龙仕和
- 作品数：8 被引量：13H指数：3
- 供职机构：西北民族大学生命科学与工程学院更多>>
- 发文基金：甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目甘肃省科技支撑计划兰州市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程一般工业技术更多>>
- 再生丝素蛋白膜的性能及其细胞培养特性研究被引量：4
- 2015年
- 研究了温度梯度法所制再生丝素蛋白膜的溶失率、抗酶能力和动物细胞体外培养特性。以紫外分光光度法检测丝素蛋白膜在水中的溶失率;再用质量体积浓度0.25%和0.5%的胰蛋白酶液分别消化丝素蛋白膜2d,以膜的结构和质量是否发生明显变化为指标,判断膜抗胰蛋白酶的能力;最后在丝素蛋白膜上培养BHK-21细胞和Vero细胞,再用0.25%和0.5%胰蛋白酶液分别消化膜上细胞并进行传代培养,观察细胞形态和生长状况。实验结果表明,温度梯度法直接所制丝素蛋白膜48h内的溶失率低于0.2%,再经25%甲醇处理后溶失率为0,2d内膜仍保持完整结构且质量无明显变化;BHK-21细胞和Vero细胞在丝素蛋白膜上生长良好,形态正常;0.25%和0.5%的胰蛋白酶液均可在4min内将膜上两种细胞消化脱落且细胞连续传代培养5代,细胞形态正常。
- 龙仕和李明生靳冬武崔梦楠马素娟徐水林柏家林李倬冯玉萍马忠仁
- 关键词：溶失率
- 天然高分子细胞培养基质的研究进展被引量：1
- 2015年
- 天然高分子材料如壳聚糖、丝素蛋白和胶原蛋白等具有异体抗原性弱、生物相容性好、可生物降解且能促进细胞粘附、生长和增殖等优点。同人工合成高分子材料相比,天然高分子几乎不含有机溶剂和引发剂等物质,生物安全性高,是细胞培养基质的首选原材料。近年来,随着生物科技的发展,其新功能也不断被发现并受到学术界的广泛重视。本文综述了天然多糖类和天然蛋白质类高分子材料的理化性质及在细胞培养基质领域中的应用,对目前所存在的一些问题进行了描述并预测其发展动向。
- 龙仕和李明生靳冬武马忠仁冯玉萍
- 关键词：天然高分子生物相容性
- 牦牛乳酪蛋白降血压肽对高血压大鼠体内降压效果研究被引量：3
- 2014年
- 目的:观察牦牛乳酪蛋白降血压肽对应激性高血压大鼠(stress induced hypertensive rats,SIHR)和正常Wistar大鼠的降压效果,并与降压药物厄贝沙坦(irbesaran)和卡托普利(Captopril)的作用效果进行比较。方法:采用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶水解制备牦牛乳酪蛋白降血压肽,分别以20 mg/kg、40 mg/kg和60 mg/kg剂量的牦牛乳酪蛋白降血压肽一次灌胃,每隔2 h测量SIHR收缩压(SBP),连续测量8 h;长期实验持续6周,每天60 mg/kg一次灌胃,每隔1周测量SBP一次。结果:SIHR给予牦牛乳酪蛋白降血压肽后,血压均显著下降(P<0.05),并均在灌胃后3-6 h达最低,血压下降最大幅度为(27±5.13)mmHg,呈现一定的量效关系;而正常大鼠给予牦牛乳酪蛋白降血压肽后血压无显著变化,服用厄贝沙坦和卡托普利后血压则保持显著下降的趋势。长期灌胃牦牛乳酪蛋白降血压肽可使SIHR血压明显下降(P<0.05),并且降压效果稳定。结论:牛乳酪蛋白降血压肽对SIHR有明显的体内降压效果,长期服用可稳定血压,对正常大鼠血压无明显影响。
- 冯玉萍李倬张福梅陈诚田伟靳冬武龙仕和崔梦楠暴艳敏
- 关键词：牦牛乳应激性高血压大鼠降血压肽血管紧张素转化酶
- 牦牛胰酶的制备及其在水解乳蛋白中的应用研究
- 2015年
- 基于牦牛胰脏提取胰酶,以酶活力和收率作为衡量指标,在单因素实验的基础上通过正交实验,确定牦牛胰酶制备的最佳工艺,最后探讨胰酶水解酪蛋白制备水解乳蛋白的效果。结果表明,牦牛胰酶最佳制备工艺为牦牛胰脏∶25%乙醇(提取剂)=1∶1,提取激活时间为5h,激活p H=6.8,75%乙醇沉淀8h。所得胰酶中胰蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶的酶活力分别为1867、16298和5683 U/g,收率达9.7%;用其在温度40℃,p H7.5,酶与底物比例为1∶5的条件下水解酪蛋白4 h后所得的水解乳蛋白与Hyclone的水解乳蛋白相比较,有19种相同的氨基酸,且氨基酸总含量高于Hyclone的水解乳蛋白,分别为36.111%和27.725%。综上可知,该工艺简单,耗时短,易于产业化,在水解蛋白质领域中具有良好的应用前景。
- 靳冬武李明生龙仕和崔梦楠马素娟张健张磊李倬冯玉萍马忠仁
- 关键词：胰酶酶活力收率
- 细胞培养用琼脂微球的制备与初步应用被引量：1
- 2014年
- 用4%的琼脂溶液作为水相,环己烷为油相,司盘-80为乳化剂,采用乳化分散法制备了琼脂微球,再通过化学交联法固化.用DEAE-HCl修饰了微球表面的电荷密度,并通过正交试验优化了改性工艺,最终制得细胞培养用琼脂微球.通过对比研究了Cytodex1微载体与琼脂微球的表征及细胞培养效果.结果显示,最优改性工艺为:加入微球2倍体积4.5 mol/L的Na OH溶液,再加入微球2倍体积2.5 mol/L的DEAE-HCl溶液,在搅拌状态下加热至60℃,密闭反应4 h.最终制得琼脂微球表面电荷密度为4.00 mmol/100 g,与Cytodex1微载体的4.05 mmol/100g几乎相当.静置培养时,四种细胞在两种微球上的贴壁率和伸展性各有优劣.悬浮培养BHK-21细胞时,Cytodex1微载体表面出现一定程度的"空球"现象,而琼脂微球表面细胞较均匀地伸展.培养至120 h时,两种微球表面的细胞均达到4.5×107cells.继续培养,Cytodex1表面的细胞数开始下降,而琼脂微球表面仍增殖至168 h时才开始下降.综上所述,自制琼脂微球具备作为细胞培养用材料的条件.
- 崔梦楠李明生张健张磊马素娟龙仕和靳冬武冯玉萍
- 关键词：微载体细胞培养
- 水解乳蛋白的制备及在细胞培养中的初步应用被引量：4
- 2014年
- 采用正交法优化复合酶(胰酶和中性蛋白酶)水解凝乳酶干酪素制备水解乳蛋白(lacto-protein hydrolysate,LPH)的制备工艺,通过BHK和Vero细胞的培养效果检测水解乳蛋白的促细胞生长作用。结果显示水解乳蛋白的最佳制备工艺为:胰酶∶中性蛋白酶=2∶1(质量比),40℃,pH 7.0,酶/底物(E/S)=1∶5(质量比)水解6 h。所得产物氨基氮含量3.21 g/L,多肽含量35.63 g/L,游离氨基酸含量14.17 mg/mL,收率达40.20%。BHK和Vero细胞培养24 h,细胞密度均为各自空白的2.0倍,分别为Hyclone产品的1.0倍和0.86倍;培养48h,分别为各自空白的5.0倍和4.0倍,均为Hyclone产品的0.88倍。因此,该工艺简单,耗时短,制备得水解乳蛋白对BHK和Vero细胞生长有明显的促进作用。
- 田伟冯玉萍李明生崔梦楠靳冬武龙仕和马忠仁
- 关键词：细胞培养
- 酶解牦牛乳清蛋白制备ACE抑制肽的工艺研究
- 2013年
- 目的:乳清蛋白是牦牛乳中的重要成分,其经酶解制备的乳源性ACE抑制肽以安全性高和无副作用等优点在高血压的防治中具有重要的研究和应用价值.本实验研究利用乳清蛋白制备ACE抑制肽的工艺技术.方法:本实验对从牦牛乳中提取的乳清蛋白,分别根据碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶及胃蛋白酶各自的最适pH及温度,采用酶解法制备ACE抑制肽,以ACE抑制活性为指标初步筛选出最佳水解酶,并探究最佳酶水解乳清蛋白制备ACE抑制肽的最佳反应条件.结果:碱性蛋白酶为制备ACE抑制肽的最佳水解酶,其最佳反应条件为:pH8.5、温度60℃、E/S为5.5%、水解6 h.制备的ACE抑制肽抑制率可达到85.2%.结论:碱性蛋白酶为最佳酶选,用碱性蛋白酶制备的ACE抑制肽体外抑制率较高,符合工业生产要求.这为进一步优化乳清蛋白降血压肽的制备工艺提供依据.
- 冯玉萍李倬曾鸿运田伟靳冬武龙仕和崔梦楠暴艳敏马桂兰
- 关键词：牦牛乳乳清蛋白ACEACE抑制肽
- 胰酶水解凝乳酶干酪素工艺优化
- 2013年
- 以天然牧区凝乳酶干酪素为原料,用甲醛滴定法测定水解度,采用单因素试验和正交试验法优化牛源胰酶水解酪蛋白的工艺条件.结果显示,最优工艺条件为:40℃,pH=7.0,E/S=1∶5(重量比)水解4 h.产物水解度可达21.19%,收率达58.27%.
- 田伟冯玉萍李明生马忠仁靳冬武崔梦楠龙仕和
- 关键词：胰酶水解酪蛋白正交法
