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研究生功能蛋白质组学课程教学改革与探索被引量：2: 2022年; 功能蛋白质组学是生命科学学院学术研究生的一门重要的专业选修课。为了满足新时代对研究生创新能力培养的需求,结合教学实践与思考,该文梳理总结该课程中采用的教学内容、教学方法与手段和考核方式等方面的改革办法,以期为生命科学相关专业功能蛋白质组学的课程教学与改革提供思路。; 吴莹魏德强陶雷蓝兴国; 关键词：功能蛋白质组学教学改革研究生教育考评体系

抗人游离前列腺特异性抗原(f-PSA)单克隆抗体的制备及应用被引量：3: 2018年; 目的建立产生抗人游离前列腺特异抗原单克隆抗体(f-PSA m Ab)的细胞株,获得抗体后建立抗人f-PSA化学发光免疫分析法(CLIA)并进行应用。方法采用杂交瘤技术获得2株稳定分泌抗f-PSA m Ab的细胞株,将细胞株用转瓶扩大培养并将上清液采用亲和纯化法获得抗体,ELISA测定抗体效价、特异性及表位,表面等离子共振法测抗体亲和力;建立双抗体夹心CLIA,采用标准曲线定量法对该体系进行分析性能评估,同时对426例临床血清样本进行检测[其中130例的总PSA水平在(4～10) ng/mL,为"诊断灰区"],评价该试剂与罗氏试剂的检测一致性。结果获得抗人f-PSA m Ab的杂交瘤细胞株(f-10-1、f-14-1)。用f-10-1和f-14-1建立的CLIA的检测范围为(0. 1～30) ng/mL,灵敏度为0. 05 ng/mL,检测结果的相对偏差均在±5%内,与癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)及结合态PSA(c-PSA)无交叉反应,该试剂与罗氏试剂相关系数达到0. 99,灰区样本阳性符合率、阴性符合率、总符合率均高于90%。结论成功制备了抗人f-PSA m Ab,建立了特异性定量检测人f-PSA的双抗体夹心CLIA。; 张兰兰曹领改魏德强; 关键词：单克隆抗体

抗人CA15-3单克隆抗体的制备、鉴定及化学发光检测体系的建立被引量：5: 2014年; 目的获得抗人CA15-3单克隆抗体（mAb），建立CAl5-3双抗体夹心化学发光检测体系。方法人CAl5-3糖抗原免疫小鼠后，通过细胞融合，筛选到阳性杂交瘤细胞。杂交瘤细胞扩大培养后，纯化获得抗CAl5-3的mAb。对抗体进行纯度、效价、表位和亚型的鉴定并建立双抗体夹心检测CAl5—3化学发光体系，对该体系进行准确度、最低检测限、线性、重复性与特异性评估。结果获得5株阳性信号较强的杂交瘤细胞（分别为#3-1-3、#5-2-2、#11-2-2、#12—1—3和#16-1-3）。其分泌的抗体效价均大于10qg／mL，轻链均为K链，重链#3—1-3为IgG2a、#5-2-2与#12-1-3为IgG2b、#11-2-2与#16—1-3为IgG3。双抗体夹心体系在（0。300）U／mL范围内线性关系良好，其准确度的回收率为97．45％；最低检测限为0．59U／mL；线性相关系数为0．9978；低高值的变异系数（cy）均小于10％；与肿瘤标志物AFP、CEA、CAS0、CAl9-9和CA72-4均不交叉。结论成功制备了抗人CAl5-3mAb，建立了双抗体夹心检测CAl5-3化学发光体系。; 曹领改蓝兴国魏德强李玉花; 关键词：肿瘤标志物单克隆抗体化学发光免疫分析

抗人CA50单克隆抗体的制备、鉴定及其应用被引量：2: 2015年; 目的制备抗人糖抗原50（CA50）单克隆抗体（m Ab）,鉴定其免疫学特性并建立化学发光免疫分析法检测体系。方法将人CA50抗原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术进行细胞融合,筛选后得到稳定分泌抗CA50抗体的杂交瘤细胞株。经细胞扩大培养及纯化获得m Ab后,建立化学发光免疫分析法检测体系,并对其线性范围、准确度、灵敏度、重复性进行评估,同时进行血样的测定。结果筛选出4株抗人CA50的杂交瘤细胞株,效价均在1∶108以上,2株配对抗体不与CA125、CA153、CA199、CA724交叉。建立的化学发光免疫分析法检测范围为0~500 U/m L,回收率为107.08%,灵敏度为0.83 U/m L,重复性CV值〈10%,与参比试剂检测血样的结果比较符合率为96.7%,Kappa值为0.911。结论成功制备了抗人CA50m Ab,建立了人CA50的化学发光免疫分析法检测体系。; 蓝兴国冯玥魏德强李玉花; 关键词：CA50 单克隆抗体化学发光免疫分析法

抗人CA19-9单克隆抗体的制备和鉴定及化学发光检测体系的建立被引量：3: 2014年; 目的制备抗人糖抗原19-9（CA19-9）单克隆抗体（mAb）,建立双抗体夹心检测CA19-9化学发光体系。方法 CA19-9免疫小鼠后,通过细胞融合技术,获得抗CA19-9的mAb。鉴定其抗体的纯度、效价、特异性和配对,建立双抗体夹心化学发光体系。在包被缓冲液、包被浓度及加样模式上优化化学发光体系,对该体系进行准确度、最低检测限、线性、重复性评估以及血清样本的检测。结果获得4株名称为#1-1、#2-1、#3-1和#4-1的mAb。抗体效价均大于10^-8,与CA125、CA15-3、CA72-4均无交叉反应。其中#3-1 mAb与#2-1-HRP建立的双抗体夹心体系经优化后,其检测范围为0~1 000 U/mL;最低检测限为2.0 U/mL;线性相关系数为0.9999。与罗氏试剂检测结果对比,Kappa系数大于0.75;相关系数大于0.9。结论成功制备了抗人CA19-9 mAb,建立了双抗体夹心检测CA19-9化学发光体系。; 蓝兴国曹领改魏德强赵洪梅李玉花; 关键词：CA19-9 单克隆抗体酶联免疫吸附分析化学发光免疫分析

植物硫胺素的生物合成及功能被引量：3: 2018年; 硫胺素是噻唑和嘧啶相连的二环化合物。在植物体内,硫胺素主要以游离硫胺素、硫胺素单磷酸和硫胺素焦磷酸三种形式存在。在硫胺素的生物合成过程中,嘧啶和噻唑部分分别合成,最终偶联形成硫胺素焦磷酸形式。嘧啶合成酶(THIC)、噻唑合成酶(THI1)、硫胺素磷酸合成酶(TH1)和硫胺素焦磷酸激酶(TPK)是硫胺素合成途径中的关键酶,调控植物体内硫胺素的合成。硫胺素在植物的生长发育、生物胁迫及非生物胁迫响应等方面具有重要的作用。; 孙中兴魏德强杨梅蓝兴国; 关键词：硫胺素生物合成生长发育生物胁迫非生物胁迫

抗人妊娠相关血浆蛋白A单抗的制备、鉴定及化学发光和胶体金检测体系的建立被引量：1: 2020年; 目的:构建抗人妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)单抗细胞株,成功筛选配对抗体后建立PAPP-A双抗体夹心化学发光(CLIA)及免疫胶体金(ICG)检测方法。方法:采用杂交瘤技术获得5株稳定分泌抗PAPP-A单抗的细胞株,将细胞株扩大培养并亲和纯化上清液获得抗体,测定抗体纯度、效价、特异性、表位,建立双抗体夹心CLIA及胶体金体系,并对各体系进行灵敏度、特异性等分析性能评估。结果:获得抗人PAPP-A的杂交瘤细胞株(#13-2-2、#20-1-1、#21-1-1、#44-1-1和#53-2-1)。其分泌的抗体效价均大于10-8 g/ml。化学发光体系在0~10000 ng/ml范围内线性关系良好,其准确度的回收率为107.2%;灵敏度为9.56 ng/ml;线性相关系数为0.9966;低高值的变异系数(CV)均小于10%;胶体金体系灵敏度不小于50 ng/ml。两种检测方法与人甲胎蛋白(AFP)、人泌乳素(PRL)、人胎盘催乳素(hPL)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)均不存在交叉。结论:本研究成功制备了抗人PAPP-A单抗,建立了检测PAPP-A化学发光及免疫胶体金体系。该体系为PAPP-A的定量检测和产前诊断等临床应用提供了基础。; 张兰兰于洋曹领改魏德强; 关键词：化学发光法免疫胶体金

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魏德强