿鼠的种类鉴定与分析被引量：4
- 2014年
- 目的 对1份从入境集装箱中检获的鼠样品进行种类鉴定。方法 运用形态学方法及DNA条形码技术进行鉴定分析。结果 鼠样品体长约252 mm,尾长220 mm,后足长40 mm,毛色呈黑褐色,cytB基因序列与板齿鼠同源性最为接近,与不同板齿鼠的遗传距离为0.048~0.175。结论 经形态鉴定和DNA条形码比对,确定为板齿鼠,系浙江省口岸首次检获该鼠种,为加强外来医学媒介生物防控提供了基础依据。
- 胡群马思杰马研梅勇
- 关键词：线粒体细胞色素B基因
- 沙粒病毒属四步法一致-简并杂合寡核苷酸引物实时荧光PCR检测体系的建立
- 2016年
- 目的建立沙粒病毒属四步法一致-简并杂合寡核苷酸引物（CODEHOP）实时荧光PCR（Real-time PCR）检测体系。方法设计1对沙粒病毒属的一致-简并引物,分析Real-time PCR的扩增曲线和熔解曲线,根据引物二聚体（PDs）和扩增产物的熔解温度（Tm）值,在通用的三步法延伸步骤之后,增加5 s的恒温荧光检测步骤,在PDs和特异性扩增产物的熔解温度之间进行荧光检测温度的优化,建立四步法CODEHOP Real-time PCR方法,评价其灵敏度、特异性和重复性。结果 PDs的Tm值为75.32-76.86℃,特异性扩增产物的Tm值为86.84℃,增加一步温度为84℃,荧光检测步骤可有效去除PDs对检测结果的影响,该方法特异性为100%,病毒RNA检测灵敏度为59.6 pg,重复性良好,变异系数〈5%,12份鼠肺盲样的检测结果符合预期。结论建立的沙粒病毒四步法CODEHOP Real-time PCR检测方法敏感、特异,可用于鼠类沙粒病毒感染检测。
- 胡群邹春颖马思杰
- 关键词：实时荧光PCR
- 黄病毒属病毒CODEHOP RT-PCR检测方法的建立被引量：2
- 2013年
- 目的建立一种能快速检测黄病毒属病毒的CODEHOPRT—PCR方法。方法根据GenBank发丧的不同黄病毒多聚蛋白氯基酸序列，利用CODEHOP方法设计合成一对引物，建立能快速检测黄病毒属所有病毒的CODE～HOPRT—PCR方法，并用3种不同病毒株对该方法进行特异性和灵敏度评价。结果建立的CODEHOPRTPCR能埘黄病毒RNA进行特导性扩增，目的片段的大小（400-500bp）和序列与预期结果相符。该方法对黄病毒恢酸的最小检出量为8Pg。结论建立的CODEHOPRT—PCR方法特异强、灵敏高，可用于黄病毒的榆测。
- 胡群马思杰孙肖红李永东
- 关键词：黄病毒CODEHOPRT-PCR
- 汉坦病毒群CODEHOP RT-PCR检测方法的建立被引量：6
- 2012年
- 目的建立一种能对汉坦病毒群进行快速检测的CODEHOP引物RT-PCR方法。方法根据GenBank发表的不同汉坦病毒L基因组氨基酸序列,利用CODEHOP方法设计合成一对引物,经反应条件优化,建立快速检测汉坦病毒群所有病毒的方法,并通过对标准毒株的检测评价方法的灵敏度和特异性。结果特异性试验结果显示,该方法可对汉坦病毒进行特异性扩增,目的片段大小和序列与预期结果相符,对汉坦病毒核酸的最小检出量为10pg。结论建立的CODEHOP RT-PCR方法的特异性强、灵敏度高,可用于汉坦病毒群的检测。
- 胡群马思杰王静倪红霞
- 关键词：汉坦病毒RT-PCR
- 基于Cytb基因序列对入境集装箱中截获的疑似鼠样本的种类鉴定被引量：2
- 2014年
- 目的根据线粒体Cytb基因部分序列,对从入境集装箱中截获的疑似鼠样本进行鉴定种类。方法提取样本中的DNA,采用PCR方法进行线粒体Cytb基因扩增,对目的片段测序,通过blast比对进行同源性比对。从Genbank获取宁波口岸常见8个鼠种24个样本的Cytb基因序列作为参照,利用生物信息学软件Mega5.0进行系统进化分析。结果样本DXR1110与小家鼠同源性最高,DXR1203与褐家鼠同源性最高,系统进化树显示不同鼠种间形成独立分支。结论Cytb基因分析是进行鼠种鉴定的有效手段。
- 胡群马思杰邹春颖童淑梅
- 关键词：CYTB基因入境集装箱鼠种
- 大榭港区传染病监测技术报告
- 2011年
- 依据《中华人民共和国国境卫生检疫法》及其实施细则、《中华人民共和国传染病防治法》、《国际卫生条例（2005）》等法律法规的规定和要求，根据宁波出入境检验检疫局和宁波市卫生局、大榭出入境检验检疫局与大榭开发区文教卫生局的合作机制，宁波大榭港区建立了一套完善的传染病监测体系，实现了对传染病的有效监测和对疑似病例的快速处置，有效地防止了传染病的传播。
- 马思杰吴金彪胡健郭利平
- 关键词：传染病监测《中华人民共和国国境卫生检疫法》《中华人民共和国传染病防治法》港区国际卫生条例
