于月华
- 作品数:115 被引量:186H指数:8
- 供职机构:新疆农业大学农学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金新疆维吾尔自治区自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 大豆GmNAC46生物信息学、转录自激活及组织表达分析
- 2023年
- NAC转录因子是一类广泛存在于植物中且为植物所特有的转录因子超家族,不仅调控植物的生长发育等方面,同时也响应植物受到的生物及非生物胁迫。为了研究大豆中NAC转录因子的功能,利用PCR的方法从大豆中克隆GmNAC46基因,采用生物信息学方法对该基因及编码的蛋白质进行分析,采用酵母单杂交实验分析转录因子的自激活活性,采用qRT-PCR的方法分析基因的组织特异性表达。结果表明:GmNAC46基因开放阅读框长1218 bp,编码405个氨基酸,蛋白质分子量为45.872 kD,等电点为4.88。GmNAC46蛋白在4~156位氨基酸处含有1个高度保守的NAC结构域,属于亲水性蛋白,定位于细胞核中。GmNAC46蛋白与野生大豆的NAC蛋白亲缘关系较近。酵母单杂交实验结果表明,转录因子GmNAC46具有转录自激活活性。组织特异性表达模式分析表明,GmNAC46基因在大豆根、茎、叶、子叶中都表达,在根中表达量最高。
- 杨梦诗倪志勇于月华
- 关键词:大豆生物信息学分析转录激活
- 大豆gma-miR169c启动子的克隆及植物表达载体构建被引量:1
- 2015年
- 本研究以大豆Williams 82基因组DNA为材料,根据预测的gma-mi R169c启动子序列设计引物,采用PCR方法克隆得到gma-mi R169c上游一段长度为1 935 bp的启动子序列。采用Plant CARE启动子在线预测工具分析表明,gma-mi R169c启动子序列具有TATA-box、CAAT-box基本的顺式作用元件和一些参与非生物胁迫和植物激素应答相关的顺式作用元件。将gma-mi R169c启动子部分缺失序列替代p BI121载体中的Ca MV35S启动子,构建了与GUS融合的启动子元件缺失表达载体。研究结果为进一步分析gma-mi R169c启动子元件的功能和调控机制奠定了基础。
- 倪志勇于月华任燕萍陈全家张桦曲延英
- 关键词:大豆启动子植物表达载体
- 大豆miR164家族的生物信息学分析被引量:3
- 2018年
- microRNA164是一个高度保守的miRNA家族,广泛参与植物的细胞和生理过程。本论文旨在采用生物信息学方法,了解大豆miR164基因家族在大豆生长发育及逆境胁迫应答过程中扮演的重要角色,为其在大豆的分子育种和品种改良方面的研究提供理论基础。利用miRNA、Plant MicroRNA Database、PLACE和NCBI数据库以及Clustal X2. 0、MEGA 5. 0和DNAMAN软件对gma-miR164基因家族的序列情况、染色体定位、靶基因调控功能、启动子元件、二级结构和系统发育树进行生物信息学分析。在miRBase中搜索到11条gma-miR164基因同源序列,分别分布在7条染色体上,其中以位于Chr3上的序列最多,共有3条,位于Chr10和Chr19上各有2条,而在Chr02、Chr09、Chr18和Chr20上各有1条。11个gma-miR164基因家族成员共预测到6个靶基因,均为NAC转录因子。gma-miR164基因家族成熟序列的碱基保守性很高,其前体序列均可形成稳定的二级茎环结构。启动子中顺式调控元件分析表明,ABRE、DRE、MYB和MYC这4个元件在gma-miR164基因家族启动子序列中分布不均,其中以MYB和MYC元件数目居多。本研究为探寻miR164基因家族在逆境胁迫应答中的调控作用提供了数据基础和理论依据。
- 滕露于月华何茹月陈全家倪志勇
- 关键词:大豆生物信息学启动子分析
- 一种鹰嘴豆种子筛分装置
- 本实用新型公开了一种鹰嘴豆种子筛分装置,属于农业辅助机械技术领域。该一种鹰嘴豆种子筛分装置包括机壳、进料斗、一级筛网、二级筛网、振动机构和电源装置,还包括:第一滑槽;调节机构,包括第一丝母套和第一滑块,第一丝母套外壁与第...
- 于月华倪志勇
- 小麦转录因子TaSIM的原核表达分析被引量:4
- 2013年
- 为了进一步研究TaSIM基因的功能,以pJET1.2-TaSIM质粒为模板,PCR扩增TaSIM基因的cDNA编码区,构建了该基因的原核表达载体pET-28a-TaSIM,经菌液PCR和测序鉴定后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。结果表明,在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达了与标签蛋白融合的TaSIM蛋白,大小约为33 kDa。SDS-PAGE电泳分析表明,最佳诱导表达条件为0.5 mmol/L IPTG在37℃下诱导2 h。
- 于月华耿洪伟陈全家高文伟王莉萍曲延英
- 关键词:小麦原核表达
- 大豆GmNF-YA3基因结构及原核表达分析被引量:2
- 2015年
- 分析大豆Gm NF-YA3基因结构,构建Gm NF-YA3基因的原核表达载体并进行表达,以期获得带有GST标签的目的蛋白。通过Phytozome数据库对Gm NF-YA3基因组DNA序列进行生物信息学分析,序列比对结果表明,Gm NF-YA3基因组DNA序列长度为4 589bp,由5个外显子和4个内含子组成。为了获得纯化的Gm NF-YA3蛋白,将保守域片段亚克隆到原核表达载体p GEX4T-1中,SDS-PAGE表明融合蛋白受异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导高水平表达,但主要以包涵体形式存在。本研究为进一步纯化和鉴定Gm NF-YA3蛋白及研究其功能奠定了基础。
- 汪晓东陈洋于月华王仁勤曲云壮倪志勇
- 关键词:大豆原核表达内含子
- 大豆GmbZIP27基因的克隆及表达分析
- 2024年
- bZIP蛋白是一类调控植物生长发育和抗性的转录因子。为探究大豆bZIP的生物学功能,利用PCR方法从大豆中克隆到1个bZIP基因GmbZIP27,对该基因进行生物信息学、表达模式和结合特异性分析。结果表明,GmbZIP27基因的开放阅读框长为825 bp,编码274个氨基酸,蛋白质分子质量为30.426 kD,等电点为8.54,含组氨酸和丝氨酸活性位点,为不稳定疏水蛋白,二级结构以α-螺旋和β-折叠为主。亚细胞定位分析发现GmbZIP27定位于细胞核。酵母单杂交实验表明GmbZIP27不能结合GmFBX176启动子中的ABRE元件。组织特异性表达模式表明,GmbZIP27在大豆组织中的相对表达量由高到低依次为子叶、根、叶和茎,推测GmbZIP27基因参与调控大豆的生长发育过程。本研究为深入解析bZIP转录因子在大豆发育及非生物胁迫应答中的功能提供一定理论依据。
- 胡浩鹿瑞昭王怡倪志勇于月华
- 关键词:大豆酵母单杂交
- 大豆Glyma08g11030基因结构及原核表达分析
- 2019年
- 为了进一步明确Glyma08g11030基因的功能,利用生物信息学和PCR的方法,对Glyma08g11030进行序列分析及蛋白结构域分析。生物信息学分析表明,该基因cDNA全长1419bp,开放阅读框长1362bp,编码453个氨基酸,蛋白质分子质量约为51.288ku,等电点为8.14。序列分析表明,Glyma08g11030基因组包含2个外显子和1个内含子。多序列比对结果表明,Glyma08g11030蛋白含有1个F-BOX保守域。进化树分析表明,该蛋白与木豆、菜豆、花生、豇豆、红小豆具有同源关系。为了获得纯化的Glyma08g11030蛋白,将扩增片段克隆至原核表达载体pET28a,构建重组质粒pET28a-Glyma08g11030,经过SDS-PAGE电泳检测获得了目的蛋白,结果表明,该蛋白主要以包涵体形式存在。为进一步纯化和鉴定Glyma08g11030蛋白及研究其功能奠定了基础。
- 王萍于月华白玉翠万会娜倪志勇
- 关键词:大豆原核表达
- GmbZIP73基因在调控大豆干旱耐性中的应用
- 本发明属于植物基因工程技术领域,具体地,涉及GmbZIP73基因在调控大豆干旱耐性中的应用。所述GmbZIP73基因编码氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的蛋白。本发明首次发现:干旱胁迫下,与野生型大豆复合体相比,过...
- 倪志勇于月华胡浩罗飞
- 新疆小麦过氧化物酶活性基因TaPod-A1等位变异检测及其分布规律被引量:5
- 2015年
- 对129份新疆小麦品种(系)进行等位变异检测,分析过氧化物酶(POD)活性基因的分布规律。结果表明,129份新疆小麦品种(系)资源中,有78份(60.5%)材料能扩增出291bp片段,说明含有TaPod-A1a,有51份(39.5%)材料能扩增出766bp片段,说明含有TaPod-A1b。其中,105份冬小麦中TaPod-A1a的分布频率为68.6%,TaPod-A1b为31.4%;24份春小麦中TaPod-A1a的分布频率为25.0%,TaPod-A1b为75.0%,新疆春小麦品种(系)过氧化物酶高活性TaPod-A1b基因的分布频率(75.00%)高于冬小麦(28.6%)。在105份新疆冬小麦品种(系)中,地方品种、引进品种(系)和自育品种(系)TaPod-A1b基因的分布频率分别为5.9%(1/17),44.4%(20/45)和27.9%(12/43)。而在24份新疆春小麦品种(系)中,早期品种和近期品种TaPod-A1b基因的分布频率分别为100.0%(4/4)和70.0%(14/20)。以上结果表明,在新疆小麦中低过氧化物酶活性等位变异品种(系)的比例明显高于高过氧化物酶活性等位变异品种;新疆冬小麦自育品种受地方品种影响较大,过氧化物酶低活性TaPod-A1a基因比例较高(68.6%);自育品种受地方品种和引进品种的影响较大,过氧化物酶高活性TaPod-A1b基因比例显著提升(27.9%)。
- 耿洪伟白璐于月华禹飞雄任毅时佳曲云壮郭龙曲延英
- 关键词:新疆小麦过氧化物酶基因