吴海竞
- 作品数：7 被引量：19H指数：3
- 供职机构：苏州大学医学部药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 用于检测可溶性PD－1蛋白的酶联免疫检测试剂盒及检测方法
- 本发明提供了一种检测可溶性PD－1蛋白的酶联免疫检测试剂盒及其检测方法。本发明试剂盒由PD－1融合蛋白标准品、单克隆抗体包被板、酶标单克隆抗体及辅助试剂组成。该试剂盒应用发明人自主研发的两株鼠抗人PD－1杂交瘤及其分泌的...
- 明志君张学光吴海竞陈永井
- 文献传递
- PD-1在器官移植患者T细胞上的表达及其意义被引量：1
- 2008年
- 目的:检测共刺激分子PD-1在应用免疫抑制剂的器官移植患者外周血单个核细胞(PBMCs)和T细胞上PD-1的表达,并对其表达的意义以及抗PD-1单克隆抗体与免疫抑制剂的协同作用进行探讨。方法:采用流式细胞分析技术,应用单标记和双标记的方法,对应用免疫抑制剂的肝移植和肾移植患者的外周血单个核细胞和T细胞上PD-1的表达进行检测。以混合淋巴试验在体外模拟移植模型,应用MTT法,观察PD-1单抗与免疫抑制剂的协同作用。结果:PD-1在应用免疫抑制剂的器官移植患者PBMCs和T细胞上有特异性高表达,环孢素A(CsA)能诱导PD-1在PBMCs上的表达,且抗PD-1单克隆抗体与CsA联用具有协同作用。结论:PD-1可作为抗移植排斥作用的免疫干预新靶点。
- 吴海竞张光波胡玉敏明志君张学光
- 关键词：PD-1T细胞免疫抑制剂器官移植
- PD-1对再生障碍性贫血T细胞功能异常的作用及其机制研究
- 再生障碍性贫血/(aplastic anemia, AA/)是一种由T细胞异常活化引起的以造血组织为靶细胞的特殊的自身免疫性疾病,T细胞的异常活化可能与共刺激分子表达及功能异常有关。目的:研究协同刺激分子PD-1 /(P...
- 吴海竞
- 关键词：PD-1再生障碍性贫血T细胞
- 文献传递
- 川芎嗪体外对活化T细胞的抑制作用被引量：1
- 2009年
- 目的研究川芎嗪体外对活化T细胞的作用及机制。方法应用植物血凝素(PHA)刺激正常人外周血T细胞,经川芎嗪处理后,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)微量酶反应比色法检测细胞增殖,流式细胞术检测CD4+和CD8+T细胞上CD25(白细胞介素-2受体,IL-2R)及负性协同刺激分子程序性死亡分子1(PD-1)的表达,ELISA法检测细胞因子IL-2水平变化。结果川芎嗪(150μg/ml)处理72 h后,能明显抑制T细胞的增殖和活化(P<0.01),并降低IL-2水平(P<0.01);能抑制CD4+和CD8+T细胞上IL-2R的表达(P<0.05);对负性协同刺激分子PD-1的表达作用不明显(P>0.05)。结论川芎嗪对免疫过激T细胞具有一定的抑制作用,其对T细胞的免疫抑制作用可能与降低IL-2的分泌和抑制IL-2R(CD25)的表达有关。
- 吴海竞苗瞄吴子侠明志君张学光
- 关键词：川芎嗪免疫抑制T细胞
- 可溶性PD-1酶联检测试剂盒的研制及其应用被引量：3
- 2008年
- 目的:建立人的可溶性PD-1(sPD-1)酶标检测试剂盒并探讨其检测的临床意义。方法:在已成功获得两株识别位点不同的鼠抗人PD-1分子单克隆抗体(1F2和5F10)的基础上,采用该室制备的鼠抗人PD-1分子单克隆抗体(1F2)作为包被抗体,应用本室制备的单抗5F10经生物素(biotin)标记后作为检测抗体,建立双单抗夹心的人sPD-1酶标检测方法,并对健康供血员、甲亢、血液病患者的血清中sPD-1的含量进行了检测。结果:成功研制了人sPD-1酶联检测试剂盒,其灵敏度为200.00pg/ml。该试剂盒4℃放置1个月,离散度(CV%)<±5.17,回收率为95%～115%,提示该检测试剂盒具有良好的灵敏度、稳定性和准确性。用该试剂盒测得血清中sPD-1的正常值为1.103±0.240ng/ml,再生障碍性贫血患者血清中sPD-1的含量明显高于正常对照组,而甲亢和器官移植病人血清中sPD-1的含量和正常值相比没有显著差异(P<0.05)。结论:成功研制了检测人sPD-1酶标检测试剂盒,并首次发现再生障碍性贫血患者血清中sPD-1的含量较高,该试剂盒在临床病人sPD-1的检测中具有潜在的应有价值。
- 吴海竞陈永井苗瞄张光波胡玉敏明志君张学光
- 两株鼠抗人PD-1单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定被引量：7
- 2009年
- 目的:制备鼠抗人PD-1单克隆抗体(mAb)及鉴定其生物学特性。方法:以基因转染细胞PD-1/L929为免疫原,免疫BALB/c小鼠;采用淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,经选择性克隆化培养及流式细胞术(FCM)分析,筛选分泌鼠抗人PD-1分子mAb的杂交瘤细胞株;采用Ig亚型快速定性试纸法、染色体核型分析、Western blot、竞争结合抑制试验及肿瘤细胞株测定等方法对mAb进行生物学特性鉴定。结果:获得了2株持续稳定分泌鼠抗人PD-1mAb的杂交瘤细胞株,命名为1F2和5F10。对其生物学特性的鉴定结果表明,均为条带相对分子质量在(Mr)55000左右的免疫球蛋白,具有不同的PD-1结合位点;1F2mAb可识别SKHep-1和7721细胞株表面的PD-1分子,而5F10可识别Raji细胞株的PD-1分子。结论:成功获得了2株鼠抗人PD-1杂交瘤及其分泌的mAb。
- 明志君吴海竞张光波胡玉敏邱玉华张学光
- 关键词：PD-1杂交瘤单克隆抗体
- 七叶皂苷体外抗SGC-7901细胞的作用及机制研究被引量：7
- 2009年
- 目的研究七叶皂苷体外抗SGC-7901肿瘤细胞的作用及其机制。方法采用MTT法观察药物对SGC-7901肿瘤细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞仪检测SGC-7901肿瘤细胞周期的变化;FITC-AnnexinⅤ/PI双标记检测SGC-7901肿瘤细胞的凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2的表达。结果七叶皂苷可明显抑制SGC-7901肿瘤细胞的增殖,并抑制细胞周期和诱导细胞发生凋亡,可下调凋亡相关蛋白Bcl-2的表达。结论七叶皂苷体外对SGC-7901肿瘤细胞具有良好的抑制作用,并可诱导细胞发生凋亡。
- 吴子侠吴海竞曹莉孙晓飞明志君张学光
- 关键词：七叶皂苷细胞凋亡
