目的探讨巴戟天糖链诱导骨骼肌成肌细胞向心肌样细胞分化的作用。方法巴戟天糖链分为大、中、小三个剂量组(500、300和100μg/ml),采用离体纯化培养乳鼠双侧后肢骨骼肌成肌细胞,观察给药前后成肌细胞对异丙肾上腺素(IP)的正性变时作用;RT-PCR法检测成肌细胞中GATA-4 m RNA的表达。结果巴戟天糖链小剂量组成肌细胞正性变时作用不明显(P>0.05),巴戟天糖链中剂量组和大剂量组成肌细胞正性变时作用显著(P<0.05)。与阳性药5-氮杂胞苷相比,巴戟天糖链诱导后,各剂量组均可显著上调心脏转录因子GATA-4 m RNA的表达(P<0.05)。结论巴戟天糖链具有诱导成肌细胞向心肌样细胞分化的潜在可能,诱导后可出现心脏转录因子GATA-4基因的表达。
目的:研究巴戟天寡糖(Morinda officinalis How oligosaccha rides,MOO)诱导成肌细胞增殖、分化的机制并观察其是否可诱导心肌细胞标志物的表达,为临床探索运用心脏组织工程学治疗心肌梗死提供更有效的依据。方法:采用出生1~3d的SD大鼠乳离体差速贴壁法纯化培养双侧后肢骨骼肌成肌细胞的方法,用24h后的原代成肌细胞进行试验。实验分5组:空白对照组、5-氮杂胞苷(10μmol/ml)阳性药对照组、MOO各剂量(100gg/ml、300gg/ml、500μg/m1)组。分别检测以下指标:(1)观察加药前后成肌细胞形态学改变。(2)Desmin(结蛋白)鉴定。(3)加药前后成肌细胞对异丙肾上腺素(Isoprenaline,IP)的反应。(4)采用RT-PCR法检测成肌细胞中TGF-β1、GATA-4mRNA的表达。结果:(1)与空白对照组相比,MOO诱导48h后成肌细胞生长密集,胞浆丰富,增殖明显,具有较好的折光性。并呈一定方向性的长轴平行排列,细胞融合的肌管增多,分化良好,有明显自发性搏动的收缩现象,生长状态明显好于空白对照组。(2)与空白对照组相比,IP对阳性药对照组和MOO小剂量组成肌细胞正性变时作用不明显(P〉0.05);而IP对MOO中剂量组和大剂量组成肌细胞正性变时作用显著(P〈0.05)。