马群风
- 作品数：44 被引量：218H指数：8
- 供职机构：军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Mda7/IL-24基因的克隆及其融合蛋白在E.coli中的表达被引量：3
- 2004年
- 目的 :克隆人黑素瘤分化相关基因 (melanomadifferentiationassociatedgene ,mda 7/IL 2 4 ) ,并在大肠杆菌中表达。方法 :从PHA刺激培养的人外周血淋巴细胞提取总RNA ,根据mda 7/IL 2 4基因序列设计引物 ,用PCR法扩增mda 7/IL 2 4基因。将mda 7/IL 2 4基因插入表达载体pET 2 8a(+)中 ,构建表达载体pET 2 8a mda 7/IL 2 4 ,用IPTG诱导目的蛋白在E .coli中表达。通过Western印迹分析对表达产物进行鉴定。结果 :经RT PCR从人外周血分离的淋巴细胞中扩增到mda 7/IL 2 4cDNA ,序列分析与文献报道一致 ;SDS PAGE分析表明 ,经 0 .5mmol/LIPTG 37℃诱导 4h后在E .coli中有大量mda 7/IL 2 4融合蛋白表达 ,相对分子质量约为 2 8× 10 3 ,融合蛋白约占诱导菌总蛋白的30 % ;Western印迹分析提示 ,诱导表达产物能与His单抗发生特异性反应。结论 :从人外周血淋巴细胞中获得了mda 7/IL 2 4的全长cDNA ,融合蛋白在E .coli中获得高效表达。
- 马群风江红刘锟朱捷郑晓飞
- 关键词：基因克隆基因表达
- 获得性气管食管瘘的诊治被引量：8
- 2007年
- 目的 总结获得性气管食管瘘（tracheoesophageal fistula，TEF）的诊治方法。方法回顾我院1980年1月至2006年1月收治的14例获得性TEF患者的临床资料。结果纤维支气管镜、食管碘油造影、纤维胃镜诊断获得性TEF分别为12、11、10例。纤维支气管镜检查时食管腔内注入美蓝诊断13例。本组手术治疗11例，其中单纯修补5例，瘘旷置、结肠代食管术1例，食管双瓣修补瘘5例。放置气管支架2例。保守治疗1例。痊愈13例，死亡1例。结论纤维支气管镜结合食管腔内注入美蓝可提高诊断率。手术是主要治疗方法，食管瓣修补瘘取材方便、成功率高，值得推广。
- 程庆书韩勇刘锟李小飞王小平周勇安谷仲平马群风姜涛黄立军
- 关键词：气管食管获得性
- 共聚焦定量分析WAF_1-S基因表达对人食管癌细胞系EC109生长的作用被引量：3
- 2002年
- 目的:探讨抑癌基因WAF_1-S基因在食管癌细胞中的表达以及对食管癌细胞生长的抑制作用,为食管癌发病机制的研究提供一种新的思路,为食管癌基因治疗提供理论基础。 方法:采用亚克隆技术,将野生型WAF_1-S基因全长,通过双粘端克隆入真核表达载体pcDNA3中,用lipofectamine2000介导的方法转染EC109细胞(人食管癌细胞系)。通过打点杂交观察WAP_1-S基因mRNA在细胞中的表达,用Westem blot及激光共聚焦方法定量分析WAF_1-S基因的蛋白表达产物,MTT及流式细胞仪检测EC109的生长状态,分析WAF_1基因对食管癌细胞株生长的影响。 结果:用内切酶酶切分析证实外源野生型WAF_1_S基因克隆入真核表达载体中,经打点杂交证实外源野生型WAF_1-S基因可以在EC109细胞中表达,通过激光共聚焦分析证实,转染后的食管癌细胞EC109中WAF_1-S的蛋白的表达明显高于对照组(32±15 vs 11±7,P<0.05),对细胞进行周期分析表明,处于G_0～G_1期细胞为0.47～0.65。 结论:通过转染外源野生型WAF_1基因可提高WAF_1基因表达,增加食管癌细胞中P^(21)蛋白的表达量,从而提高WAF_1基因表达,抑制细胞的生长。
- 周勇安谷仲平王线妮马群风
- 关键词：食管癌EC109细胞P21基因
- 2771例肺肿瘤临床病理特征分析被引量：24
- 2016年
- 目的：根据WHO（2015版）肺肿瘤组织学分类标准,探讨军事医学科学院附属医院肺肿瘤的病理类型及分布特点。方法：收集2010年11月1日至2015年3月31日病理诊断2 771例肺肿瘤,复习其临床资料、HE切片及免疫组织化学切片。按WHO（2015版）分类标准进行病理诊断及分类。结果：2 771例肺肿瘤中多数为男性1 671例（60.30%）,少数为女性1 100例（39.70%）;左肺1 286例（46.41%）、右肺1 456例（52.54%）、双肺29例（1.05%）;年龄16~91岁。腺癌1 622例（58.53%）、鳞癌424例（15.30%）、腺鳞癌32例（1.15%）、神经内分泌肿瘤465例（16.78%）、大细胞癌19例（0.69%）、梭形细胞癌1例（0.04%）、巨细胞癌1例（0.04%）、癌肉瘤17例（0.61%）、淋巴上皮样癌1例（0.04%）、唾液腺型肿瘤4例（0.14%）、腺瘤11例（0.40%）、间叶性肿瘤55例（1.98%）、淋巴瘤7例（0.25%）、异位起源性肿瘤13例（0.47%）、转移性肿瘤99例（3.57%）。非小细胞肺癌-非特指型,倾向于腺癌小活检中TTF-1抗体阳性率为92.60%（1 263/1 364）、Napsin A抗体阳性率为97.07%（1 324/1 364）;非小细胞肺癌-非特指型,倾向于鳞癌小活检中CK5/6阳性率为96.99%（290/299）、P40阳性率为98.51%（66/67）、P63阳性率为93.72%（343/366）。非小细胞肺癌分子亚型首次活检中EGFR基因突变率34.77%（378/1 087）,KRAS基因突变率2.92%（24/823）,BRAF基因突变率0.87%（5/572）,ALK融合基因阳性率11.99%（41/342）,ALK-D5F3抗体阳性率22.23%（66/296）,ROS1融合基因阳性率2.56%（7/273）,c-Met基因扩增率4.40%（12/273）,c-Met基因突变率6.67%（1/15）,Her-2基因突变率0.73%（2/273）,PIK3CA基因突变率13.33%（2/15）,PTEN基因突变率6.67%（1/15）,RET融合基因阳性率0（0/15）和NTRK1融合基因阳性率0（0/15）。二次活检率EGFR基因4.76%（18/378）,ALK融合基因2.44%（1/41）。结论：肺肿瘤在男性患者中高发,病变部位最常见于右�
- 许春伟王海艳吴永芳邵云邰艳红李晓兵刘晓晴高红军马群风杨武威吴世凯
- 关键词：肺肿瘤肺癌临床病理
- p16^(INK4α)重表达对人食管癌细胞系EC109生长的抑制作用被引量：5
- 2001年
- 目的探讨用腺病毒介导野生型的 p16基因在食管癌细胞系表达,研究重表达野生型 p16基凶对食管癌细胞系 EC109生长的抑制作用,为寻找食管癌致癌机制的研究及其基因治疗提供理论基础.方法用基因重组技术,将 pcDNA3-p16中的野生型 p16基因用 Kpn I/Bam H (?)进行双酶切,克隆入腺病毒表达载体pAdCMV 中,将重组质粒 pad-CMV-p16与腺病毒质粒 JM17用Lipofectamime 2000共转染293细胞,产生重组腺病毒.用重组腺病毒感染人食管癌细胞系 EC109,在感染后的不同时段,用免疫荧光、打点杂交方法检测 p16基因在细胞中的表达.用MTT 法及流式细胞仪观察 p16基因的表达对食管癌细胞株生长的影响.结果经酶切鉴定野生型 p16基因克隆入腺病毒表达载体中,与 JM17共转染293细胞后,可产生具有感染活性的重组腺病毒,用重组腺病毒感染食管癌细胞株 EC109细胞后,可抑制食管癌细胞的生长,同对照组相比其最大抑制率可达52.7%.Multipcycle 分析软件分析对细胞周期影响表明,处于 G_0～G_1期的细胞为41%～63%.感染后的细胞经 Dot blot 和 Westernblot 杂交证实,有外源的 p16mRNA 及蛋白的表达.结论重组腺病毒可将野生型 p16基因导入人食管癌细胞系EC109中,野生型 p16基因在 p16基因功能缺失的细胞中重表达能抑制癌细胞恶性生长.p16基因功能缺失是食管癌致癌因素之一.
- 周勇安谷仲平王线妮马群风黄立军
- 关键词：食管肿瘤肿瘤细胞P16基因表达EC109
- 新旧国际肺癌TNM分期的分析与比较被引量：5
- 2002年
- 目的:分析、评价新的非小细胞肺癌TNM分期方法的优缺点(UICC1997)。方法:对照UICC1987制订的非小细胞肺癌TNM分期方法,复习有关文献,结合临床实际将新、旧分期方法作对比分析。结果:对1997年新修订的非小细胞肺癌TNM分期方法,目前国际上仍存在一些争议,1987的肺癌分期法临床应用效果良好,1997年所做小范围修订,其中有些并不十分恰当。结论:新的非小细胞肺癌分期方法虽不尽完美,但仍不啻为国际统一的权威分期标准。我国肺癌发病率及临床病例数量均居世界前列,理应在临床工作根据不同T、N、M以及影响预后的各种因素,包括新的生物学指标,为在下次修订中能与各国肺癌工作者共同参与、制定出对各期肺癌治疗方案的确定、预后的估计更为准确而合理的分期标准以及能被普遍接受的淋巴引流图。
- 王云杰刘锟马群风赵正源
- 关键词：非小细胞肺癌TNM分期病理NSCLC
- 食管癌中DCC基因VNTR位点多态性研究被引量：13
- 2000年
- 目的探讨 DCC 基因 VNTR 位点多态性在陕西人群中的分布规律及与食管癌的遗传易感性关系.方法利用 PCR 方法对陕西正常人群个体(56例),食管癌组织(鳞癌49例).食管癌癌旁组织(34例)的 DCC 基因 VNTR位点多态性进行群体遗传学研究,并就该位点与食管癌的关系进行了关联分析.结果在陕西正常人群中 DCC 基因 VNTR 位点存在11种等位基因(A_1～A_(11)),扩增长度为167 bp～210 bp,其等位基因频率介于0.009～0.188,其中以扩增长度为205 bp(A_3),201 bp(A_4),185 bp(A_7),177 bp(A_9)较为常见,分布符合 Hardy-Weinberg 遗传平衡定律;DCC 基因 VNTR 位点在陕西正常人群中的多态信息量(PIC)为0.879,杂合度(H)为73.2%.在食管癌人群 DCC 基因 VNTR 位点中共检出10种等位基因,比正常人群少等位基因 A_2,其等位基因频率分布在0.01～0.25.癌组织与癌旁组织等位基因频率分布经比较无显著差异(x^2=3.16,P>0.05).食管癌人群 ECC 基因 VNTR 位点多态分布与正常人群有显著差异(P<0.01).其中 A_5在食管癌人群中等位基因频率明显高于正常人群,而 A_7等位基因频率则明显低于正常人群,提示 A_5和 A_7可能是食管癌易感因素.结论推测 DCC 基因 VNTR 位点多态性的改变可能在食管癌的形成中起重要作用,该位点多态性与食管癌的遗传易感性相关.
- 秦鸿雁舒青王栋马群风
- 关键词：DCC基因VNTR食管肿瘤易感性
- mda-7/IL-24腺病毒对小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖的抑制作用研究被引量：1
- 2006年
- 目的构建mda-7/IL-24腺病毒,检测其对小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖的影响。方法将mda-7/IL-24cDNA亚克隆至腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack-CMV中,在大肠杆菌BJ5183中将重组病毒穿梭质粒和骨架质粒重组。在HEK293细胞中进行病毒包装和扩增,用PCR方法鉴定后,通过TCID50法测定病毒滴度。用滴度为50pfu/细胞的重组腺病毒Ad·mda-7/IL-24感染NCI-H446细胞72h后,经MTT实验检测其对细胞增殖的影响,并用Westernblot方法检测mda-7/IL-24在NCI-446中的表达。结果核酸序列测定和PCR鉴定表明成功构建Ad·mda-7/IL-24;TCID50法测定扩增的腺病毒滴度为2×1010pfu/ml。Ad·mda-7/IL-24在NCI-H446细胞中表达MDA-7/IL-24,MTT检测表明Ad·mda-7/IL-24明显抑制NCI-H446细胞生长,抑制率为21·37%。结论重组腺病毒Ad·mda-7/IL-24能显著抑制NCI-H446细胞增殖,为研究mda-7/IL-24的作用机制及将其用于小细胞肺癌的基因治疗提供了条件。
- 马群风江红刘锟朱捷郑晓飞
- 关键词：白细胞介素24重组腺病毒小细胞
- 陕西人群Rb1.20位点的VNTR多态性与食管癌遗传易感性相关被引量：5
- 2000年
- 目的 探讨陕西人群 Rb1 .2 0位点 VNTR多态性是否与食管癌遗传易感性有关 .方法 应用 PCR方法对陕西正常个体外周血 (5 0例 )、食管癌组织 (36例 )、食管癌癌旁组织(2 7例 ) Rb基因 2 0内含子 VNTR区进行了检测 .结果 共检出 5个等位基因片段 :385 bp(A) ,370 bp(B) ,35 5 bp(C) ,330 bp(D)和 32 5 bp(E) .在正常人群中 ,其等位基因频率分别为 :A0 .31 ,B0 .1 5 ,C0 .0 7,D0 .0 5 ,E0 .42 ,杂合性为 72 % ,PIC为 0 .70 ;在食管癌癌组织中 ,其等位基因频率分别为 :A0 .1 5 ,B0 .1 7,C0 .1 7,D0 .36和 E0 .1 5 ,PIC为 0 .77;在食管癌癌旁组织中 ,其等位基因频率分别为 :A0 .1 1 ,B0 .30 ,C0 .1 1 ,D0 .43和 E0 .0 6 ,杂合性为 2 2 % ,PIC为 0 .70 .Rb1 .2 0位点 VNTR多态性在不同群体中有显著差异 .结论 推测Rb1 .2 0位点的
- 秦鸿雁舒青刘素英马群风
- 关键词：聚合酶链反应食管癌遗传易感性VNTR多态性
- 人食管鳞状细胞癌标本中乳头状瘤病毒DNA的检测被引量：14
- 2000年
- 目的食管鳞状细胞癌有明显的地域性差异,它的发生与遗传、环境、饮食和某些微生物的感染有密切的关系,本研究通过检测食管鳞状细胞癌和相应正常食管组织中 HPV-11型和HPV-16型的 DNA,阐明 HPV 与食管鳞状细胞癌的关系.方法用 PCR 的方法检测22位食管鳞状细胞癌患者手术切除的癌组织和相应癌旁正常食管粘膜(共44例标本)中的HPV-11型和 HPV-16型 DNA 的存在情况,并对其中一例 HPV阳性肿瘤标本的 HPV 序列进行测定.结果在本组所涉及的22位患者共计44例标本中,对于HPV-11型,12例癌组织为阳性;有7例癌旁组织为阳性;癌组织和癌旁组织均为阳性的有6例.对于 HPV-16型,6例癌组织为阳性;6例癌旁组织为阳性;癌组织和癌旁组织均为阳性的有3例.序列分析结果表明所测定的序列与 GeneBank 登录的NC001525.1(HPV-11)、M14119.1(HPV-11)和 AF217526.1(HPV-11)的同源性极高,均为99%.结论通过实验结果分析,我们认为食管鳞状细胞癌与 HPV-11型和 HPV-16型主要衣壳蛋白 L1基因密切相关,HPV 可能在一定的地域环境中与食管鳞状细胞癌的发生具有相关性.
- 马群风江红冯永强王小平周勇安刘锟贾再利
- 关键词：食管鳞状细胞癌人乳头状瘤病毒PCR
