目的外源性分化抑制因子3(inhibitor of differentiation 3,Id3)是一种重要的转录调控因子,参与肿瘤发生、细胞增殖和凋亡等过程,文中研究Id3基因表达对人肺腺癌A549细胞迁移性、侵袭性和增殖能力的影响。方法构建人Id3基因和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorecence protein,EGFP)真核表达载体pEGFP/Id3,用脂质体转染技术将pEGFP/Id3导入A549细胞,荧光显微镜观察细胞内EGFP的表达情况;RT-PCR分析转染后A549细胞Id3mRNA的表达情况;细胞划痕试验和侵袭小室法检测Id3基因对A549细胞迁移和侵袭能力的影响。平板细胞克隆形成试验测定Id3对A549细胞增殖的影响。结果成功将pEGFP/Id3融合基因转染于A549细胞,荧光显微镜下发出强绿色荧光,pEGFP/Id3转染组的Id3/GAPDH为1.274±0.035,较pEGFP转染组(0.584±0.011)和空白对照组(0.636±0.035)明显上调,差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示转染后Id3基因成功表达,细胞划痕实验和侵袭小室法显示转染pEGFP/Id3可明显降低A549细胞的迁移和侵袭能力,pEGFP/Id3转染组48 h的细胞迁移数明显低于空白对照组[(113.75±25.04)个]、[(254.75±41.06)个]和pEGFP转染组[(228.25±26.84)个],差异有统计学意义(P<0.01)。平板克隆试验结果提示外源性Id3可抑制A549细胞增殖,pEGFP/Id3转染组的克隆形成率[(15.67±5.75)%]明显低于空白对照组[(37.83±4.16)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论外源性Id3基因可抑制A549细胞转移及其增殖能力。
