于生友
- 作品数：59 被引量：178H指数：7
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- 基于siRNA技术的TRPC6基因沉默对血管紧张素Ⅱ诱导的足细胞自噬和凋亡的影响被引量：2
- 2017年
- 目的采用小分子干扰RNA(siRNA)干扰技术沉默足细胞相关分子瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的自噬和凋亡的影响。方法设计、构建siRNA,转染足细胞,使TRPC6基因沉默,采用流式细胞术、激光共聚焦、透射电镜及Western Blot技术检测不同浓度siRNA转染后TRPC6基因表达,优化获得TRPC6基因沉默最佳效果的条件。体外培养小鼠肾小球足细胞,设立对照组、AngⅡ组、空载体组、沉默TRPC6基因组和AngⅡ+沉默TRPC6基因组。对照组用含0.02%DMSO的RPMI 1640培养液培养;AngⅡ组加入AngⅡ(10^(-8)M)刺激足细胞;空载体组加入空载体至足细胞;沉默TRPC6基因组运用siRNA干扰技术沉默TRPC6基因;AngⅡ+沉默TRPC6基因组同时加入AngⅡ(10^(-8)M)及沉默TRPC6基因。处理12、24 h和48 h后分别收集细胞,采用流式细胞仪检测足细胞凋亡率,Western Blot检测TRPC6及自噬相关蛋白的表达,透射电镜及激光共聚焦电子显微镜观察自噬相关蛋白的分布。结果自噬在正常足细胞的表达量很微弱,AngⅡ组足细胞凋亡率明显升高,沉默TRPC6使足细胞凋亡率明显降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。透射电镜下AngⅡ组示足细胞超微结构发生改变,自噬表达增加,胞质中出现独立双层膜结构,胞质成分及溶酶体等细胞器形成双层及多层膜结构的自噬体。沉默TRPC6使自噬表达下降,与AngⅡ组比较差异有统计学意义(P<0.05)。激光共聚焦检测AngⅡ组LC3-Ⅱ的表达增加,沉默TRPC6使LC3-Ⅱ表达趋于稳定,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论AngⅡ促进足细胞的凋亡,沉默TRPC6基因能有效保护AngⅡ诱导的肾小球足细胞损伤,发挥保护足细胞的作用。
- 于生友于力郝志宏张瑶
- 关键词：足细胞瞬时受体电位通道自噬
- 细菌溶解产物在预防儿童肾病综合征频繁复发中的应用被引量：5
- 2016年
- 目的观察细菌溶解产物(泛福舒)对预防儿童原发性肾病综合征(PNS)频繁复发的疗效,探讨其临床应用价值。方法选择诊断为PNS频繁复发型患儿50例,将其分为两组,对照组(22例)给予常规的泼尼松和(或)免疫抑制剂等综合治疗,观察组(28例)在常规的泼尼松和(或)免疫抑制剂治疗的同时加用泛福舒口服治疗6个月,观察6个月内两组患儿呼吸道感染次数、因呼吸道感染引起肾病复发次数以及尿蛋白由阳性转为阴性的时间。两组患儿在治疗前及治疗6个月后分别抽血查T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及免疫球蛋白Ig A、Ig G、Ig E和Ig M的变化及服药期间的不良反应。结果观察组呼吸道感染次数、因呼吸道感染引起肾病复发次数以及尿蛋白由阳性转为阴性的时间较对照组均明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组与对照组比较,治疗前各项指标差异无统计学意义(P>0.05),治疗后CD3+、Ig M无明显变化(P>0.05),而观察组CD4+、CD4+/CD8+、Ig A、Ig G高于对照组,CD8+、Ig E低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组PNS完全缓解15例,部分缓解10例,无效3例;对照组完全缓解11例,部分缓解6例,无效5例,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于PNS频繁复发的患儿,使用糖皮质激素和(或)免疫抑制剂治疗的同时,加用泛福舒可提高其机体免疫力,减少患儿呼吸道感染的次数,延长PNS缓解的时间,能有效预防呼吸道感染诱发的原发性肾病频繁复发及减少尿蛋白,较安全且不良反应少。
- 葛林于力于生友陆玮
- 关键词：细菌溶解产物肾病综合征细胞免疫体液免疫儿童
- 自噬相关基因LC3在阿霉素肾病中mRNA表达的意义
- 2020年
- 目的探讨自噬相关基因LC3在阿霉素肾病中mRNA表达的意义及其与肾脏疾病发生发展的关系。方法模型组:建立阿霉素肾病大鼠模型12只,予尾静脉注射阿霉素6.5 mg/kg,对照组:正常大鼠12只,予尾静脉注射等量生理盐水。造模成功后分别于2、4、8周时,检测两组生化指标:血清白蛋白(Alb)、总胆固醇(TC)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白量;采用荧光定量PCR检测LC3的mRNA表达。结果模型组随着时间延长,出现大量蛋白尿、低蛋白血症、高脂血症、进行性肾功能损害。RT-PCR检测结果显示,模型组LC3 mRNA表达量在第2周时明显增高,随时间延长开始逐渐下降,在第4~8周表达量达到相对稳定高水平,但均低于第2周。模型组在2、4、8周各个时间点的LC3 mRNA表达量均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论自噬的活性程度与肾组织损伤程度关系密切,自噬参与肾脏细胞的损伤修复和肾脏疾病的转归,提示通过影响自噬活性来研究和治疗肾脏疾病的一种可能性。
- 翁维维于生友于力王丽娜
- 关键词：自噬LC3肾病阿霉素
- 11例小儿非典型川崎病的临床分析
- 目的探讨我院住院期间小儿非典型川崎病的临床特点及早期诊断。方法对11例非典型川崎病患儿的临床特点、实验室检查及治疗效果进行回顾性分析。结果11例非典型川崎病最常见的临床表现是球结膜充血、淋巴结肿大、皮疹,而口唇潮红皲裂、...
- 于生友邓颖于力
- 他克莫司治疗儿童激素依赖型与耐药型肾病综合征疗效评价
- :探讨他克莫司(FK506)治疗儿童激素依赖型与激素耐药型肾病综合征(NS)的临床疗效和安全性.方法:选择2007年6月至2011年12月在广州医学院附属广州市第一人民医院儿科住院的NS患儿42例,其中激素依赖型NS(S...
- 于生友于力王丽娜郝志宏
- 关键词：激素耐药型肾病综合征激素依赖型肾病综合征儿童患者
- 他克莫司治疗儿童激素依赖型与耐药型肾病综合征的疗效评价
- 目的 探讨他克莫司 (FK506)治疗儿童激素依赖型与激素耐药型肾病综合征(NS)的临床疗效和安全性.方法 选择2009 年6 月至2013 年12 月在广州医学院附属广州市第一人民医院儿科住院的NS 患儿42 例,其中...
- 于生友于力郝志宏
- 咪唑立宾治疗儿童激素依赖性肾病综合征的疗效观察
- 邓颖于生友于力郝志宏
- 甘草甜素及地塞米松对体外培养足细胞增殖的影响研究被引量：1
- 2012年
- 目的通过建立嘌呤霉素(PAN)诱导小鼠足细胞MPC5损伤模型,观察甘草甜素(GL)及地塞米松(DEX)对足细胞及受损足细胞增殖的影响作用,探讨GL在体外培养足细胞损伤中是否具有类似DEX的防护作用。方法体外培养小鼠足细胞,分为对照组、PAN组、GL组、DEX组、PAN+GL组、PAN+DEX组。对照组采用RPMI-1640培养液培养;PAN组加入终浓度50mg/LPAN;GL组加入不同浓度的GL,终浓度分别为50、100、200、400、600、800mg/L;DEX组加入终浓度1μmol/LDEX;PAN+GL组同时加入PAN(终浓度50mg/L)和GL(终浓度分别为50、100、200、400、600、800mg/L);PAN+DEX组同时加入PAN(终浓度50mg/L)和DEX(终浓度1μmol/L),培养24h及48h,采用MTT检测细胞的增殖活性。结果与对照组相比,PAN组24h及48h时足细胞增殖的光密度(A)值均明显降低(P<0.01),抑制率(IE)分别为55.56%、59.10%;GL组中不同浓度组24h时A值较对照组均明显降低(P<0.01),48h时GL50mg/L组A值与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),其余各组A值较对照组均明显降低(P<0.01);低浓度GL组(100～400mg/L)对足细胞的IE48h较24h明显下降,高浓度GL组(600～800mg/L)对足细胞的IE48h较24h明显升高。DEX组24、48h足细胞增殖A值较对照组均明显降低(P<0.01),48h时足细胞的IE较24h时差异无统计学意义(P>0.05)。PAN+GL组50～600mg/L浓度范围内,24h、48h时足细胞增殖A值均呈剂量依赖性升高(P<0.01),但PAN+GL组800mg/L浓度时足细胞增殖活性不再增加。PAN+DEX组24、48h时足细胞增殖A值均明显升高(P<0.01)。结论 PAN能显著抑制足细胞增殖,GL及DEX对体外培养的正常足细胞增殖有轻微抑制作用,但二者均能促进受损足细胞的增殖,且GL在一定范围内呈剂量依赖性关系,对PAN诱导足细胞损伤具有类似DEX的防护作用。
- 王丽娜余治奇于力于生友吴汪丽
- 关键词：甘草甜素地塞米松足细胞
- 咪唑立宾治疗儿童激素依赖性肾病综合征的疗效观察被引量：7
- 2013年
- 目的观察分析咪唑立宾治疗儿童激素依赖性肾病综合征的临床疗效。方法 10例激素依赖性肾病综合征患儿入院后口服咪唑立宾,剂量为5 mg/(kg.d),疗程3个月,同时联合标准激素治疗1.5 mg/(kg.d)。治疗前及治疗后8、12周观察24 h尿蛋白定量、血浆白蛋白、血浆胆固醇、血肌酐、尿素氮等指标。10例中8例行肾活检,了解病理类型。结果 10例患儿经治疗后,完全缓解6例(60%),部分缓解2例(20%),未缓解2例(20%)。患儿治疗后各项生化指标均较治疗前明显好转,治疗前后结果差异有统计学意义(P<0.05)。8例肾活检病理为微小病变型2例,系膜增生性肾炎4例,局灶节段性肾小球硬化2例。结论咪唑立宾联合激素能有效治疗儿童激素依赖性肾病综合征,值得临床应用。
- 邓颖于力于生友
- 关键词：咪唑立宾肾病综合征激素儿童
- 地塞米松对肾小球足细胞瞬时受体电位阳离子通道蛋白6表达和分布的影响被引量：3
- 2014年
- 目的以嘌呤霉素（PAN）损伤足细胞，以地塞米松（DEX）干预，观察不同时间点瞬时受体电位阳离子通道蛋白6（TRPC6）表达和分布的变化，探讨在足细胞损伤过程中，DEX对TRPC6表达与分布的影响及与足细胞损伤的关系。方法体外培养足细胞，设立对照组、PAN刺激组和DEX干预组。对照组用含0．02％二甲亚砜（DMSO）的RPM11640培养液培养，PAN刺激组加入PAN（50μg／m1），DEX干预组同时加入PAN（50μg/m1）和溶解于0．02％DMSO的DEX（1μmol/L），处理8h、24h、48h后观察细胞形态并拍摄，采用图像处理软件分析各组细胞形态及胞体面积的差别。采用流式细胞仪检测足细胞凋亡率，采用实时荧光定量PCR、Western印迹和间接免疫荧光染色检测各时间点TRPC6的mRNA、蛋白表达及分布变化。结果经PAN刺激后细胞体显著缩小（P〈0．05），足突回缩、消失，细胞间失去相互连接，刺激后48h足细胞凋亡率显著升高（P〈0．05）。PAN刺激组在刺激24h和48h后TRPC6mRNA及蛋白表达量显著上升（P〈0．05），TRPC6在足细胞上的分布亦出现异常。DEX干预后细胞胞体显著大于PAN刺激组（P〈0．05），可维持正常的足突形态；干预48h后足细胞凋亡率显著低于PAN刺激组，TRPC6mRNA及蛋白的表达、分布均趋于正常水平。结论DEX通过稳定重要的足细胞分子TRPC6的表达及分布来抑制足细胞损伤，从而发挥保护足细胞和抗蛋白尿的作用。
- 王辉阳于力于生友郝志宏张瑶
- 关键词：足细胞地塞米松
