黄伟华
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：华南农业大学兽医学院广东省兽药研制与安全评价重点实验室更多>>
- 发文基金：广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪表皮生长因子在大肠杆菌中的表达被引量：5
- 2006年
- 采用RT-PCR方法从猪肾脏皮质组织中扩增出pEGF基因,将其连接到克隆载体pMD18-T上,经测序鉴定正确后,再克隆到原核表达载体pET-41 a(+)上,构建重组表达质粒pET-EGF.用重组质粒转化E.coliBL21(DE3)宿主菌,经IPTG诱导表达后利用SDS-PAGE电泳和W estern-b lotting对GST-EGF融合蛋白进行分析,结果表明37℃诱导表达的融合蛋白含量较高,占菌体总蛋白的20.2%;30℃诱导表达的可溶性融合蛋白含量较高,占菌体总蛋白的7.7%.
- 杨桂香黄伟华彭险峰
- 关键词：猪表皮生长因子原核表达
- 猪表皮生长因子在大肠杆菌中的表达
- 猪表皮生长因子(pEGF)是一条含有53个氨基酸残基，由3个分子内二硫键连接起来的单链多肽，分子量约为6.4KD。它广泛存在于母猪的生殖器官中(卵巢、输卵管和子宫中均含有pEGF)，通过与靶细胞膜表面的表皮生长因子受体(...
- 黄伟华
- 关键词：猪表皮生长因子原核表达大肠杆菌融合蛋白重组质粒
- 文献传递
- 猪表皮生长因子在毕赤酵母中的表达及鉴定
- 【研究目的】猪表皮生长因子(pEGF)具有刺激静止期猪卵母细胞的成熟以及刺激仔猪胃肠上皮细胞成熟的功能,从而可以提高母猪繁殖率和降低断奶仔猪的应激。因此非常有必要开发猪表皮生长因子。【方法】用人工合成的pEGF基因为模板...
- 杨桂香汪洋吴波浪张万江黄伟华彭险峰
- 关键词：猪表皮生长因子毕赤酵母分泌表达生物活性
- 文献传递
- 猪表皮生长因子在毕赤酵母中的表达及鉴定被引量：9
- 2007年
- 【目的】猪表皮生长因子(pEGF)具有刺激静止期猪卵母细胞的成熟以及刺激仔猪胃肠上皮细胞成熟的功能,从而可以提高母猪繁殖率和降低断奶仔猪的应激。因此开发猪表皮生长因子具有重要意义。【方法】用人工合成的pEGF基因为模板,用PCR扩增获得pEGF-6His片段,将其克隆到载体pPIC9构建重组质粒pPIC9-pEGF并电转化毕赤酵母。用斑点杂交法筛选多拷贝整合转化子即基因工程菌,用Ni-NTA亲和层析法纯化目的蛋白,纯化产物用抗His-tag的单克隆抗体进行蛋白质免疫印迹、氨基端测序鉴定、体外生物活性检测。【结果】斑点杂交法筛选中信号越强的转化子,甲醇诱导表达的目的蛋白含量越高。免疫印迹中可以观察到印迹条带。氨基端氨基酸测序发现纯化的表达产物含有2条肽链,其N-端15个氨基酸的序列分别与天然的pEGF以及Glu-Ala-pEGF的序列相同。体外生物活性检测结果表明,纯化的表达产物对BALB/c3T3细胞具有显著的增殖作用。【结论】本研究获得了能高效表达具有生物学活性的重组猪表皮生长因子的基因工程菌。
- 汪洋杨桂香吴波浪张万江黄伟华彭险峰
- 关键词：猪表皮生长因子毕赤酵母分泌表达生物活性
- 猪表皮生长因子在毕赤酵母中的表达及鉴定
- [研究目的]猪表皮生长因子(pEGF)具有刺激静止期猪卵母细胞的成熟以及刺激仔猪胃肠上皮细胞成熟的功能,从而可以提高母猪繁殖率和降低断奶仔猪的应激。因此非常有必要开发猪表皮生长因子。[方法]用人工合成的pEGF 基因为模...
- 杨桂香汪洋吴波浪张万江黄伟华彭险峰
- 关键词：猪表皮生长因子毕赤酵母分泌表达生物活性
- 文献传递
