倪蓉
- 作品数：15 被引量：27H指数：3
- 供职机构：扬州大学动物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：江苏省农业科技支撑计划项目江苏高校优势学科建设工程资助项目江苏省研究生培养创新工程项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 湖羊不同花纹皮肤组织差异表达基因的筛选被引量：4
- 2013年
- 【目的】旨在了解中国特有的白色羔皮羊品种—湖羊不同花纹及其毛囊形成的分子遗传学机理。【方法】利用安捷伦基因芯片技术筛选初生湖羊大花和小花皮肤组织差异表达基因。【结果】差异表达分析显示,3对大花和小花组分别筛选出1 069、2 071和3 879个差异表达基因,共有137个共同基因;差异基因经GO分类显示,主要参与细胞分化、增殖、凋亡、发育、免疫应答、离子转运等生物学过程;另外,所验证的4个差异表达基因的荧光定量PCR结果与芯片结果基本一致。【结论】筛选出了BMP7、MMP2、SNAI1、SFXN1、CDKNIC、MT3、POU1F1等对湖羊大花、小花性状形成可能具有重要影响的候选基因。
- 孙伟倪蓉殷金凤丁家桐张有法陈玲吴文忠周洪
- 关键词：湖羊毛囊基因芯片
- 对湖羊羔皮形成遗传机理的探讨被引量：1
- 2012年
- 湖羊是稀有的羔皮羊地方品种,湖羊所产在一二天内未乳幼羔宰剥而成的羔皮称为"小湖羊皮"。小湖羊皮具有中国"软宝石"之称,它的皮板轻而柔软,毛色洁白,毛稠而短,毛穗呈水波型,毛根无绒,扑而不散,光泽如丝,深受消费者的欢迎,在国际市场上享有盛誉。然而湖羊作为国宝级的珍贵品种资源,目前正面临杂种羊的威胁。由于湖羊产区曾经进行了较广泛的细毛羊杂交,导致现在湖羊基因混杂,湖羊种质已经开始退化,湖羊羔皮品质明显变差,很难找到毛丝光润。
- 倪蓉孙伟张有法沈国忠陈玲吴文忠周洪
- 关键词：杂种羊皮板基因片段
- 湖羊BMP7基因遗传多态、表达及与其羔皮毛囊性状的关联分析
- 殷金凤倪蓉孙伟王庆增丁家桐张有法陈玲吴文忠周洪
- 关键词：湖羊BMP7多态性毛囊
- 湖羊BMP7基因遗传多态、表达及与羔皮毛囊性状的关联被引量：2
- 2014年
- 【目的】研究BMP7基因对湖羊不同花纹形成的影响及其与毛囊性状的发育可能存在的调控机制。【方法】利用PCR-SSCP方法在205个样本中检测BMP7基因外显子1、2、3的单核苷酸多态性;通过组织学方法和显微观察法对湖羊皮肤毛囊进行组织学观察,对不同花纹皮肤组织中初级毛囊直径、次级毛囊直径、初级毛囊数、次级毛囊数进行统计分析;利用荧光定量PCR技术检测BMP7基因在大花、中花、小花间的相对表达量,用SPSS17.0软件进行差异显著性分析,探讨BMP7基因对湖羊不同花纹形成及其毛囊性状可能存在的调控机制。【结果】PCR-SSCP方法检测BMP7基因外显子1、2、3的单核苷酸多态性,结果均未发现多态性;在组织切片分析中,湖羊大花初级、次级毛囊直径均大于中花、小花,小花初级、次级毛囊直径均介于大花、中花之间;大花次级毛囊数多于中花、小花,而小花次级毛囊数介于大花、中花之间。通过差异显著性分析可知,湖羊大花与中花、小花初级毛囊直径呈极显著差异(P<0.01),小花与中花初级毛囊直径差异不显著(P>0.05);中花次级毛囊直径与大花、小花次级毛囊直径呈极显著差异(P<0.01),但小花次级毛囊直径与大花次级毛囊直径差异不显著(P>0.05);初级毛囊数大花、中花、小花间差异均不显著(P>0.05),但相同视野中大花初级毛囊数多于中花、小花;中花次级毛囊数与大花、小花次级毛囊数呈极显著差异(P<0.01),但大花、小花次级毛囊数差异不显著(P>0.05);qRT-PCR结果显示,在同一时期BMP7基因在大花、中花中的表达量高于小花,且在大花、小花毛囊组织中表达量差异显著(P<0.05);BMP7基因相对表达量与小花初级毛囊直径呈显著正相关(P<0.05),与小花次级毛囊数呈极显著正相关(P<0.01),与中花初级毛囊直径和中花次级毛囊数呈显著负相关(P<0.05),这与组织学与显微镜观察的结果相符。
- 殷金凤倪蓉王庆增孙伟丁家桐张有法陈玲吴文忠周洪
- 关键词：湖羊BMP7多态性毛囊
- 对湖羊羔皮形成遗传机理的探讨
- 湖羊是稀有的羔皮羊地方品种，湖羊所产在一二天内未乳幼羔宰剥而成的羔皮称为“小湖羊皮”。本文阐述了小湖羊皮的分级方法及标准，从遗传因素、种公羊的优劣、产羔季节、一胎产羔数等方面分析了影响小湖羊皮品质的因素，并介绍了关于湖羊...
- 倪蓉孙伟张有法沈国忠陈玲吴文忠周洪
- 关键词：湖羊小湖羊皮
- 徐淮山羊多能性转录因子mRNA制备及在成纤维细胞中的表达
- 2014年
- 【目的】克隆徐淮山羊多能性转录因子0ct4、Sox2、K1f4和c—Myc的CDS片段,构建pMD19-T—oct4、pMD19-T—sox2、pMD19-T—k1f4和pMD19-T—c—myc重组质粒,随后构建含T7启动子的pcDNA3-oct4、pcDNA3-sox2、pcDNA3-k1f4和pcDNA3-c—myc重组质粒,通过体外转录,获得该4种多能性转录因子的mRNA,并使其在徐淮山羊成纤维细胞中稳定表达。【方法】应用RT—PCR方法分别从徐淮山羊睾丸组织、皮肤组织、小肠组织中扩增多能性转录因子Oct4、Sox2、K1f4和c—Myc基因编码全序列,将该4种基因分别克隆到pMD19-T载体,构建pMD19-T—oct4、pMD19-T—sox2、pMD19-T-k1f4和pMD19-T—c—myc重组质粒。然后将pcDNA3.0载体和pMD19-T重组载体双酶切后用T4连接酶连接,构建含有T7启动子的真核表达载体pcDNA3-oct4、pcDNA3-sox2、pcDNA3-k1f4和pcDNA3-c—myc重组质粒。各重组质粒分别用限制性内切酶XhoI、XbaI单酶切,酶切后质粒模版按照体外转录试剂盒说明体外转录获得各多能性转录因子的mRNA,并对获得的mRNA进行检测,确定其稳定性和浓度。按照脂质体(体积):mRNA(质量)为1:1的比例用脂质体2000转染。转染24 h后,利用Western blot技术、间接免疫荧光实验检测徐淮山羊多能性转录因子Oct4、Sox2、K1f4和c—Myc基因的mRNA在成纤维细胞中的表达。【结果】①克隆得到的徐淮山羊0ct4、Sox2、K1f4和c—Myc基因编码序列全长分别为1 083、962、1 434和1 320 bp,并经TA克隆测序验证,其CDS序列与绵羊、人、牛和猪等的序列相似性在89%以上;②体外转录获得的4种多能性转录因子的mRNA经脂质体转染徐淮山羊成纤维细胞,在成纤维细胞中均定位于细胞核;③4种多能性转录因子的mRNA在徐淮山羊成纤维细胞中表达的蛋白与预期大小一致,分别为38、34、50和48 kd。【结论】成功克隆了徐淮山羊Oct4、Sox2、K1f4和c—Myc基因,该4种多能性转录因子的mRNA能够在徐淮山羊成纤维细胞中稳定
- 邱峰龙张亚妮倪蓉李伟陈庭锋韦光辉李碧春
- 关键词：徐淮山羊体外转录MRNA
- 徐淮山羊PRLR和INHBA基因的多态性及其与产羔数的关联分析被引量：5
- 2014年
- 本实验以徐淮山羊产羔性状作为研究对象,以波尔山羊作为参照群体,采用PCR-SSCP方法分析PRLR基因和INHBA基因在2个群体中的单核苷酸多态性(SNP),并分析其与徐淮山羊群体产羔数性状的关联性。结果表明:所设计的5对引物在波尔山羊群体中的扩增片段都没有多态性,在徐淮山羊种中,引物2和引物5的扩增片段有多态性、引物2有AA和AB 2种基因型,引物5有CC和CD 2种基因型。经测序得知,AB型与AA型相比,PRLR基因外显子10在第307 bp处发生A→G的突变,CD型与CC型相比较,INHBA基因在1042 bp处发生T→A的突变。PRLR基因的AA和BB基因型的产羔羊数性状的最小二乘均值以及INHBA基因的CC和DD基因型的产羔羊数性状的最小二乘均值差异均不显著(P>0.05)。研究结果初步表明,检测的PRLR基因位点及其INHBA基因位点对徐淮山羊高繁殖力没有显著影响。
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- 关键词：PRLR基因多态性产羔数徐淮山羊
- 利用基因芯片技术筛选湖羊毛囊相关基因
- 本试验利用基因芯片技术筛选湖羊大花和小花背侧部皮肤组织中的差异表达基因，共筛选出137个差异表达基因，经GO分类显示部分基因参与细胞的增殖、分化、凋亡、发育、代谢、免疫应答等生物学过程，MMP2, BMP7, SNAIL...
- 倪蓉孙伟张向楠李达张玉龙
- 关键词：毛囊生长基因芯片技术
- 初产和经产湖羊母性行为比较研究被引量：2
- 2014年
- 良好的母性行为是仔畜存活和适应环境的关键,故母性行为与畜牧生产的收益密切相关。本研究以99只湖羊为研究对象,通过录像资料记录数据,利用生物统计方法探讨初产、经产母羊母性行为的差异,旨在发现湖羊母性行为的表现规律,以期为制定适合其生长繁育的管理措施提供依据。结果表明:初产母羊的分娩时间比经产母羊的长,且在产双羔组差异显著(P<0.05),在单羔和多羔组中差异不显著(P>0.05)。两组母羊抛弃羔羊和偷盗羔羊发生率均差异显著(P<0.05),而寻找、舔舐和踩踏行为无显著性差异(P>0.05);拒绝哺乳行为和哺乳行为差异均极显著(P<0.01);两组羔羊7日龄重差异显著(P<0.05)。综上可知,初产母羊比经产母羊更容易表达异常母性行为。
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- 关键词：初产母性行为湖羊
- 徐淮山羊FSHβ基因的多态性及其与繁殖力的关联分析被引量：3
- 2012年
- 本研究选用75只徐淮山羊作为实验动物,将FSHβ基因第2外显子作为影响山羊产羔性状的候选基因,对其第2外显子进行扩增、测序、序列比对和PCR-SSCP检测,探讨FSHβ基因第2外显子的遗传特征,从而寻找与产羔数相关的遗传标记,为徐淮山羊繁殖力标记辅助选择提供依据。结果表明:徐淮山羊FSHβ基因有AA、AB和AC 3种基因型,基因型频率分别为0.3867、0.5067和0.1066。AB型与AA型相比在外显子2的第174 bp有一处C→T沉默突变,AC型与AA型相比在外显子2的第185 bp发生G→A突变,并引起氨基酸的改变(精氨酸→谷氨酰胺)。AA基因型徐淮山羊产羔数最小二乘均值比AB型的多0.2632只(P>0.05),比AC基因型的多0.75只(P<0.05)。本研究初步认为FSHβ基因可能是控制徐淮山羊多胎性能的一个主效基因或是与之存在紧密遗传连锁的一个标记。
- 张玉龙李达孙伟倪蓉张向楠花为华周洪陈家振储明星
- 关键词：FSHΒ基因多态性繁殖力徐淮山羊
