叶玲玲
- 作品数：70 被引量：108H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：“重大新药创制”科技重大专项国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生自然科学总论环境科学与工程更多>>
- 用YO-PRO-1和PI联合染色定量检测细胞凋亡被引量：4
- 2005年
- 经不同浓度staurosporine处理诱导凋亡的G7细胞样品,分别用YO-PRO-1/PI和AV/PI进行荧光染色,借助流式细胞仪检测凋亡情况,将两种检测方法得到的结果进行统计学分析显示,二者有显著的相关性(r=0.9659,P<0.01),且没有显著性差异(P<0.05);另外,上述凋亡细胞样品经YO-PRO-1/PI染色后在荧光显微镜下计数凋亡细胞比例的结果与AV/PI流式细胞仪的检测结果也有显著的相关性(r=0.9903,P<0.01),且没有显著性差异(P<0.05)。以上这些结果表明,用YO-PRO-1/PI对细胞进行染色、借助流式细胞仪和荧光显微镜均能准确地检测细胞凋亡,可替代AV/PI流式细胞仪方法用于细胞凋亡的检测。
- 叶玲玲刘红李世崇刘兴茂吴本传陈昭烈
- 关键词：PI细胞凋亡荧光显微镜流式细胞仪
- 具有抗凋亡和细胞增殖调控特性的细胞株及其建立方法
- 本发明将E1B-19K基因和BS-BV基因分别插入到pBudCE4.1载体的EF-1α启动子和CMV启动子下游，构建同时、独立组成型表达E1B-19K和BS-BirA-VP4的载体pBud-E1B-BS-BV。将p27K...
- 叶玲玲陈昭烈李世崇刘红王启伟杨振西
- 文献传递
- 基于枯草芽孢杆菌生物素连接酶的外源基因诱导表达调控系统及其构建方法
- 本发明公开了一种新型的真核细胞基因表达调控，该系统以枯草芽孢杆菌生物素连接酶与转录激活结构域的融合蛋白为调控元件，在生物素存在下可激活弱化启动子下游目的基因的转录。该系统具有背景表达较低、诱导率较高、响应迅速等优点，可适...
- 叶玲玲陈昭烈李世崇刘红何文俊刘兴茂王启伟
- 文献传递
- 乙肝病毒S抗原和preS1抗原表位融合蛋白(S/preS1)在CHO细胞中的稳定高效表达被引量：7
- 2013年
- 含前S蛋白的重组乙型肝炎疫苗是第3代乙肝疫苗研发的重点，有望替代现在广泛使用的基因工程疫苗。构建表达乙肝病毒S抗原和preS1抗原表位（21．47位氨基酸）融合蛋白（S／preS1）的真核表达载体HMRcHEF53u／Neo-S／preSl并转染CHO—S细胞，经ELISA和有限稀释克隆筛选获得了S／preS1表达效率高、体外培养生物学性状好的CHO细胞系10G6。Westernblotting分析证实10G6表达的S／preSI同时保留s和preSl的天然免疫原性。10G6细胞在以活细胞密度和preSI／S浓度为评价指标的连续批次培养过程中保持着稳定的目的产物表达效率和良好的生长特性。采用无血清流加培养工艺，10G6细胞的活细胞密度和preSl／s浓度分另1达至07×10^6～10×10^6cells／mL和17～20mg／L。
- 杨振西李世崇刘红张苗叶玲玲吴彦卓徐明波陈昭烈
- 关键词：乙肝病毒表面抗原疫苗CHO细胞
- 美国生物监测预警科研部署情况分析及启示被引量：2
- 2015年
- 无论自然发生还是人为蓄意产生的生物威胁,早期监测预警与准确检测鉴定对于事件有效应对都具有至关重要的作用。分析了美国卫生与公众服务部、国土安全部、国防部生物监测与检测相关科研部署情况,包括生物传感计划、生物监测计划以及生物侦检装备研发等,同时分析了其主要特点,包括技术创新促进产品更新换代、多样化需求牵引不同技术发展、监督评估保证经费有效使用等。
- 田德桥叶玲玲李晓倩程瑾郑涛
- 关键词：生物监测预警
- 无载体固定化培养模式下HEK293细胞的生长和代谢特征被引量：3
- 2006年
- 利用HEK293细胞在悬浮培养体系中具有聚集成团的体外培养特性,在250ml的spinnerflask搅拌式细胞培养瓶中以悬浮细胞团的形式实施HEK293细胞的无载体固定化培养,以细胞密度、细胞活力、细胞团粒径分布和葡萄糖比消耗率(qglc)、乳酸比产率(qlac)、乳酸转化率(Ylac/glc)、氨基酸消耗为观察指标,同时设置静止培养体系作为参照,考察无载体固定化培养模式下的HEK293细胞生长和代谢特征。观察结果表明,HEK293细胞在搅拌式细胞培养瓶中无载体固定化培养和在组织培养瓶中静止贴壁培养表现为基本相同的细胞生长和代谢特征,平均粒径小于300μm的细胞团中的物质传递能够满足HEK293细胞维持正常生长和代谢的基本需要。HEK293细胞的无载体固定化培养便于实施灌注操作、提高生物反应器单位体积的生产效率。
- 刘兴茂刘红吴本传叶玲玲李世崇倪小平陈昭烈黄培堂
- 关键词：固定化培养HEK293细胞代谢
- 哺乳动物细胞无载体固定化培养方法
- 本发明公开了一种哺乳动物细胞无载体固定化培养方法，包括以下步骤：(1)促使哺乳动物细胞在悬浮培养条件下形成细胞团(2)控制细胞团的平均粒径(3)利用细胞团的自然沉降和旋转过滤器截流细胞团，更换培养基或连续灌注培养基(4)...
- 陈昭烈刘兴茂刘红吴本传叶玲玲倪小平王启伟于蕊
- 文献传递
- 一种支持CHO细胞大规模高密度悬浮培养的无血清培养基
- 本发明公开了一种适于CHO细胞大规模高密度悬浮培养的无血清培养基。该培养基是以DMEM/F12(v/v，1∶1)为基础培养基，并添加了胰岛素、腐胺、转铁蛋白及微量元素等其它物质。本发明提供的无血清培养基具有以下优点：能够...
- 刘兴茂陈昭烈刘红李世崇吴本传叶玲玲谢靖王启伟
- 人工转录因子促进外源基因在CHO细胞中的高效表达被引量：2
- 2007年
- 以酵母转录因子GALA中1-147位氨基酸序列为构建人工转录因子的DNA结合结构域，单纯疱疹病毒转录激活子VP16中12肽（DALDDFDLDMLG）的4个串联重复作为人工转录因子的功能结构域，用SV40的核定位序列（NLS）将两部分连接起来，构建了人工转录因子GVP4并将其克隆进入表达载体pcDNA3．1/Hygro（＋）中。将不同长度的人工转录因子结合序列构建在外源基因表达载体pcDNA3．1（＋）启动子CMV的上游，分别连接外源基因EGFP和tPA。用表达人工转录因子和外源基因的载体共转染CHO细胞，EGFP和tPA在含不同数量人工转录因子结合位点表达载体pcDNA3．1（＋）转染的CHO细胞中的表达水平呈现不同程度的提高。其中，以引入10个人工转录因子结合位点的表达载体的效果最明显，EGFP和t-PA的表达效率均提高2～3倍。结果表明，人工转录因子能有效地促进外源基因在哺乳动物细胞中的表达。
- 李世崇叶玲玲杨海刘红许建吴本传黄培堂陈昭烈
- 关键词：人工转录因子CHO细胞EGFPT-PA
- 羊水多潜能干细胞的体外培养及其生物学特性被引量：5
- 2008年
- 背景:近来发现羊水中含有具有多向分化潜能的干细胞,具有向内胚层、中胚层和外胚层分化的能力。目的:建立羊水多潜能干细胞的体外培养方法,并探讨其生物学特性。设计、时间及地点:单一样本实验,于2007-04/2008-01在解放军军事医学科学院生物工程研究所完成。材料:5份羊水标本来自孕16～22周流产孕妇自愿捐献。方法:从人孕中期羊水中,采用贴壁筛选法分离羊水多潜能干细胞。主要观察指标:采用免疫荧光、流式细胞术和反转录聚合酶链反应等方法分析细胞的生物学特性和鉴定细胞表型。结果:体外培养的羊水多潜能干细胞呈梭形或类上皮细胞样,细胞增殖迅速,细胞倍增时间约为24h;细胞周期中G1、S、G2期的细胞所占百分比分别为72.88%、5.77%、21.35%;细胞表达Oct4、Nanog、SSEA-4、CD44和CD105,不表达CD34和CD45。结论:采用贴壁筛选法获得的羊水多潜能干细胞增殖能力强,同时表达胚胎和成体干细胞的部分标志,可能为介于胚胎干细胞与成体干细胞之间的一种过渡阶段的干细胞。
- 王启伟叶玲玲刘红吴本传刘兴茂李世崇陈昭烈
- 关键词：羊水干细胞生物学特性
