剧慧栋
- 作品数：19 被引量：72H指数：6
- 供职机构：石家庄市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：石家庄市科学技术研究与发展计划河北省重大科技攻关项目河北省高等学校科学技术研究指导项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 石家庄市集中空调冷却塔水中嗜肺军团菌的基因序列分型研究
- 2012年
- 目的采用基因序列分型方法(sequence-based typing,SBT)研究石家庄市集中空调冷却塔水中军团菌基因特征。方法将石家庄市集中空调冷却塔水中分离出的35株Lp1血清型嗜肺军团菌提取基因组DNA,选取嗜肺军团菌7个管家基因flaA、pilE、asd、mip、mompS、proA、neuA进行PCR扩增,将扩增产物纯化后测序。测序结果上传欧盟军团菌感染工作组(EWGLI)数据库进行比对,得到基因型别(sequence type,ST),对结果进行基因序列分型和系统进化分析。结果 35株Lp1血清型嗜肺军团菌共分为4个ST型,其中1株由于neuA基因不能被扩增而未分型;1株为新的ST型,已获EWGLI分配序号(ST1021);其余为ST1型32株,ST345型1株。结论石家庄市集中空调冷却塔水中嗜肺军团菌分离株的流行以ST1型为主,ST345型和ST1021型为特有型别。SBT分型可以作为研究嗜肺军团菌进化关系的重要手段之一。
- 郭玉梅周吉坤剧慧栋秦丽云王苋徐保红吕国平
- 关键词：嗜肺军团菌基因型
- PCR-焦磷酸测序技术检测奶牛乳房炎4种主要致病菌方法的建立被引量：2
- 2012年
- 应用PCR-焦磷酸测序技术(pyrosequencing)一种新型快速检测奶牛乳房炎(bovine mastitis)4种主要致病菌无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、停乳链球菌(S.dysgalactiae)、沙门氏菌(Salmonella sp.)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的方法。根据GenBank中无乳链球菌的sip基因、停乳链球菌的isp基因、沙门氏菌的stn基因和金黄色葡萄球菌的clfa基因的序列信息,分别设计各基因保守区段的PCR扩增引物及焦磷酸测序引物。分别以108株无乳链球菌、100株停乳链球菌、136株沙门氏菌、203株金黄色葡萄球菌,以及多株其他参照菌为模板,轮流使用上述各扩增引物进行PCR扩增目的基因片段。随后采用焦磷酸测序技术针对阳性PCR扩增片段进行核苷酸保守区段的测序分析。最终得到预期的PCR扩增和焦磷酸测序结果,且实验结果具有可靠的重复性。PCR-焦磷酸测序技术适用于上述奶牛乳房炎4种主要致病菌的检测鉴定,具有准确、快速等优点。
- 剧慧栋李月颖张乐祎李秀娟赵宝华徐保红
- 关键词：奶牛乳房炎无乳链球菌停乳链球菌
- 变形杆菌β-内酰胺酶耐药基因分子特征被引量：3
- 2016年
- 目的研究石家庄市2011—2014年食品及食物中毒分离的129株奇异变形杆菌(P.mirabilis)耐药及基因分子特征。方法选取BD Phoenix全自动细菌鉴定/药敏系统初筛可疑产β-内酰胺酶的奇异变形杆菌菌株,用PCR方法检测超广谱β-内酰胺酶基因(bla TEM、bla SHV、bla CTX-M-1、bla CTX-M-2、bla CTX-M-9、bla CTX-M-13)、Amp C基因(bla DHA、bla CMY)和碳青霉烯酶基因(bla VIM、bla IMP、bla OXA),并对其进行测序。结果 116株(占89.9%)奇异变形杆菌检出耐药基因,经DNA测序后最常见基因型为bla OXA-320(n=102),其次是bla CTX-M-14(n=61)、bla TEM-1(n=36)和bla CMY-2(n=11),其他耐药基因未检出。27株(占20.9%)奇异变形杆菌携带单一耐药基因,89株(占69.0%)携带两种及以上耐药基因。菌株ESBLs流行模式主要为CTX-M-14+OXA-320(占38.8%),其次是TEM-1+OXA-320(占18.6%),再次为OXA-320(占14.7%)。结论首次在变形杆菌中检出OXA-320型碳青霉烯酶,变形杆菌ESBL流行模式为CTX-M-14+OXA-320,单菌株可同时存在多种耐药机制。
- 郭玉梅张慧贤秦丽云王苋剧慧栋
- 关键词：奇异变形杆菌Β-内酰胺酶耐药基因型
- 熟肉及速冻米面食品中变形杆菌污染状况及耐药特征分析被引量：7
- 2016年
- 目的了解石家庄市市售熟肉制品和速冻米面食品中变形杆菌的污染状况,进一步研究菌株产超广谱β-内酰胺酶和对抗生素的耐药性。方法采取石家庄市市售熟肉制品和速冻米面食品进行变形杆菌分离培养,用BD Phoenix专家系统对所分离出的菌株进行鉴定和药敏试验。结果 377份样品中共有83份检出变形杆菌,总污染率为22.0%。其中熟肉制品、生制速冻米面食品和熟制速冻米面食品变形杆菌污染率分别为20.8%（32/154）、28.7%（43/150）和11.0%（8/73）;变形杆菌计数范围为10^3-10^9cfu/g。药敏结果显示,80株奇异变形杆菌除对四环素和多粘菌素存在天然耐药外,对氨苄西林耐药率最高（36.3%,26/80）,其次是头孢唑林（27.5%,22/80）;3株普通变形杆菌除对四环素、多粘菌素、氨苄西林和头孢唑林存在天然耐药外,且均对氯霉素耐药。所有菌株均对阿米卡星、美罗培南、哌拉西林敏感。所分离的奇异变形杆菌中,有25.0%-33.3%产生超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）;多重耐药（MDR）菌株占12.5%-33.3%。结论石家庄市市售熟肉及速冻米面食品中变形杆菌污染较严重,分离株产ESBLs和MDR水平较高,有潜在引起食源性疾病的风险。
- 郭玉梅秦丽云剧慧栋王苋刘琳
- 关键词：变形杆菌熟肉食源性致病菌超广谱Β-内酰胺酶多重耐药
- 食源性蜡样芽胞杆菌的快速检测及其毒素的研究
- 秦丽云吕国平潘琢张鑫郭玉梅王苋剧慧栋齐丽荣
- 该项目针对蜡样芽胞杆菌的快速检测、监测研究、毒力研究、分子分型等方面为切入点，研究方法创新性强。对食品中蜡样芽胞杆菌快速检测方法进行了研究，使用传统分离、API50CH系统生化、实时荧光PCR特异性检测相结合的方法，优化...
- 关键词：
- 关键词：食源性疾病
- 停乳链球菌ISP基因的克隆与表达及其免疫原性研究被引量：5
- 2015年
- 根据GenBank报道的停乳链球菌免疫分泌蛋白基因(immunogenic secreted protein,ISP)序列设计引物,PCR扩增得到1 550bp的isp片段,其基因序列与GenBank提交序列的同源性为98.13%.将isp基因与表达载体pET-25b(+)连接,成功构建重组质粒pET-25b(+)-isp.转化大肠杆菌BL21(DE3),成功得到阳性表达重组菌株BL21(pET-25b(+)-isp).经IPTG诱导后,SDS-PAGE与Western blot检测得到约55ku的目的蛋白.经优化确定,isp蛋白的最优表达条件:1mmol/L IPTG,37℃诱导18h,且此时表达的蛋白具有良好的抗原性.该研究制备了奶牛乳房炎停乳链球菌的基因工程疫苗,并对其免疫原性进行了探究,为奶牛乳房炎的免疫防治奠定了基础.
- 李月颖朱松剧慧栋刘文青赵宝华裴艳涛
- 关键词：奶牛乳房炎停乳链球菌基因工程疫苗免疫原性
- 食源性变形杆菌氨基糖苷类修饰酶基因及16SrRNA甲基化酶基因研究
- 2015年
- 目的了解食源性变形杆菌的氨基糖苷类耐药基因情况。方法收集2011—2014年石家庄市售各类食品中分离到的对阿米卡星和庆大霉素至少有一种耐药的变形杆菌124株,用PCR、测序和基因库在线比对方法分析6种氨基糖苷类修饰酶基因与3种16S r RNA甲基化酶基因。结果 124株变形杆菌中氨基糖苷类修饰酶耐药基因aac C2、aac A4、aad A1和aph A6的检出率分别为95.2%(118/124)、80.6%(100/124)、73.4%(91/124)和5.6%(7/124);16S r RNA甲基化酶耐药基因rmt B检出率为87.1%(108/124)。aac C1、aad B、arm A和rmt C基因均未检出。结论 aac C2型氨基糖苷类修饰酶基因与rmt B型16S r RNA甲基化酶基因流行是食源性变形杆菌对氨基糖苷类抗生素耐药的重要原因。
- 郭玉梅张慧贤秦丽云剧慧栋
- 关键词：变形杆菌氨基糖苷类氨基糖苷类修饰酶
- 奇异变形杆菌毒力基因检测和药物敏感性分析被引量：8
- 2016年
- 目的了解不同来源奇异变形杆菌毒力基因分布特点及对抗生素的敏感性特点。方法收集分离自2011年-2014年食品和食物中毒样品的44株奇异变形杆菌,采用PCR方法检测常见的毒力基因hpm A、hpm B、hly A、rpo A、mrp A、fli L和zap A;利用BD Phoenix全自动药敏系统测定菌株对20种抗生素的敏感性。结果除hly A基因未检出外,其余6种毒力基因在所有菌株中均有检出,这些毒力基因在不同来源菌株中的分布无特异性;食品分离株对19种抗生素的敏感性明显低于食物中毒分离株;食源性奇异变形杆菌对四环素和多粘菌素的敏感率最低(4.5%)。结论奇异变形杆菌常见的毒力基因不能区分致腹泻株和非致腹泻株;食品分离株对抗生素处于较高的耐药水平。
- 郭玉梅潘琢秦丽云剧慧栋
- 关键词：奇异变形杆菌食物中毒毒力基因药物敏感性
- 奶牛乳房炎主要致病菌的相关研究
- 奶牛乳房炎是一种奶牛的多发病和常见病,是由多种致病微生物引起的局部病变,在奶牛养殖业中造成了巨大损失。因此加强对奶牛乳房炎的预防、诊断和治疗显得尤为重要。无乳链球菌sip基因是该菌重要的吸附和定植因子,其核酸序列具有高度...
- 剧慧栋
- 关键词：奶牛乳房炎停乳链球菌无乳链球菌焦磷酸测序
- 文献传递
- 食源性金黄色葡萄球菌脉冲场凝胶电泳分型分析被引量：9
- 2013年
- 对石家庄地区食源性金黄色葡萄球菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型,建立石家庄市金黄色葡萄球菌PFGE分型的数据库,探讨引起食物中毒金黄色葡萄球菌菌株和其他食源性金黄色葡萄球菌的分子特征。利用PFGE分型技术对2010至2012年石家庄市的75株食源性金黄色葡萄球菌进行全基因组分析,DNA酶切图谱用BioNumerics软件进行聚类分析。75株食源性金黄色葡萄球菌的PFGE图谱的相似性系数在54%～100%之间,经聚类分析得到45个PFGE型别,6起食物中毒的金黄色葡萄球菌分别由PFGE01型、PFGE02型、PFGE11型、PFGE12型、PFGE15型和PFGE45型引起。建立的金黄色葡萄球菌PFGE分型数据库分子型别较多,且存在差异明显的多个克隆系,对石家庄地区金黄色葡萄球菌引起食物中毒的防控和溯源工作有重要意义。
- 吕国平李丽婕芦飞徐保红剧慧栋郭玉梅秦丽云
- 关键词：食物中毒
