刘铁刚
- 作品数：13 被引量：12H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金南京市医学科技发展项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 以VEGF为靶点的shRNA表达载体的构建及其体外抗肿瘤侵袭转移活性的研究
- 自Folkman于20世纪70年代初提出“肿瘤的生长依赖于血管生成”这一假说后，针对血管生长的研究不断深入，“饿死肿瘤”已成为人们攻克肿瘤的一个新思路。本文通过RNA干扰技术，以VEGF cDNA不同部位为靶点，设计3段...
- 张敏何红伟刘铁刚邵荣光
- 关键词：治疗靶点RNA干扰纤维肉瘤
- 文献传递
- Caspase 3在大肠杆菌E.coliBL21中表达和活性的研究被引量：1
- 2005年
- 目的:研究凋亡蛋白酶Caspase 3在大肠杆菌中的表达及活性。方法:用PCR法扩增出Caspase3基因cDNA,然后插入pCMV-Myc载体,扩增后克隆至表达载体pGEX-6p,使用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导Caspase 3蛋白的表达;应用SDS-PAGE和W estern b lot法鉴定其性质。结果:经测定诱导3 h后Caspase 3活性最高。结论:可在大肠杆菌E.coliBL21中诱导表达出有活性的Caspase 3,为研究其在细胞凋亡中的作用奠定了基础。
- 孙新臣刘铁刚
- 关键词：CASPASE基因表达活性测定
- 一组新型抗肿瘤基因治疗药物短干扰核糖核酸
- 本发明利用生物计算机信息技术从GenBank中获得一组与人类肿瘤相关的基因序列，并以RNA干扰技术为基础，设计出一组可能诱发RNA干扰的siRNA，通过化学法合成一定量的siRNA，以此作为新型抗肿瘤药物具有高效、特异的...
- 邵荣光刘铁刚殷勤伟张敏
- 文献传递
- 一种可同时表达多种shRNA的载体pCSH1－n及其构建方法
- 本发明涉及一种可同时表达多种shRNA的载体pCSH1－n，可在一个载体上同时实现对多个基因的干扰，所说载体pCSH1包含有基本质粒序列、shRNA转录单位和两组多克隆位点，插入针对靶基因的shRNA模板后，转染细胞或动...
- 邵荣光何红伟刘铁刚张敏李保卫边春景刘霞封云
- 文献传递
- 依赖RNA的RNA聚合酶介导RNA干扰的扩增效应被引量：3
- 2003年
- RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种非常高效的基因沉默效应,RNA依赖性RNA聚合酶(RNA-de-pendent RNA polymerase,RdRP)介导的扩增作用可能是RNAi具有高效性的一个主要原因。了解RdRP在生物体中存在的证据、RdRP及其复合体的结构、次级siRNA的产生及转移性RNAi的发生机制等问题,对深入理解RNAi的作用机制和促进RNAi的临床应用有重要意义。
- 刘铁刚张敏邵荣光
- 关键词：RNA干扰
- 多种siRNA的抗肿瘤作用研究被引量：1
- 2004年
- 目的:研究短干扰RNA(short interfering RNA,siRNA)的抗肿瘤作用。方法:采用MTT法检测siR-NA的生长抑制作用,H&E染色法观察细胞形态变化,TUNEL标记法检测核DNA断裂,Western Blot法分析蛋白表达水平变化和流式细胞法检测细胞周期分布变化。结果:siRNA-Bcl2,siRNA-MDM2,siRNA-CDK2和siRNA-HRas可以明显抑制人乳腺癌MCF-7等肿瘤细胞的生长;siRNA-MDM2和siRNA-Bcl2可以引起MCF-7细胞染色质凝集;siRNA-Bcl2,siRNA-MDM2,siRNA-CDK2和siRNA-HRas均可以明显降低靶基因的表达水平,同时诱导MCF-7细胞发生染色体DNA断裂;siRNA-MDM2还可以导致MCF-7细胞发生G1期阻滞。结论:siRNA可以明显抑制肿瘤细胞的生长,降低靶基因的表达水平,并诱导肿瘤细胞凋亡和周期阻滞,提示siRNA可能发展成为一类高效特异的新型抗肿瘤药物。
- 刘铁刚尚伯杨殷勤伟张敏何红伟甄永苏邵荣光
- 关键词：肿瘤细胞细胞凋亡
- 一种可同时表达多种shRNA的载体pCSH1－n及其构建方法
- 本发明涉及一种可同时表达多种shRNA的载体pCSH1-n，可在一个载体上同时实现对多个基因的干扰，所说载体pCSH1包含有基本质粒序列、shRNA转录单位和两组多克隆位点，插入针对靶基因的shRNA模板后，转染细胞或动...
- 邵荣光何红伟刘铁刚张敏李保卫边春景刘霞封云
- 文献传递
- microRNAs在动物体内的功能被引量：7
- 2005年
- microRNAs(miRNAs)是最近发现的一类非编码小RNA分子,具有序列特异性调节基因表达的功能。在动物体内已发现上百种miRNA基因,这些基因在不同的物种之间具有序列保守性,它们参与动物体发育、细胞增殖与死亡、细胞分化、激素分泌、肿瘤形成等各种过程。本文概述了miRNA的作用机制,重点总结了近年来在动物miRNA功能研究方面所取得的进展。miRNA无沦在数量还是功能上,可能都远远超过目前的发现,对其进行深入研究,将有助于我们对生物体各种生理病理机制的理解,并最终可能为疾病的诊断和治疗提供新的思路和理论基础。
- 边春景刘铁刚刘霞邵荣光
- 关键词：MICRORNA基因调控激素分泌肿瘤形成
- 一种可稳定表达VEGF shRNA的载体pCD－VEGF
- 本发明涉及一种可在哺乳动物细胞内稳定表达VEGFshRNA的载体以及所说载体在肿瘤细胞侵袭转移中的抑制作用，研究结果表明，针对VEGF基因设计的pCD-VEGF载体转染细胞后，可削弱细胞对基底膜的侵袭能力，降低细胞的运动...
- 邵荣光张敏刘铁刚何红伟欧阳志钢张胜华
- 文献传递
- 一种可稳定表达VEGF shRNA的载体pCD－VEGF
- 本发明涉及一种可在哺乳动物细胞内稳定表达VEGF shRNA的载体以及所说载体在肿瘤细胞侵袭转移中的抑制作用，研究结果表明，针对VEGF基因设计的pCD－VEGF载体转染细胞后，可削弱细胞对基底膜的侵袭能力，降低细胞的运...
- 邵荣光张敏刘铁刚何红伟欧阳志钢张胜华
- 文献传递
